張芬，陳偉國，楊一平，孫海燕

（海寧市蠶桑技術(shù)服務(wù)站，浙江海寧 314400）

乙酰甲胺磷對家蠶的毒性與安全性試驗(yàn)

張芬，陳偉國，楊一平，孫海燕

（海寧市蠶桑技術(shù)服務(wù)站，浙江海寧 314400）

乙酰甲胺磷對家蠶3齡起蠶的急性食下毒性（LC50）為41.80 mg/L，中等毒性；在常規(guī)使用濃度下對家蠶無熏蒸毒性。用30%乙酰甲胺磷EC 300倍、600倍和1200倍稀釋液對桑樹進(jìn)行局部噴葉或根灌處理，噴藥桑葉對3齡起蠶無中毒死亡的間隔時(shí)間為30 d、25 d和25 d，在桑葉上的殘毒期中等偏長；未直接噴藥的桑葉可使家蠶出現(xiàn)不同程度的中毒死亡，表明乙酰甲胺磷可通過桑葉、桑根內(nèi)吸傳導(dǎo)至上部桑葉。結(jié)果表明，乙酰甲胺磷用于防治桑園害蟲應(yīng)注意掌握安全間隔時(shí)間。

乙酰甲胺磷；毒性；安全間隔時(shí)間

乙酰甲胺磷是廣譜性殺蟲殺螨劑，以觸殺為主，兼有胃毒、內(nèi)吸作用，對人畜毒性比甲胺磷低30倍［1］。隨著國家禁止高毒農(nóng)藥政策的實(shí)施，乙酰甲胺磷在一定程度上替代甲胺磷而被廣泛使用。《桑園用藥技術(shù)規(guī)程》中將乙酰甲胺磷列入推薦農(nóng)藥品種，主要用于防治桑象蟲、桑尺蠖、桑虱、桑毛蟲、桑螟、野蠶、斜紋夜蛾等桑樹害蟲［2］。乙酰甲胺磷防治桑園鱗翅目害蟲試驗(yàn)表明［3～4］，田間防效達(dá)到90%以上，優(yōu)于50%甲胺磷乳油和60%敵·馬乳油。為全面評價(jià)乙酰甲胺磷對家蠶的毒性和安全性，測定了急性食下毒性、熏蒸毒性、內(nèi)吸毒性和在桑葉上的殘毒期，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 供試農(nóng)藥與家蠶品種

供試農(nóng)藥：30%乙酰甲胺磷乳油（EC，農(nóng)藥登記證號(hào)：PD86176-2），浙江嘉化集團(tuán)股份有限公司生產(chǎn)，市售；77.5%敵敵畏乳油（EC，農(nóng)藥登記證號(hào)：PD85106-2），南通江山農(nóng)藥化工股份有限公司生產(chǎn)，市售。

家蠶品種：白玉×秋豐，浙江省海寧市新興蠶種制造有限公司生產(chǎn)。

供試桑樹：海寧市蠶桑站試驗(yàn)桑園，強(qiáng)桑1號(hào)品種，5年生，低桿養(yǎng)成，每667 m2桑園栽600株；強(qiáng)桑1號(hào)1年生盆栽桑。

1.2 乙酰甲胺磷對家蠶的急性毒性測定

經(jīng)預(yù)備試驗(yàn)，將30%乙酰甲胺磷EC稀釋成7個(gè)等比級差濃度的藥液，取適齡桑葉浸入各濃度的藥液中1 min，取出后自然晾干，將藥液處理后的桑葉置于保鮮盒內(nèi)，各處理區(qū)給入20頭3齡起蠶，在（26.5±1）℃、相對濕度75～85%的人工氣候箱內(nèi)飼養(yǎng)，重復(fù)3次，以清水處理為空白對照。24 h后改飼新鮮無毒桑葉，繼續(xù)飼養(yǎng)至4齡餉食，每d調(diào)查中毒死亡率。采用DPS（10.15版）統(tǒng)計(jì)軟件對藥液質(zhì)量濃度對數(shù)與幼蟲死亡率概率值進(jìn)行線性回歸分析［5］，求出致死中濃度（LC50）和95%置信限。

