孫 艷，徐風(fēng)華，王歡歡（解放軍總醫(yī)院藥品保障中心，北京 100853）

蜂地麻涂劑的穩(wěn)定性研究

孫 艷，徐風(fēng)華，王歡歡（解放軍總醫(yī)院藥品保障中心，北京 100853）

目的：考察蜂地麻涂劑的穩(wěn)定性，為臨床合理貯存、使用該藥品提供參考。方法：采用多梯度HPLC法同時(shí)測(cè)定鹽酸丁卡因和鹽酸麻黃堿的含量，按《中國(guó)藥典》（2010年版）藥物制劑穩(wěn)定性試驗(yàn)指導(dǎo)原則進(jìn)行影響因素試驗(yàn)和長(zhǎng)期試驗(yàn)，考察蜂地麻涂劑在不同試驗(yàn)條件下的外觀性狀、pH以及主成分（鹽酸丁卡因和鹽酸麻黃堿）含量變化。結(jié)果：影響因素試驗(yàn)結(jié)果顯示，樣品在60 ℃及高濕條件下含量有所下降；長(zhǎng)期試驗(yàn)考察結(jié)果顯示各項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)未見(jiàn)明顯變化。結(jié)論：蜂地麻涂劑的穩(wěn)定性較好，可將其有效期暫定為1年。

蜂地麻涂劑；穩(wěn)定性；影響因素；長(zhǎng)期試驗(yàn)

口腔潰瘍是發(fā)生在口腔黏膜上的淺表性潰瘍，具有周期性、復(fù)發(fā)性及自限性等特點(diǎn)，醫(yī)學(xué)上稱(chēng)為“復(fù)發(fā)性口腔潰瘍”。其發(fā)病因素較多，包括免疫學(xué)因素、遺傳因素、內(nèi)分泌因素、消化系統(tǒng)因素、環(huán)境因素、感染因素、微循環(huán)障礙及血液流變學(xué)異常等，目前認(rèn)為是多種因素綜合作用的結(jié)果[1]。臨床上主要的治療原則是消除病因、增強(qiáng)免疫力、對(duì)癥治療，以減少口腔潰瘍的復(fù)發(fā)次數(shù)，延長(zhǎng)間隙期，減輕疼痛，促進(jìn)愈合[2-3]。蜂地麻涂劑為我院非標(biāo)準(zhǔn)制劑[總制字（2011）B01019]，其主藥為鹽酸丁卡因和鹽酸麻黃堿，臨床用于口腔潰瘍的局部治療[4]，具有止痛、保護(hù)黏膜上皮的作用，治療效果顯著。本研究對(duì)蜂地麻涂劑進(jìn)行影響因素試驗(yàn)及12個(gè)月的長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)，以期為制定該產(chǎn)品的有效期提供參考。

1 儀器與試藥

Agilent 1200 高效液相色譜儀（含G1322A型脫氣機(jī)、G1314A型四元梯度泵、G1329B型自動(dòng)進(jìn)樣器、G1316A型柱溫箱、G1314B紫外檢測(cè)器，美國(guó)安捷倫科技有限公司），AG135分析天平（美國(guó)梅特勒托利多公司），HI 9321 pH計(jì)（意大利哈納儀器有限公司），隔水式培養(yǎng)箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司），SGSP-02電熱恒溫隔水式培養(yǎng)箱（湖北黃石恒豐醫(yī)療器械有限公司）。

鹽酸丁卡因（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)100456-200301）；鹽酸麻黃堿（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)171241-200506）；乙腈（Fisher公司，批號(hào)1002041）；硝酸鉀（化學(xué)純，批號(hào)20030626）；磷酸二氫鈉（分析純，批號(hào)970126）；三乙胺（分析純，批號(hào)20081206）；磷酸（分析純，批號(hào)20091106）。

