向麗娟，夏新中，毛坤，張虎

(長江大學(xué) 醫(yī)學(xué)院，湖北 荊州 434023)

長江大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(2012512)

△*

夏新中，教授，主任藥師，碩士生導(dǎo)師，研究方向：天然藥物化學(xué)成分和藥理活性；E-mail：xiaxinzhong@yangtzeu.edu.cn

黃芪抗衰老研究現(xiàn)狀△

向麗娟1，夏新中2*，毛坤1，張虎1

(長江大學(xué) 醫(yī)學(xué)院，湖北 荊州 434023)

以動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和體外實(shí)驗(yàn)兩個(gè)層面就黃芪在抗衰老方面的研究現(xiàn)狀進(jìn)行綜述，為黃芪在抗衰老方面的進(jìn)一步研究及應(yīng)用開發(fā)提供參考。

黃芪；抗衰老；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)；體外實(shí)驗(yàn)；現(xiàn)狀

中藥材黃芪為豆科草本植物蒙古黃芪Astragalusmembranaceus(Fisch.) Bge.var.mongholicus(Bge.) Hsiao或膜莢黃芪A.membranaceus(Fisch.) Bge.的根，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》。具有補(bǔ)氣升陽，固表止汗，利水消腫，生津養(yǎng)血，行滯通痹，托毒排膿，斂瘡生肌的功能。主要產(chǎn)于內(nèi)蒙古、山西、甘肅、黑龍江等地，為國家三級(jí)保護(hù)植物。黃芪的主要化學(xué)成分為多糖類、黃酮類、皂苷類、氨基酸類及少量微量元素[1]，是臨床各科應(yīng)用較為廣泛的中藥之一。隨著研究的深入，其在駐顏抗衰老方面的潛能慢慢被人們發(fā)現(xiàn)。為了解黃芪的研究現(xiàn)狀，促進(jìn)其開發(fā)和應(yīng)用，筆者以動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和體外實(shí)驗(yàn)兩個(gè)層面就黃芪的抗衰老機(jī)制進(jìn)行綜述。

1 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

1.1 D-半乳糖衰老

1.1.1 抗氧化 研究發(fā)現(xiàn)自由基的不斷氧化是機(jī)體衰老的重要原因，因此抗氧化劑可以阻止自由基所致的細(xì)胞衰老現(xiàn)象。自由基學(xué)說認(rèn)為將自由基維持在適當(dāng)水平，可以維持氧化和抗氧化防御之間的平衡，從而抗衰老。

周鵬等[2]采用常規(guī)煎藥方法水煎并濃縮至1 g·mL-1的黃芪為原料，將大鼠分為5組，分別為空白對(duì)照組、黃芪低劑量組、黃芪高劑量組、模型組、六味地黃丸組。除空白對(duì)照組外，其余各組采用皮下連續(xù)注射D-半乳糖50 d建立大鼠衰老模型，各用藥組在造模同時(shí)給予相應(yīng)記錄劑量的藥物；結(jié)果顯示黃芪組與模型組比較，腦組織中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活力增強(qiáng)(P<0.05)，丙二醇(MDA)、一氧化氮(NO)、乙酰膽堿酯酶(TCHE)明顯降低(P<0.05)，證明黃芪具有抗氧化作用。同樣以黃芪水煎劑為原料，許靜等[3]將30只Wister大鼠分為正常對(duì)照組、D-半乳糖模型組和黃芪給藥組，測(cè)定血清MDA、心肌組織脂褐素(LPF)的含量，結(jié)果顯示與正常對(duì)照組比較，D-半乳糖模型組大鼠體內(nèi)血清MDA、心肌LPF含量升高(P<0.01)；而給予黃芪后，D-半乳糖模型大鼠體內(nèi)血清MDA、心肌LPF含量降低(P<0.01)，其中LPF是衰老大鼠內(nèi)存在的一種可以反應(yīng)細(xì)胞被自由基損傷即過氧化程度的物質(zhì)[4]，證明黃芪可以降低脂質(zhì)過氧化水平。