1.3 乙酰甲胺磷對家蠶的熏蒸毒性測定

將30%乙酰甲胺磷EC稀釋成100倍、1000倍、10000倍和100000倍4個(gè)濃度，各取1 ml均勻涂于培養(yǎng)皿內(nèi)，把培養(yǎng)皿放入容積為60 L（高60 cm、直徑36 cm）的聚乙烯塑料桶底部，距桶底40 cm高處的培養(yǎng)皿內(nèi)放入30頭2齡起蠶，以無毒桑葉喂飼；設(shè)80%敵敵畏乳油10000倍為農(nóng)藥對照處理，另設(shè)清水為空白對照處理，塑料桶用雙層蓋密封后放置于（30± 1）℃的恒溫室內(nèi)，熏蒸24 h后取出，喂以新鮮無毒桑葉，每24 h調(diào)查中毒及死亡率，飼養(yǎng)至3齡起蠶，重復(fù)3次。

1.4 乙酰甲胺磷在桑樹上的內(nèi)吸毒性和殘毒期測定

將30%乙酰甲胺磷EC稀釋成300倍（1000 mg/ L）、600倍（500 mg/L）和1200倍（250 mg/L）3個(gè)濃度。內(nèi)吸毒性試驗(yàn)分為局部噴葉和根灌。

將適量桑枝條的上半部用透明塑料袋包扎隔離，枝條下半部及其余枝條的桑葉分別用3種濃度稀釋藥液正反面噴濕，待藥液干后將塑料袋頂部剪開，并用支架固定，防止未噴藥處理的桑葉受污染。

另取盆栽桑，分別將3種濃度稀釋藥液澆于根部周圍泥土，注意不污染桑葉，每盆藥液量為500 ml，即乙酰甲胺磷有效成分分別為：300倍（500 mg）、600倍（250 mg）、1200倍（125 mg）。

噴藥和根灌處理后間隔一定時(shí)間采葉養(yǎng)蠶，分別采摘3個(gè)農(nóng)藥濃度的噴藥、不噴藥和根灌3種不同類型桑葉，共9個(gè)組合處理，以新鮮無毒桑葉為對照，每處理30頭3齡起蠶，重復(fù)3次，飼養(yǎng)至4齡餉食，逐日調(diào)查記載各小區(qū)死亡蠶頭數(shù)。

1.5 乙酰甲胺磷對家蠶的中毒癥狀觀察

將30%乙酰甲胺磷EC稀釋成1000倍（300 mg/ L），取成熟桑葉在藥液中浸漬1 min，取出后自然晾干，喂飼3齡起蠶，觀察記錄中毒癥狀。

2 結(jié)果與分析

2.1 乙酰甲胺磷對家蠶的急性食下毒性

采用浸葉法測定乙酰甲胺磷對3齡起蠶的急性食下毒性，毒力回歸方程為Y＝0.5086+2.7704X（相關(guān)系數(shù)r=0.9788），LC50為41.80 mg/L（95%置信限為36.16～51.07 mg/L），乙酰甲胺磷對家蠶急性食下毒性中等。

2.2 乙酰甲胺磷對家蠶的熏蒸毒性

30 %乙酰甲胺磷EC稀釋成100倍、1000倍、10000倍和100000倍4個(gè)濃度藥液，熏蒸處理2齡起蠶24 h后，更換新鮮無毒桑葉繼續(xù)飼養(yǎng)至3齡起蠶，均無中毒癥狀和死亡，發(fā)育進(jìn)度與清水對照處理無差異，表明30%乙酰甲胺磷EC在常規(guī)使用濃度下對家蠶無熏蒸毒性。而對照農(nóng)藥80%敵敵畏EC稀釋成10000倍濃度藥液熏蒸處理2齡起蠶后，24 h內(nèi)全部死亡。

