仲肖靜 李菊萍 顏麗麗

子宮內(nèi)膜腺癌中MMP-9表達(dá)的免疫組化研究

仲肖靜 李菊萍 顏麗麗

目的探討基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)在子宮內(nèi)膜增生癥及子宮內(nèi)膜腺癌組織中的表達(dá)及其與子宮內(nèi)膜腺癌的臨床病理關(guān)系。方法采用免疫組化法檢測(cè)隨機(jī)篩選、分組的不同子宮內(nèi)膜組織切片中MMP-9的表達(dá)情況。結(jié)果MMP-9在正常子宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜增生癥和子宮內(nèi)膜腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為25.0%、33.4%、95.0%, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。其表達(dá)強(qiáng)度與子宮內(nèi)膜腺癌的手術(shù)-病理分期、組織學(xué)分級(jí)、肌層浸潤(rùn)深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān), 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論MMP-9在子宮內(nèi)膜增生癥進(jìn)展至子宮內(nèi)膜腺癌這一過(guò)程中起促進(jìn)作用, 且強(qiáng)表達(dá)與子宮內(nèi)膜腺癌的浸潤(rùn)深度和轉(zhuǎn)移程度有關(guān), 為子宮內(nèi)膜腺癌的早期臨床診斷和靶向治療提供理論依據(jù)。

基質(zhì)金屬蛋白酶-9；子宮內(nèi)膜腺癌；免疫組化；腫瘤；轉(zhuǎn)移

近年來(lái)關(guān)于基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)在子宮內(nèi)膜癌中的研究較多, 但研究結(jié)果不一致, 目前仍存在爭(zhēng)議。本研究通過(guò)免疫組化方法檢測(cè)MMP-9在不同子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá),探討其與子宮內(nèi)膜腺癌的生物學(xué)行為的相關(guān)性。

1 材料與方法

1.1材料 標(biāo)本均取自2010年1月～2013年12月在本院的子宮內(nèi)膜腺癌組織蠟塊100例, 子宮內(nèi)膜增生組織蠟塊30例, 正常子宮內(nèi)膜蠟塊20例作對(duì)照。年齡37～68歲。子宮內(nèi)膜腺癌病例依照國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO2009年)標(biāo)準(zhǔn)［7］進(jìn)行分級(jí)、分期。研究經(jīng)患者同意, 并通過(guò)倫理委員會(huì)。

1.2實(shí)驗(yàn)試劑及方法 主要試劑：MMP-9鼠抗人單克隆抗體(濃縮型)、即用型鏈霉素抗生物蛋白-過(guò)氧化酶(streptavidin peroxidase, SP)超敏試劑盒(北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司)。主要實(shí)驗(yàn)儀器：DK-420恒溫水浴箱(上?；巧锟萍加邢薰?；采用SP方法檢測(cè)MMP-9在各組組織中表達(dá)。用已知的肝癌組織的陽(yáng)性切片作陽(yáng)性對(duì)照, 用磷酸鹽(PBS)緩沖液代替一抗孵育切片為陰性對(duì)照。主要實(shí)驗(yàn)步驟：3% H2O2孵育；于98℃下0.1 mmol/L磷酸緩沖液修復(fù)抗原,滴加一抗。MMP-9抗體稀釋后的質(zhì)量濃度為1:100, 滴加二抗；滴加SP復(fù)合物；DAB 染色；蘇木素復(fù)染。步驟按說(shuō)明書操作。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1各組子宮內(nèi)膜組織中MMP-9的表達(dá)情況 MMP-9蛋白在正常子宮內(nèi)膜組織、子宮內(nèi)膜增生癥組織和子宮內(nèi)膜癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為25.0%、33.4%、95.0%, 從正常子宮內(nèi)膜組織、增生的子宮內(nèi)膜組織至子宮內(nèi)膜腺癌組織, MMP-9的陽(yáng)性表達(dá)率呈顯著上升的趨勢(shì), 兩兩比較, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

2.2子宮內(nèi)膜腺癌組織中MMP-9的表達(dá)情況 本研究結(jié)果表明, 在子宮內(nèi)膜腺癌組織中, MMP-9的表達(dá)強(qiáng)度與手術(shù)-病理分期的早晚、組織學(xué)分級(jí)的高低、肌層浸潤(rùn)的程度及淋巴結(jié)有無(wú)轉(zhuǎn)移均相關(guān), 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

3 討論

子宮內(nèi)膜腺癌的重要生物學(xué)特征是腫瘤的浸潤(rùn)與轉(zhuǎn)移,腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞外基質(zhì)降解使腫瘤細(xì)胞的基底膜完整性遭到破壞, 繼而發(fā)生了腫瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移［1］。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn), MMP-9在正常子宮內(nèi)膜組織中表達(dá)多為陰性, 在子宮內(nèi)膜腺癌組織中的表達(dá)強(qiáng)度最高, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。在子宮內(nèi)膜增生癥各級(jí)組織中表達(dá)呈陽(yáng)性, 且隨子宮內(nèi)膜增生程度的加重, MMP-9的陽(yáng)性表達(dá)程度也隨之增強(qiáng), 但各級(jí)子宮內(nèi)膜增生癥中MMP-9的表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05), 不排除與樣本數(shù)量少有關(guān)MMP-9在子宮內(nèi)膜腺癌組織中的強(qiáng)表達(dá)還與子宮內(nèi)膜腺癌的臨床分期相關(guān)［2］。本研究結(jié)果提示：MMP-9的表達(dá)水平在子宮內(nèi)膜腺癌的晚期組織中的表達(dá)強(qiáng)度及陽(yáng)性率高于早期組織, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05), 同時(shí)在組織分化差的組織中表達(dá)增強(qiáng),且隨著分化級(jí)別增高, 其表達(dá)水平亦增高。表明MMP-9與其臨床分期有顯著性關(guān)系, 在子宮內(nèi)膜腺癌的轉(zhuǎn)移、侵襲等活動(dòng)中易發(fā)揮著重要的作用。由此推論, MMP-9的高表達(dá)與子宮內(nèi)膜腺癌的惡性程度和易于浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移有關(guān)。

［1］ 黃瑾, 陽(yáng)麗君, 蘇園園, 等.MMP-2、MMP-9在子宮內(nèi)膜增生癥和腺癌中的表達(dá).廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2011(2):129-131.

［2］ 劉琴, 李海, 徐松, 等.STAT3與SOCS3在子宮內(nèi)膜腺癌中的表達(dá)及生物學(xué)行為相關(guān)性分析.臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2013 (17):1350-1352.

2014-07-18］

265600 蓬萊市人民醫(yī)院婦產(chǎn)科(仲肖靜 顏麗麗)；山東省蓬萊市婦幼保健站(李菊萍)

仲肖靜