郭肖，孔德章，曹玉洪，黃凱豐（貴州師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院蕎麥產(chǎn)業(yè)技術(shù)研究中心，貴陽，550001）

不同產(chǎn)地水芹黃酮含量及PAL酶活性的差異研究

郭肖，孔德章，曹玉洪，黃凱豐
（貴州師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院蕎麥產(chǎn)業(yè)技術(shù)研究中心，貴陽，550001）

以9份不同產(chǎn)地的水芹資源為試驗(yàn)材料，測定了其產(chǎn)品器官中的黃酮含量及苯丙氨酸解氨酶的活性，并對二者的相關(guān)性進(jìn)行了分析。試驗(yàn)結(jié)果表明，不同產(chǎn)地水芹的黃酮含量和苯丙氨酸解氨酶（PAL)活性存在明顯差異，均以大葉水芹最高，清鎮(zhèn)水芹最低；水芹葉中黃酮含量和PAL酶活性均高于莖中。水芹的黃酮含量與苯丙氨酸解氨酶活性的變化趨勢一致，且二者的相關(guān)系數(shù)極顯著，說明水芹黃酮的合成與苯丙氨酸解氨酶活性密切相關(guān)。

水芹；黃酮含量；苯丙氨酸解氨酶

黃酮類化合物是一種植物調(diào)節(jié)劑，具有調(diào)節(jié)植物生長、保護(hù)植物免受紫外線損傷的作用，同時(shí)，作為一種藥用成分，其具有抗氧化及抗自由基作用，可以抗癌、防癌，治療心腦血管疾病，還可以降低血糖，增強(qiáng)非特異性免疫功能和體液免疫功能，以及具有抑制逆轉(zhuǎn)錄酶的活性等廣譜的藥理活性，在藥物資源上具有重要地位[9～12]。黃酮類化合物是苯丙烷類代謝途徑的產(chǎn)物之一，而苯丙氨酸解氨酶（Phenylalanine ammonia-lyase，PAL）又是該途徑中的一種關(guān)鍵酶和限速酶。趙則海等[13]研究發(fā)現(xiàn)，攀援型和矮生型四棱豆的PAL酶活性和總黃酮含量之間呈正相關(guān)關(guān)系。但有關(guān)能否通過調(diào)控PAL活性增加黃酮類化合物在水芹體內(nèi)的合成，從而增強(qiáng)水芹的藥用功能方面，國內(nèi)外相關(guān)報(bào)道較少。因此，本試驗(yàn)以產(chǎn)自貴州安順、凱里、黔西等地的8種野生水芹和貴州師范大學(xué)生命科學(xué)院蕎麥產(chǎn)業(yè)技術(shù)研究中心選育的高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)水芹新品種大葉水芹為試驗(yàn)材料，研究各品種間黃酮含量的差異以及黃酮含量與PAL酶活性的關(guān)系，以期為水芹的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展提供部分理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

以本單位保存的產(chǎn)自貴州省黔西縣、都勻市、安順市、凱里市、獨(dú)山縣、清鎮(zhèn)市、金沙縣、貴陽市的8份野生水芹及本單位選育的高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)水芹新材料大葉水芹為試材。

1.2 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)于2012年在貴州師范大學(xué)蕎麥產(chǎn)業(yè)技術(shù)研究中心內(nèi)進(jìn)行。8月20日，在試驗(yàn)田選取面積相等的9個(gè)小區(qū)，小區(qū)面積2 m2，小區(qū)之間相隔20 cm并用塑料薄膜隔開，防止肥料互滲。將9份來自不同地區(qū)、高10 cm、生長一致的幼苗分別移栽至9個(gè)小區(qū)中，3次重復(fù)，種植密度為5 cm×5 cm，單株定植。田間管理按照生產(chǎn)常規(guī)，移栽時(shí)將田塊作成秧池狀，畦寬1 m，畦面濕潤、溝中持水；移栽成活、抽生新葉后，撒施尿素10 kg/667 m2作為追肥；生長過程中僅在生長初期的15 d內(nèi)使土壤保持1 cm的水層，其他時(shí)期僅靠自然降雨補(bǔ)充田間水分。10月2日，當(dāng)節(jié)水型水芹株高達(dá)到40～50 cm時(shí)，于試驗(yàn)田多點(diǎn)隨機(jī)自近地面割收地上部產(chǎn)品。將上述材料帶回實(shí)驗(yàn)室，洗凈、吸干水分，待測。

1.3 測定方法

葉中黃酮含量的測定參考黃云華[14]的方法；葉中苯丙氨酸解氨酶的活性測定參考賓金華等[15]的方法。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同產(chǎn)地水芹總黃酮含量差異