表1 30%乙酰甲胺磷EC在桑樹上的內(nèi)吸毒性和殘毒期Table 1 Toxicity performance of 30%Acephate on mulberry

2.3 乙酰甲胺磷對家蠶的內(nèi)吸毒性和殘毒期

從表1可以看出，30%乙酰甲胺磷EC的3個(gè)稀釋濃度直接噴藥處理的桑葉喂飼3齡起蠶，300倍藥后30 d無中毒死亡，600倍和1200倍均在藥后25 d無中毒死亡；同一株桑樹上不直接噴藥處理的桑葉喂飼3齡起蠶，藥后1 d，3個(gè)濃度處理均無中毒死亡，300倍和600倍藥后5 d部分死亡，1200倍藥后10 d部分死亡，藥后25 d時(shí)3個(gè)濃度處理均無中毒死亡；表明乙酰甲胺磷可通過桑葉內(nèi)吸并在樹體內(nèi)傳導(dǎo)，但受生物稀釋作用使其毒性明顯下降，死亡率均顯著低于相同濃度直接噴藥處理的桑葉。

30%乙酰甲胺磷EC3個(gè)濃度稀釋藥液500 ml根灌盆栽桑，300倍藥后30 d采葉喂飼3齡起蠶的死亡率仍達(dá)100%，直至藥后55 d時(shí)才無中毒蠶；600倍藥后50 d、1200倍藥后35 d才無中毒蠶；表明乙酰甲胺磷可通過桑根內(nèi)吸向上傳導(dǎo)，使上部未噴藥的桑葉帶毒。與相同濃度藥液直接噴灑桑葉，土壤根灌處理的殘毒期明顯延長，這可能有兩方面原因，一是乙酰甲胺磷在土壤中降解比較緩慢，能夠在較長時(shí)間內(nèi)不斷向葉部傳導(dǎo)；二是盆栽桑土壤根灌處理的用藥量大于桑葉直接噴藥的葉面受藥量，3個(gè)濃度藥液根灌處理1d后采葉喂蠶的死亡率均達(dá)100%，表明在桑樹內(nèi)的傳導(dǎo)作用迅速。

2.4 家蠶的中毒癥狀

給3齡起蠶喂飼30%乙酰甲胺磷EC1000倍（300 mg/L）浸漬處理的桑葉，很快表現(xiàn)出中毒癥狀：頭胸抬起、搖擺不停，身體翻滾，狂躁亂爬，大量吐液，胸部明顯膨大，腹部縮小，伴有脫肛。

3 小結(jié)與討論

3.1 乙酰甲胺磷對家蠶的急性毒性中等

本試驗(yàn)測定了乙酰甲胺磷對家蠶3齡起蠶24 h的LC50為41.80 mg/L，屬中毒級，略高于陳麗萍等［6］測定的乙酰甲胺磷對家蠶2齡起蠶96 h的LC50為24.7 mg/L，差異與供試蠶齡和添毒時(shí)間有關(guān)。

3.2 乙酰甲胺磷在桑葉上的殘毒期中等偏長

30%乙酰甲胺磷EC300倍、600倍和1200倍稀釋液噴霧處理的桑葉，分別在噴藥后30 d、25 d和25 d采葉喂飼3齡起蠶無中毒死亡，在桑葉上的殘毒期中等偏長，與陸忠恒等［3］、曹寧寧等［7］的試驗(yàn)結(jié)果相近，但明顯長于席體仲等［8］測定的40%乙酰甲胺磷EC800倍16 d的殘毒期。

3.3 乙酰甲胺磷具有一定內(nèi)吸傳導(dǎo)毒性

乙酰甲胺磷可通過桑葉、桑根內(nèi)吸傳導(dǎo)至上部未噴藥的桑葉，通過桑葉內(nèi)吸傳導(dǎo)因但受生物稀釋作用，生物測定表明其毒性顯著低于下部直接噴藥處理的桑葉。通過桑根內(nèi)吸向上傳導(dǎo)，使上部未噴藥的桑葉帶毒，因在土壤中降解較慢，毒性殘留明顯大于桑葉直接噴藥處理。應(yīng)防止大量藥液污染桑園土壤。