曹艷玲等[5]在探討環(huán)黃芪醇延緩衰老作用及其機(jī)制時(shí)，發(fā)現(xiàn)模型組與正常組比較，肝、心和皮膚的總超氧化物歧化酶(T-SOD)、總抗氧化能力(T-AOC)活性均顯著降低；環(huán)黃芪醇與模型組相比較，能顯著提高小鼠肝、心和皮膚的T-AOC、T-SOD活性，對(duì)肝、心、皮膚的MDA含量呈顯著性降低作用，但它對(duì)上述指標(biāo)的影響并未呈明顯的劑量依賴關(guān)系；說明環(huán)黃芪醇可以延緩皮膚衰老。葛斌等[6]用D-半乳糖致衰老模型小鼠，同時(shí)經(jīng)灌胃50 mg·kg-1·d-1或150 mg·kg-1·d-1黃芪多糖，觀察其對(duì)衰老模型小鼠器官及系統(tǒng)功能的影響，結(jié)果黃芪多糖能使衰老模型小鼠血清和肝組織中MDA明顯下降、SOD活力明顯升高，腦組織中脂褐質(zhì)(LF)明顯下降，腎組織中GSH-PX活力及一氧化氮合酶(NOS)活力明顯升高，顯示黃芪多糖抗衰老與清除自由基及抗脂質(zhì)過氧化有關(guān)。

1.1.2 調(diào)節(jié)免疫 免疫功能具有增齡性變化，隨著年齡的增長其功能下降或紊亂，結(jié)果導(dǎo)致機(jī)體衰老。其中T細(xì)胞起關(guān)鍵作用，故胸腺萎縮，T細(xì)胞損耗則壽命縮短。吳驍?shù)萚7]采用皮下注射D-氨基半乳糖建立衰老小鼠模型，同時(shí)采用每日對(duì)不同組小鼠分別腹腔給予相應(yīng)藥物，8周后處死小鼠的方法，探討黃芪注射液對(duì)D-半乳糖所致衰老小鼠的免疫、衰老和血脂指標(biāo)的影響。結(jié)果正常組、黃芪組小鼠脾臟系數(shù)和胸腺系數(shù)均明顯高于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；說明黃芪注射液能增加免疫器官質(zhì)量，有較好的抗衰老作用。

葛斌等[6]研究黃芪多糖的抗衰老作用及其機(jī)制，結(jié)果顯示黃芪多糖能使衰老模型小鼠胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)明顯升高，顯示黃芪多糖抗衰老與提高免疫功能有關(guān)。李淑華等[8]在探討黃芪黃酮(AF)延緩衰老作用的實(shí)驗(yàn)研究中，給予AF后，衰老小鼠胸腺重量與對(duì)照組比較明顯增加，顯示黃芪黃酮可以延緩衰老過程中小鼠胸腺的萎縮，提高機(jī)體的免疫功能，從而具有抗衰老作用。

1.2 改善衰老相關(guān)基因表達(dá)

夏廣清等[9]通過用β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)及吖啶橙(AO)的熒光染色分析黃芪多糖對(duì)斑馬魚胚胎細(xì)胞衰老及凋亡的影響，RT-PCR 檢測(cè)與衰老相關(guān)基因的表達(dá)，得出黃芪多糖具有改善細(xì)胞復(fù)制性衰老的作用，其分子機(jī)制可能與上調(diào)斑馬魚端粒酶基因(TERT)和下調(diào)p21、p53和bax基因的表達(dá)有關(guān)。

1.3 抗皮膚衰老

皮膚松弛、皺紋的出現(xiàn)使人們意識(shí)到衰老，膠原纖維是真皮細(xì)胞外基質(zhì)中的主要纖維成分，它的結(jié)構(gòu)和功能的改變導(dǎo)致了多種衰老癥狀的出現(xiàn)，例如皮膚彈性下降、皺紋加深等。羥脯氨酸(HYP)是真皮內(nèi)含量豐富且較穩(wěn)定的氨基酸，其含量可以間接反映真皮內(nèi)膠原纖維含量的變化。

