王斌仙

(寧波市鄞州區(qū)首南街道經(jīng)濟(jì)發(fā)展科，浙江寧波315194)

豬瘟(CSF)以出血和發(fā)熱為主要特征，呈急性或慢性經(jīng)過(guò)，是一種高度接觸性傳染病，被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)列為A 類動(dòng)物傳染病。我國(guó)列為一類動(dòng)物疫病，主要通過(guò)疫苗接種控制該病。我國(guó)生產(chǎn)的豬瘟兔化弱毒疫苗性能穩(wěn)定、安全、免疫效果良好，且無(wú)殘留，是國(guó)際公認(rèn)安全有效的弱毒疫苗。

1 疫苗種類

目前我國(guó)生產(chǎn)的豬瘟疫苗主要有4 種，即豬瘟兔化弱毒脾淋苗、豬瘟兔化弱毒組織苗、豬瘟細(xì)胞苗(牛睪丸原代細(xì)胞疫苗、豬瘟傳代細(xì)胞苗)和豬瘟豬丹毒豬肺疫三聯(lián)苗。

1.1 豬瘟兔化弱毒脾淋苗 系兔化弱毒株接種于成年兔，采用無(wú)菌法收獲含毒濃度高的淋巴結(jié)、脾臟，通過(guò)減毒制備而成的疫苗。特點(diǎn)是免疫原性強(qiáng)、效果好，免疫后抗體產(chǎn)生快、持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)。

脾淋苗生產(chǎn)工藝過(guò)程中因含有大量免疫相關(guān)轉(zhuǎn)移因子，所以能起到免疫增強(qiáng)作用。臨床上多用于緊急免疫接種，效果優(yōu)于細(xì)胞苗。因采用活體動(dòng)物生產(chǎn)，兔脾臟和淋巴結(jié)數(shù)量較少，生產(chǎn)量小，所以成本較高。加之用于制苗的兔子缺乏標(biāo)準(zhǔn)(特別是外源病原檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn))，且生產(chǎn)工藝復(fù)雜，所以有不法企業(yè)在脾淋苗中摻入細(xì)胞苗，甚至將染有牛粘膜病毒的疫苗銷售給用戶，可能造成豬瘟免疫失敗，疫情長(zhǎng)年不斷。2009年中國(guó)獸藥監(jiān)察所采用ELISA 方法檢查22 批豬瘟脾淋苗，發(fā)現(xiàn)有5 批疫苗中摻入了細(xì)胞苗。脾淋苗生產(chǎn)過(guò)程控制困難，特別是部分廠家由于設(shè)備簡(jiǎn)陋，外源病毒污染機(jī)會(huì)較大，造成兔體實(shí)質(zhì)器官載毒量偏低，導(dǎo)致單位頭份疫苗內(nèi)所含抗原量偏低，且可能所含異源組織量偏高，故臨床使用時(shí)需加大劑量，易引起過(guò)敏反應(yīng)。

1.2 豬瘟兔化弱毒組織苗 系豬瘟兔化弱毒株接種于乳兔，經(jīng)無(wú)菌采集肌肉及實(shí)質(zhì)臟器制備的疫苗。

該苗的特點(diǎn)是免疫原性較強(qiáng)，免疫效果較好，免疫后抗體產(chǎn)生較快，抗體滴度持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)。

1.3 豬瘟細(xì)胞苗

1.3.1 豬瘟牛睪丸原代細(xì)胞苗 系利用牛睪丸原代細(xì)胞制造的疫苗，優(yōu)點(diǎn)是可大批量生產(chǎn)，生產(chǎn)過(guò)程容易監(jiān)控，價(jià)格低廉，缺點(diǎn)是效價(jià)不穩(wěn)定。由于每次制造疫苗的細(xì)胞來(lái)源于不同牛體，批間差異較大，另外由于感染病毒性腹瀉病毒(BVDV)的牛群比例較高，利用牛睪丸細(xì)胞生產(chǎn)疫苗易受BVDV 污染。BVDV 與CSFV 同屬黃病毒科、瘟病毒屬，由于競(jìng)爭(zhēng)抑制原因，豬瘟病毒在細(xì)胞中的增殖會(huì)明顯受到影響，導(dǎo)致豬瘟牛睪丸原代細(xì)胞苗病毒滴度較低，同時(shí)由于培養(yǎng)細(xì)胞用的牛血清往往含有BVDV 抗體，用這種苗免疫不但可能干擾豬瘟疫苗抗體的產(chǎn)生，引起免疫失敗，還易使豬體感染BVDV，引起母豬繁殖障礙。病毒還可通過(guò)胎盤傳給仔豬，甚至引起仔豬發(fā)病。2009年中國(guó)獸藥監(jiān)察所采用PCR 方法對(duì)23批次豬瘟牛睪丸細(xì)胞苗進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有5 批次疫苗污染有BVDV，污染率為21.74%。許多豬場(chǎng)免疫接種豬瘟疫苗后，仍然發(fā)生豬瘟，多數(shù)可能是由于接種了被BVDV 污染的豬瘟牛睪丸細(xì)胞疫苗后誘發(fā)的，該問(wèn)題應(yīng)引起高度重視。