3.4 乙酰甲胺磷對家蠶的安全性評價(jià)

乙酰甲胺磷對家蠶的急性食下毒性與常規(guī)使用濃度1000倍（300 mg/L）之比為7.18倍，參照毒性比評價(jià)法可認(rèn)為對家蠶有高風(fēng)險(xiǎn)性［8］。

常規(guī)濃度下對家蠶無熏蒸毒性，與曹寧寧等［7］的試驗(yàn)結(jié)果一致。

綜上所述，乙酰甲胺磷對家蠶的急性毒性中等，在桑葉上的殘毒期中等偏長，無熏蒸毒性，常規(guī)濃度下內(nèi)吸毒性較低。據(jù)此認(rèn)為，乙酰甲胺磷對家蠶的安全性風(fēng)險(xiǎn)可控，用于桑園害蟲防治時(shí)重點(diǎn)注意掌握安全間隔時(shí)間。

［1］屠予欽主編.農(nóng)藥科學(xué)使用指南［M］.北京：金盾出版社，2000.219～220.

［2］中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn).桑園用藥技術(shù)規(guī)程［M］.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2006.

［3］陸忠恒，莊衛(wèi)武，楊建.30%乙酰甲胺磷防治桑園鱗翅目害蟲對家蠶毒性的試驗(yàn)初報(bào)［J］.江蘇蠶業(yè)，2003，25（1）：52～53.

［4］邱小明，石偉林，何婀妮.幾種桑樹登記農(nóng)藥的田間藥效試驗(yàn)［J］.江蘇蠶業(yè)，2010，32（3）：59～60.

［5］唐啟義，馮明光.DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)［M］.北京：科學(xué)出版社，2007.327～330.

［6］陳麗萍，趙學(xué)平，吳長興，等.乙酰甲胺磷對環(huán)境生物的急性毒性和安全性評價(jià)［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，（4）：771～774.

［7］曹寧寧，何成才，袁桂陽，等.桑園常用農(nóng)藥殘毒期及家蠶中毒試驗(yàn)［J］.四川蠶業(yè)，2011，（2）：22～24.

［8］席體仲，龔大剛，袁桂陽.不同農(nóng)藥對家蠶的殘毒與中毒試驗(yàn)［J］.四川蠶業(yè)，2009，（1）：18～20.

［9］王利靜，胡玲玲，胡翠瓊，等.殺蟲劑對家蠶的毒性與安全性評價(jià)研究［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，36（29）：12776～12777.

Toxicity and Safety Test of Acephate on Silkworm

ZHANG Fen,CHEN Wei-guo,YANG Yi-ping,SUN Hai-yan
（Haining Sericulture Technology Extension Station,Haining 314400 Zhejiang,China）

The LC50of Acephate on Silkworm of 3 instar was 41.80 mg/L,which indicated moderate toxicity.However,it was non-toxic on silkworm in the conventional concentration.The 30%Acephate was diluted by 300,600,1200 times separately,and the dilutions were sprayed on the leaves or irrigated on the roots.The time intervals of no toxic death were 30 d,25 d and 25 d separately when the dilutions were sprayed on the leaves.And there were also dfferent de?grees of poisoning death of silkworm when the dilutions were irrigated on the roots,which means Acephate could be transferred to the leaves.The results indicated that the safe interval time should be paid attention when Acephate was used to control mulberry pests.

acephate;toxicity;safe interval time

S884.9

A

0258-4069［2014］04-012-03

浙江省重點(diǎn)科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目（2011R50028-19）

張芬（1979-），女，浙江象山人，技術(shù)員，主要從事蠶桑技術(shù)推廣工作。E-mail：zhangfen0505@hotmail.com