以水作為溶劑在90 ℃、30 min條件下對(duì)黃芪粉末進(jìn)行浸提，經(jīng)加工后得到澄清黃芪提取物，叢敬等[10]以此為原料從形態(tài)學(xué)角度研究黃芪延緩小鼠皮膚衰老的作用時(shí)，發(fā)現(xiàn)高劑量黃芪可使真皮厚度和膠原纖維面積明顯增加，具有延緩小鼠皮膚衰老的作用。李順花等[11]以黃芪水煎提取液為原料，通過選用健康昆明種小鼠，分青年對(duì)照組，老齡空白對(duì)照組，黃芪低、中、高劑量組和維生素EC組，采用電鏡觀察小鼠皮膚組織超微結(jié)構(gòu)的改變，以生化分析方法測(cè)定皮膚中線粒體總ATP酶活性，得出黃芪延緩皮膚衰老的機(jī)制可能是通過清除自由基，提高皮膚中線粒體ATP酶活性，提高線粒體呼吸功能，促進(jìn)成纖維細(xì)胞合成膠原。

曹艷玲等[5]在采用D-半乳糖致小鼠衰老模型探討環(huán)黃芪醇延緩衰老作用及其機(jī)制時(shí)，得出與模型組相比較環(huán)黃芪醇能顯著提高小鼠肝、心和皮膚等組織中HYP含量的結(jié)論。說明環(huán)黃芪醇可以使HYP含量增加，延緩皮膚衰老。

1.4 抗骨衰老

骨衰老是衰老最明顯的特征之一。骨質(zhì)疏松是衰老的一種表現(xiàn)，它是以骨量減少、骨組織顯微結(jié)構(gòu)退化、骨的脆性增高及骨折危險(xiǎn)性增加為特征的一種全身性骨病。它是老年人的常見病、多發(fā)病。黃芪是常見的補(bǔ)益藥，在骨質(zhì)疏松的治療藥物中常見。歐陽鋼等[12]用穴位注射黃芪注射液的方法治療原發(fā)性骨質(zhì)疏松患者，結(jié)果顯示患者腰椎骨密度顯著增高。陽波等[13]以黃芪煎劑為原料，研究了黃芪對(duì)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者的影響，臨床結(jié)果均顯示黃芪能顯著改善絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松患者癥狀，促進(jìn)骨形成，抑制骨吸收。

2 體外實(shí)驗(yàn)

2.1 改善衰老相關(guān)基因表達(dá)

隨著分子生物學(xué)研究的不斷深入，大量實(shí)驗(yàn)證實(shí)確實(shí)存在著衰老相關(guān)基因，例如p16，klotho，p53等。趙雷等[14]以黃芪水煎劑灌胃家兔獲得含藥血清，以含黃芪血清的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)人胚肺二倍成纖維細(xì)胞(HDF)，同時(shí)以不含黃芪的家兔血清作空白對(duì)照，用RT-PCR 檢測(cè)p16 mRNA表達(dá)，結(jié)果顯示含黃芪血清培養(yǎng)基培養(yǎng)的HDF細(xì)胞與空白血清培養(yǎng)的HDF細(xì)胞比較，衰老相關(guān)基因p16表達(dá)減少。

郭蕾等[15]通過體外培養(yǎng)人胚肺成纖維細(xì)胞(HELF)，探討黃芪甲苷對(duì)衰老HDF細(xì)胞端粒酶活性及抗衰老基因klothomRNA表達(dá)的影響，得出黃芪甲苷可以通過改變klothomRNA表達(dá)而發(fā)揮其抗HDF細(xì)胞衰老的作用。