1.3.2 豬瘟傳代細(xì)胞苗 系采用國(guó)際認(rèn)證的同源傳代ST 細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，具有批間差異極小，穩(wěn)定性好，病毒培養(yǎng)液中病毒含量高，可大批量生產(chǎn)，且生產(chǎn)過(guò)程容易監(jiān)控，可有效避免BVDV 病毒污染的威脅。中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所等選擇了一種對(duì)豬等動(dòng)物安全、適宜于豬瘟病毒增殖的傳代細(xì)胞系——ST 細(xì)胞系，將ST 細(xì)胞系接種于裸鼠，觀察近100 d，未見(jiàn)致瘤現(xiàn)象及組織病理變化，將該細(xì)胞連傳20 多代，也未見(jiàn)染色體變化，證明該細(xì)胞系十分安全。豬瘟兔化弱毒病毒在該細(xì)胞中能高滴度增殖，通常情況下，每mL 細(xì)胞疫苗毒液的毒價(jià)能穩(wěn)定在50 到100萬(wàn)個(gè)兔體感染量，如采用生物反應(yīng)器則可達(dá)到300萬(wàn)倍左右，是原代牛睪丸細(xì)胞豬瘟疫苗毒價(jià)的10～50 倍。因該苗良好的安全性，應(yīng)用于豬體十分安全。免疫效果檢驗(yàn)顯示，將該疫苗作5000 倍稀釋免疫豬，仍能100%抵抗強(qiáng)毒攻擊，高出牛睪丸原代細(xì)胞生產(chǎn)的疫苗近20 倍。實(shí)驗(yàn)室免疫接種一次免疫期可達(dá)1年以上，推廣應(yīng)用效果良好。

1.4 豬瘟豬丹毒豬肺疫三聯(lián)苗 主要成分為豬瘟兔化弱毒株(C 株)接種易感細(xì)胞，收獲細(xì)胞培養(yǎng)病毒液，以適當(dāng)比例與豬丹毒桿菌弱毒菌液、豬源多殺性巴氏桿菌弱毒菌液混合，加適宜穩(wěn)定劑，經(jīng)冷凍真空干燥制成。

該疫苗多用于預(yù)防豬瘟、豬丹毒和豬肺疫。一般不用于首免，多用于60日齡后的肥育豬。

2 疫苗選擇

豬瘟疫苗的生產(chǎn)廠家很多，疫苗生產(chǎn)渠道十分復(fù)雜，所以應(yīng)選擇生產(chǎn)設(shè)備，技術(shù)力量，生產(chǎn)工藝等相對(duì)較優(yōu)的廠家。

RID 是衡量豬瘟疫苗病毒含量高低的一個(gè)重要指標(biāo)。隨著疫病防控難度的加大，每頭份豬瘟細(xì)胞苗抗原含量國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)已經(jīng)升為750RID，脾淋苗抗原含量國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)為150RID。實(shí)際生產(chǎn)中，大部分疫苗企業(yè)的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)均高于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(大多數(shù)企業(yè)宣傳其豬瘟疫苗抗原含量≥7500RID，部分高效苗抗原含量則高達(dá)1.2 萬(wàn)RID)。但RID 并非越高越好，應(yīng)根據(jù)臨床情況選擇適當(dāng)疫苗進(jìn)行免疫接種。

疫苗接種后應(yīng)及時(shí)進(jìn)行抗體檢測(cè)，一定的抗體水平是保證防控豬瘟的基礎(chǔ)，但過(guò)高的抗體水平可能與豬瘟野毒感染有關(guān)?？贵w水平不佳時(shí)需考慮豬群日齡、免疫時(shí)機(jī)、檢測(cè)時(shí)間、非豬瘟苗免疫干擾和臨床表現(xiàn)等多種因素。