蜂地麻涂劑（解放軍總醫(yī)院制劑室配制，規(guī)格：5 mL，批號(hào)20120726-1、20120726-2、20120726-3）。

2 方法與結(jié)果

2.1 性狀與pH值

本品為淡黃色粘稠澄明液體。采用HI 9321 pH計(jì)測(cè)定，本品pH 3.0 ～ 4.5。

2.2 含量測(cè)定

采用多梯度HPLC法同時(shí)測(cè)定蜂地麻涂劑中鹽酸丁卡因和鹽酸麻黃堿的含量[5-6]。

2.2.1 色譜條件采用Agilent十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以0.05 mol·L-1磷酸二氫鈉溶液（含0.2%三乙胺）-乙腈（90∶10，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至4.0）為流動(dòng)相A，0.05 mol·L-1磷酸二氫鈉溶液（含0.2%三乙胺）-乙腈（30∶70，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至4.0）為流動(dòng)相B，檢測(cè)波長(zhǎng)為218 nm，流速為1.0 mL·min-1，進(jìn)樣量20 μL。梯度洗脫程序詳見(jiàn)表1。

表1 梯度洗脫程序Tab 1 Process of gradient elution

2.2.2 溶液的配制1）對(duì)照品溶液：取對(duì)照品鹽酸丁卡因和鹽酸麻黃堿適量，分別精密稱(chēng)定，加水溶解，混勻制成1 mL約含0.25 mg的溶液，即得對(duì)照品溶液。2）供試品溶液：取本品適量，加水溶解制成每1 mL約含鹽酸麻黃堿0.25 mg的溶液，搖勻，即得供試品溶液。3）陰性對(duì)照溶液：取蜂蜜適量，加水制成與樣品同濃度的溶液作為陰性對(duì)照溶液。

2.2.3 方法學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果[7]在“2.2.1”項(xiàng)色譜條件下，鹽酸麻黃堿對(duì)照品的保留時(shí)間約為5.7 min，鹽酸丁卡因?qū)φ掌返谋Ａ魰r(shí)間約為37.1 min，兩者的分離度大于5.0，符合要求，空白輔料對(duì)含量測(cè)定沒(méi)有干擾，見(jiàn)圖1。理論塔板數(shù)按鹽酸丁卡因峰計(jì)算為46 955，按鹽酸麻黃堿峰計(jì)算為5545。鹽酸丁卡因在50.26 ～753.90 μg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r = 1.000），平均回收率為100.25%，RSD為0.75%（n = 9）；鹽酸麻黃堿在51.38 ～ 770.70 μg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r = 0.999 5），平均回收率為99.57%，RSD為0.91%（n = 9）。

2.3 影響因素試驗(yàn)

2.3.1 高溫試驗(yàn)取供試品（批號(hào)20120726-3），置適宜的潔凈容器中，60 ℃溫度下放置10 d，于第5天和第10天取樣，按穩(wěn)定性重點(diǎn)考察項(xiàng)目進(jìn)行檢測(cè)。

圖1 蜂地麻涂劑高效液相色譜圖A – 陰性對(duì)照，B – 對(duì)照品，C – 供試品；1 – 鹽酸麻黃堿，2 – 鹽酸丁卡因Fig 1 HPLC chromatograms of pigmentum FengdimaA – negative control, B – reference, C – sample; 1 – ephedrine hydrochloride, 2 – tetracaine hydrochloride

2.3.2 高濕試驗(yàn)取供試品（批號(hào)20120726-3），置恒濕密閉容器中，在25 ℃、相對(duì)濕度（90±5）%條件下放置10 d，于第5天和第10天取樣，按穩(wěn)定性重點(diǎn)考察項(xiàng)目進(jìn)行檢測(cè)。

2.3.3 強(qiáng)光照射試驗(yàn)取供試品（批號(hào)20120726-3），放在裝有日光燈的光照箱內(nèi)，照度為（4500±500） lx，放置10 d，于第5天和第10天取樣，按穩(wěn)定性重點(diǎn)考察項(xiàng)目進(jìn)行檢測(cè)。詳見(jiàn)表2。