2.2 抑制端?？s短

端粒和端粒酶是現(xiàn)代生物學(xué)研究的熱點(diǎn)，端粒封閉了染色體的末端并維持了染色體的穩(wěn)定性，端粒缺失會(huì)引起染色體融合并導(dǎo)致細(xì)胞的衰老及死亡。研究發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)的人成纖維細(xì)胞隨著培養(yǎng)傳代次數(shù)增加，端粒長度是逐漸縮短的，生殖細(xì)胞端粒長于體細(xì)胞，成年人細(xì)胞端粒比胚胎細(xì)胞端粒短，即細(xì)胞水平老化是和端粒的長度有關(guān)[16]。張鵬霞等[17]通過用黃芪水煎劑灌胃家兔所得黃芪血清研究其對(duì)HDF細(xì)胞p16mRNA表達(dá)及端粒長度的影響，得出含黃芪血清的培養(yǎng)基通過增加HDF細(xì)胞SOD活性，減少p16mRNA表達(dá)，抑制端?？s短而起到抗衰老作用。

郭蕾等[15]通過體外培養(yǎng)HELF，實(shí)驗(yàn)組從50代開始加入黃芪甲苷，通過用TRAP-PCR銀染法檢測(cè)端粒酶活性，顯示黃芪甲苷可以提高端粒酶活性而發(fā)揮抗衰老作用。朱貴明等[18]在探討黃芪多糖改善人胚肺二倍體成纖維細(xì)胞衰老表型的機(jī)制時(shí)，使用HDF細(xì)胞連續(xù)傳代培養(yǎng)，形成衰老細(xì)胞模型，采用DNA雜交法檢測(cè)染色體末端限制性片段(TRF)長度，發(fā)現(xiàn)黃芪多糖可使染色體末端限制性片段(TRF)長度縮短速度降低，提高HDF細(xì)胞活力，發(fā)揮抗衰老作用。目前認(rèn)為細(xì)胞內(nèi)端粒酶活性的喪失將導(dǎo)致端粒的縮短，如果細(xì)胞要維持正常分裂，就必須阻止端粒的進(jìn)一步丟失，激活端粒酶，細(xì)胞才能進(jìn)行正常染色體復(fù)制，對(duì)于那些無法激活端粒酶的細(xì)胞只能進(jìn)入細(xì)胞老化。

2.3 抑制衰老相關(guān)酶表達(dá)

有研究說明SA-β-gal染色的陽性率隨代齡的增加而增加，它也是目前應(yīng)用較為廣泛的衰老生物學(xué)標(biāo)志[19]。李鴻梅等[20]在用黃芪水煎劑灌胃家兔獲得的含藥血清制成的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)HDF細(xì)胞，同時(shí)以不含黃芪的家兔血清作空白對(duì)照測(cè)定HDF的部分衰老指標(biāo)，得出含藥組群體倍增時(shí)間減少，細(xì)胞活力增加；衰老相關(guān)SA-β-gal表達(dá)下降。

2.4 降低皮膚成纖維細(xì)胞凋亡

王曦等[21]用體外培養(yǎng)中年人眼角皺紋和眼角無皺紋皮膚深處成纖維細(xì)胞、老年人面頰皮膚成纖維細(xì)胞，加入不同濃度的黃芪甲苷，干預(yù)后經(jīng)檢測(cè)得出黃芪甲苷在較低濃度(5～20 μg·mL-1)時(shí)可促進(jìn)皺紋和無皺紋皮膚成纖維細(xì)胞增殖，可促進(jìn)皺紋、無皺紋和老年皮膚成纖維細(xì)胞I型膠原蛋白合成，降低皺紋和無皺紋皮膚成纖維細(xì)胞凋亡率，達(dá)到改善皮膚衰老的效果。閆寧等[22]在用UVA及UVB分別照射人成纖維細(xì)胞，探討黃芪甲苷對(duì)紫外線誘導(dǎo)皮膚成纖維細(xì)胞表達(dá)TGFβRII、Smad7mRNA以及蛋白質(zhì)表達(dá)的影響時(shí)，得出黃芪甲苷可能通過提高成纖維細(xì)胞的增殖活性，上調(diào)TGFβRIImRNA、蛋白水平，以及下調(diào)Smad7mRNA、蛋白水平的表達(dá)，來對(duì)抗紫外線抑制TGFβ/Smad7信號(hào)通路的傳導(dǎo)，而TGFβ/Smad7信號(hào)傳導(dǎo)途徑具有促進(jìn)成纖維細(xì)胞增生以及細(xì)胞外基質(zhì)合成的作用。說明黃芪可以對(duì)抗紫外線引起的皮膚衰老。