3 疫苗使用

3.1 疫苗的儲(chǔ)存和運(yùn)輸 豬瘟疫苗對(duì)運(yùn)輸和貯藏條件要求較高，凍干苗應(yīng)在－15℃下貯藏，加耐熱保護(hù)劑的疫苗應(yīng)在2～8℃儲(chǔ)存，在8℃以下冷藏運(yùn)輸。疫苗稀釋后，如氣溫在15℃以下，應(yīng)在6 h 內(nèi)用完，如氣溫在15℃～27℃，應(yīng)在3 h 內(nèi)用完。試驗(yàn)證明，如在夏季早晨剛稀釋的疫苗到傍晚檢測(cè)，效價(jià)可損失90%左右。

3.2 制定科學(xué)的免疫程序 免疫程序包括疫苗選擇、首免日齡、接種次數(shù)和接種間隔時(shí)間等。制定免疫程序時(shí)應(yīng)考慮當(dāng)?shù)氐囊咔楹鸵卟顩r、豬只健康狀況、飼養(yǎng)管理?xiàng)l件和母源抗體水平等因素。如免疫程序不合理、首免提前或推遲、免疫間隔時(shí)間不當(dāng)、接種次數(shù)過(guò)多或過(guò)少等，均會(huì)影響疫苗的免疫效果，導(dǎo)致免疫失敗。對(duì)仔豬來(lái)說(shuō)，首免日齡的選擇應(yīng)充分考慮母源抗體的影響，過(guò)早則會(huì)受到母源抗體干擾，導(dǎo)致母源抗體快速下降和免疫失敗，過(guò)晚則存在免疫空白期。生產(chǎn)實(shí)踐中只有接種健康豬只，才能產(chǎn)生良好的免疫應(yīng)答。

3.3 規(guī)模豬場(chǎng)推薦免疫程序

3.3.1 豬瘟脾淋組織苗(兔源)

仔豬:超前免疫:出生當(dāng)天哺喂初乳前，每頭肌注0.5 頭份;35日齡二免，肌注1 頭份;65日齡三免，肌注2 頭份。常規(guī)免疫:仔豬23～25日齡首免，每頭肌注1 頭份;65～70日齡二免，肌注2 頭份。飼養(yǎng)育肥豬期間不再接種豬瘟疫苗;培育后備種豬，應(yīng)于第1 次發(fā)情配種前15 d 加強(qiáng)免疫1 次，每頭肌注2 頭份。

生產(chǎn)母豬:每次母豬產(chǎn)仔后15 d 免疫1 次，每頭肌注2 頭份。妊娠期間不接種豬瘟疫苗。

種公豬:每年4月份與9月份各免疫1 次，每次每頭肌注2 頭份。

3.3.2 ST 豬瘟傳代細(xì)胞疫苗

仔豬:超前免疫:1日齡每頭肌注0.5 頭份，35日齡肌注1 頭份，70日齡肌注2 頭份。常規(guī)免疫:25～30日齡，每頭肌注1 頭份，60～65日齡，肌注2頭份。經(jīng)上述免疫后，飼養(yǎng)育肥豬期間不再接種豬瘟疫苗;培育后備種豬，應(yīng)于發(fā)情配種前20 d，加強(qiáng)免疫接種1 次，每頭肌注2 頭份。

生產(chǎn)母豬:產(chǎn)仔后10 d 免疫接種1 次，每頭肌注2 頭份。

種公豬:每年4月份與9月份免疫接種1 次，每次每頭肌注2 頭份。

3.4 稀釋液的使用 豬瘟苗生產(chǎn)廠家一般均配備稀釋液，但三聯(lián)稀釋液的選用應(yīng)區(qū)別對(duì)待。20%氫氧化鋁生理鹽水可減緩注苗后的應(yīng)激反應(yīng)，延長(zhǎng)免疫保護(hù)期，有利于豬丹毒和豬肺疫的免疫效果，但可加速豬瘟弱毒的降解。滅菌生理鹽水則可減少牛睪丸細(xì)胞的影響，減緩豬瘟弱毒的降解，有利于豬瘟疫苗的免疫效果。

3.5 其他免疫抑制病的防控 免疫抑制性疾病及各種免疫抑制因素等都可能對(duì)豬瘟免疫產(chǎn)生一定干擾，影響豬瘟的免疫效果。因此，在搞好豬瘟免疫的同時(shí)，還要預(yù)防多種免疫抑制性疾病，如藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒病、偽狂犬病、細(xì)小病毒病、豬流感及喘氣病等，確保豬瘟的免疫效果。