由表1可以看出，不同產(chǎn)地水芹葉和莖中的黃酮含量存在明顯差異，以大葉水芹葉和莖中黃酮含量最高，清鎮(zhèn)市水芹葉和莖中黃酮含量最低，兩者相差達(dá)3.7倍。水芹葉中黃酮含量均高于莖中。

2.2 不同產(chǎn)地水芹的PAL酶活性差異

由表2可以看出，不同產(chǎn)地水芹葉和莖中的苯丙氨酸解氨酶活性存在明顯差異。以大葉水芹葉和莖的苯丙氨酸解氨酶活性最高，清鎮(zhèn)水芹最低；水芹不同部位間相比，均表現(xiàn)為葉中苯丙氨酸解氨酶活性高于莖。

2.3 水芹黃酮含量與PAL酶活性的相關(guān)性分析

相關(guān)性分析結(jié)果表明，黃酮含量與PAL酶活性間的相關(guān)系數(shù)為=1.000，=0.000＜0.01，差異極顯著，說明水芹黃酮含量與PAL酶活性間存在極顯著的正相關(guān)關(guān)系，即水芹黃酮含量隨PAL酶活性的增加而增加。

3 小結(jié)與討論

產(chǎn)地不同，植物體內(nèi)黃酮含量也會有比較明顯的差異[16]。熊友香等[17]發(fā)現(xiàn)，不同產(chǎn)地了哥王藥材中總黃酮的含量不同；楊增明等[18]研究表明，產(chǎn)地不同，花生殼藥材中總黃酮含量差異較大。從本試驗(yàn)的研究結(jié)果可以看出，不同產(chǎn)地水芹中的黃酮含量也存在差異。9個(gè)地區(qū)的水芹相比，以大葉水芹莖、葉中的黃酮含量最高，清鎮(zhèn)市水芹的黃酮含量最低，不同地方水芹的黃酮含量差異明顯，這與上述研究結(jié)果一致。這可能與不同地區(qū)環(huán)境不同有關(guān)，如溫度、光照、水分、濕度、土壤的不同，會對水芹黃酮合成產(chǎn)生影響，其具體原因，還有待于進(jìn)一步的研究論證。

表1 不同產(chǎn)地水芹的總黃酮含量 %

表2 不同產(chǎn)地水芹的酶活力 0.1 nmg·g-1·h-1

唐宇等[19]發(fā)現(xiàn)，黃酮類物質(zhì)在植物中的累積量隨PAL酶活力而增減。從本試驗(yàn)的研究結(jié)果可以看出，大葉水芹的PAL酶活性最強(qiáng)，與之對應(yīng)的黃酮含量也最高；清鎮(zhèn)水芹的PAL酶活性最弱，其黃酮含量也最低。9個(gè)地區(qū)水芹葉中苯丙氨酸解氨酶活性均高于莖，葉中黃酮含量也高于莖，證實(shí)了PAL活性與黃酮含量的高度相關(guān)性。但是否可以通過調(diào)控水芹體內(nèi)的PAL活性以進(jìn)一步增加水芹的黃酮含量，以增強(qiáng)其藥用功能，值得進(jìn)一步研究。

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Difference about Flavonoid Content and PAL Activity of Water Dropwort from Different Areas

GUO Xiao,KONG Dezhang,CAO Yuhong,HUANG Kaifeng

Taking nine water dropwort from different areas as materials,we determined their flavonoid content and phenylalanine ammonia-lyase (PAL)activity,and analyzed the correlation between flavonoid content and PAL activity. The results showed that,among the nine water dropwort materials,there were remarkable differences in flavonoid content and PAL activity,and flavonoid content and PAL activity were higher in leaf than in stem.The cultivar Dayeshuiqin had highest flavonoid content and PAL activity,while the flavonoid content and PAL activity of material from Qingzhen city were lowest.The flavonoid content and PAL activity had the same variation trend in water dropwort,indicating that the synthesis of flavonoid was closely related with PAL activity in water dropwort.

Water dropwort;Flavonoid content;PAL

S636.3

：A

：1001-3547（2013）24-0032-03

10.3865/j.issn.1001-3547.2014.02.009

貴州省科技廳農(nóng)業(yè)攻關(guān)項(xiàng)目（黔科合NY字[2011]3035號)

郭肖（1989-)，男，碩士，研究方向?yàn)橹参镞z傳、進(jìn)化與育種，E-mail：guoxiao19890910@163.com

黃凱豐（1979-)，通信作者，男，博士，教授，E-mail：hkf1979@163.com

2013-09-26