3 展望

近年來，對(duì)黃芪延緩衰老作用的研究除以上方面外，在內(nèi)分泌、防輻射方面也有相關(guān)報(bào)道，但數(shù)量甚少，還需進(jìn)一步深入探討。此外對(duì)于黃芪中有效成分黃酮的抗衰老研究也停滯不前，并且黃芪皂苷、多糖、黃酮三者抗衰老功能的大小等諸多問題也有待進(jìn)一步研究。

隨著老齡化社會(huì)的到來及人們生活水平的提高，駐顏抗衰已成為熱門話題，中草藥具有取材天然、作用平穩(wěn)、毒副作用小等化學(xué)藥無法比擬的優(yōu)點(diǎn)，這給黃芪的開發(fā)應(yīng)用帶來市場(chǎng)。順應(yīng)老齡化趨勢(shì)，運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)，開發(fā)出更好的延緩衰老藥品和功能性食品已經(jīng)成為生命科學(xué)的重要研究方向。

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TheStatusofAstragalusmembranaceusAnti-agingResearch

XIANGLijuan1，XIAXinzhong2*，MAOKun1，ZHANGHu1

(MedicalCollegeofYangtzeUniversity.JingZhou434023，China)

Research confirmed that the active components of Traditional Chinese Medicineastragalusmembranaceushas various effects，this article mainly reviewed the animal experiment and in vitro experiment two levels ofastragalusmembranaceusin anti-aging and then summarized research status，provided references for further research and application development.

Astragalusmembranaceus；Anti-aging；Animal experiment；Vitro experiment；Status

10.13313/j.issn.1673-4890.2014.02.022

2013-08-04)

《中國現(xiàn)代中藥》2014年投稿須知

《中國現(xiàn)代中藥》(原名《中藥研究與信息》)是國家中醫(yī)藥管理局主管，中國中藥協(xié)會(huì)、中國醫(yī)藥集團(tuán)總公司和中國藥材公司主辦的國內(nèi)外公開發(fā)行的中藥科技期刊，國際統(tǒng)一刊號(hào)ISSN 1673-4890，國內(nèi)刊號(hào)CN 11-5442/R?！吨袊诵钠诳?遴選)數(shù)據(jù)庫》、《中國期刊全文數(shù)據(jù)庫》、《中文科技期刊數(shù)據(jù)庫》全文收錄。

辦刊宗旨

以中藥資源為龍頭，面向現(xiàn)代中藥產(chǎn)業(yè)，宣傳推廣科技成果，交流技術(shù)方法，研究產(chǎn)業(yè)發(fā)展關(guān)鍵課題，促進(jìn)產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展。

主要欄目

專論——圍繞中藥現(xiàn)代化發(fā)展進(jìn)程，重點(diǎn)宣傳報(bào)道中藥行業(yè)發(fā)展的熱點(diǎn)、難點(diǎn)和重點(diǎn)問題的研究、探討和建議；

研究開發(fā)——包括中藥創(chuàng)新體系建設(shè)，基礎(chǔ)研究與探討，新技術(shù)的應(yīng)用與開發(fā)、科技成果的宣傳與推廣；

中藥農(nóng)業(yè)——包括野生藥材的資源調(diào)查、保護(hù)、管理與開發(fā)，栽培(飼養(yǎng))藥材的規(guī)范化與產(chǎn)業(yè)化；

中藥工業(yè)——包括中藥飲片、中成藥、提取物、保健品的生產(chǎn)技術(shù)與質(zhì)量控制；

中藥商業(yè)——包括中藥商品倉儲(chǔ)流通規(guī)范、商品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、國內(nèi)外市場(chǎng)供求變化與趨勢(shì)分析；

健康產(chǎn)業(yè)——包括中藥康復(fù)、保健、養(yǎng)生、理療、健美的產(chǎn)業(yè)發(fā)展，中醫(yī)藥及民族醫(yī)藥傳統(tǒng)文化等。