表2 影響因素試驗(yàn)結(jié)果Tab 2 Results of the in fl uence factors test

表2結(jié)果顯示，蜂地麻涂劑在高溫、高濕、強(qiáng)光照射條件下，性狀未見(jiàn)明顯改變，pH值較穩(wěn)定。鹽酸丁卡因和鹽酸麻黃堿對(duì)光照比較穩(wěn)定，含量沒(méi)有明顯變化；對(duì)濕度和溫度較為敏感，在高溫和高濕條件下的含量有所下降。

2.4 長(zhǎng)期試驗(yàn)

按《中國(guó)藥典》附錄藥物穩(wěn)定性試驗(yàn)指導(dǎo)原則長(zhǎng)期試驗(yàn)的要求及相關(guān)文獻(xiàn)[8-9]進(jìn)行穩(wěn)定性試驗(yàn)，取供試品（批號(hào)20120726-1、20120726-2、20120726-3）3批，市售包裝，置隔水式培養(yǎng)箱中，在溫度（25±2）℃、相對(duì)濕度（60±10）%的條件下放置12個(gè)月。分別于0、3、6、9、12個(gè)月取樣，按穩(wěn)定性重點(diǎn)考察項(xiàng)目進(jìn)行檢測(cè)。詳見(jiàn)表3。

表3 長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果Tab 3 Results of the long-term stability test

表3結(jié)果顯示，蜂地麻涂劑在溫度（25±2）℃、相對(duì)濕度（60±10）%的條件下放置0、3、6、9、12個(gè)月，性狀未見(jiàn)明顯改變，pH值比較穩(wěn)定。室溫放置12個(gè)月鹽酸丁卡因含量基本不變，鹽酸麻黃堿含量有所下降但仍在合格范圍內(nèi)。

3 討論

蜂地麻涂劑源于我院醫(yī)院制劑蜂地麻滴眼液，在臨床實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)蜂地麻滴眼液對(duì)口腔潰瘍具有良好的治療作用，其研究結(jié)果表明本制劑穩(wěn)定性較好。由于處方中蜂蜜的成分復(fù)雜，制成蜂地麻涂劑后，不同的制備工藝和包裝條件有可能對(duì)制劑質(zhì)量產(chǎn)生影響，因此有必要對(duì)本品進(jìn)行穩(wěn)定性評(píng)價(jià)。根據(jù)穩(wěn)定性考察結(jié)果，蜂地麻涂劑穩(wěn)定性較好，可將有效期暫定為1年，貯藏條件為密閉、在陰涼處保存。

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The stability study on pigmentum Fengdima

SUN Yan, XU Feng-hua, WANG Huan-huan(Department of Pharmaceutical Care, PLA General Hospital, Beijing 100853, China)

Objective:To investigate the stability of pigmentum Fengdima and provide reference for its storage and utilization.Methods:A multiple gradient HPLC method was used to simultaneously determine the content of tetracaine hydrochloride and ephedrine hydrochloride. The appearance, pH and contents of tetracaine hydrochloride and ephedrine hydrochloride were investigated by in fl uence factors test and long-term test, according to the guidance for stability test of preparation stated in Chinese Pharmacopeia (2010 edition).Results:The results of in fl uence factors test showed that the contents of tetracaine hydrochloride and ephedrine hydrochloride decreased under 60 ℃ and high humidity conditions. Long-term test results showed that no obvious change was observed in quality indexes.Conclusion:Pigmentum Fengdima was a relatively stable preparation, and its shelf-life was tentatively set up as one year.

Pigmentum Fengdima; Stability; In fl uence factor; Long-term test

R917

A

1672 – 8157(2014)04 – 0209 – 03

2014-02-20

2014-05-08）

北京市中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)課題（FB724）

孫艷，女，副主任藥師，主要從事醫(yī)院藥學(xué)工作。E-mail：301sunyan@sina.cn