投稿要求

1.投稿內(nèi)容要求立意創(chuàng)新、資料真實(shí)、數(shù)據(jù)可靠、論點(diǎn)明確、結(jié)構(gòu)嚴(yán)謹(jǐn)、文字通順。作者單位應(yīng)對(duì)稿件的真實(shí)性、保密性、無署名爭(zhēng)議等負(fù)責(zé)。

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3.本刊已被《中國核心期刊(遴選)數(shù)據(jù)庫》、《中國期刊全文數(shù)據(jù)庫》、《中文科技期刊數(shù)據(jù)庫》收錄，本刊支付的稿費(fèi)已包括上述數(shù)據(jù)庫和光盤的使用報(bào)酬。若作者不同意文章被上述數(shù)據(jù)庫收錄，請(qǐng)于來稿時(shí)注明。

4.來稿一經(jīng)刊用本刊將支付稿酬并寄樣刊。編輯部對(duì)錄用的稿件有權(quán)作適當(dāng)文字刪改。稿件涉及保密、專利等方面的問題，請(qǐng)作者自行征得有關(guān)部門的同意，并附證明文件，否則出現(xiàn)的糾紛本刊概不負(fù)責(zé)。

撰稿要求

1.論文字符數(shù)以2000～6000為宜；摘要、關(guān)鍵詞、參考文獻(xiàn)等要素齊全。

2.稿件須注明通信作者的詳細(xì)信息(包括工作單位、職稱、研究方向、地址、郵編、電話、電子信箱等)。

3.論文所涉及的課題若取得國家或部、省級(jí)以上基金資助或?qū)俟リP(guān)項(xiàng)目(請(qǐng)?jiān)谕陡鍟r(shí)上傳附基金證書掃描件)，并腳注于文題頁下方。

4.文章需附中、英文摘要，摘要采用第三人稱撰寫，實(shí)驗(yàn)研究摘要包括目的、方法、結(jié)果及結(jié)論4部分。英文摘要前需列出英文題名，全部作者姓名及工作單位。

5.層次標(biāo)題的分級(jí)編號(hào)采用阿拉伯?dāng)?shù)字，如1、1.1、1.1.1。序號(hào)后不用黑點(diǎn)，標(biāo)題層次不超過4級(jí)，文內(nèi)接排的序號(hào)用帶圈的數(shù)字序號(hào)。標(biāo)題序號(hào)后應(yīng)擬定標(biāo)題，正文內(nèi)標(biāo)題一律頂格。

6.表和圖應(yīng)設(shè)計(jì)正確、合理、易懂，表題和圖題要完整，要有序號(hào)，只有1個(gè)表或1個(gè)圖，仍用“表1”或“圖1”表示。表格使用三線表，欄頭左上角不用斜線。上下行的數(shù)字要個(gè)位或小數(shù)點(diǎn)對(duì)齊。圖片要清晰，圖中的量、單位表示應(yīng)量符號(hào)在前，單位符號(hào)在后。

7.量和單位符號(hào)使用現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)中頒布的法定計(jì)量單位名稱和符號(hào)；標(biāo)點(diǎn)符號(hào)用法符合GB/T 15834-2011要求；數(shù)字用法符合GB/T 15835-2011要求。

8.稿件中的外文字母、符號(hào)必須分清大、小寫，正、斜體，上下角的字母、數(shù)碼和符號(hào)，其位置高低應(yīng)區(qū)別明顯。容易混淆的字母、符號(hào)等在首次出現(xiàn)時(shí)需注明中文。

9.參考文獻(xiàn)依照其在文中出現(xiàn)的先后順序用阿拉伯?dāng)?shù)字標(biāo)出，文獻(xiàn)數(shù)量不少于5篇。參考文獻(xiàn)著錄格式符合GB/T 7714-2005要求，作者姓名列出第1～3名，超過3名時(shí)，后加“，等”或其他與之相應(yīng)的文字。文章名后注明文獻(xiàn)類型，外文期刊名稱用縮寫，中文期刊用全名。每條參考文獻(xiàn)均須著錄起止頁。參考文獻(xiàn)必須由作者與其原文核對(duì)無誤。

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