摘要：

近幾年，將溫和的中草藥提取物添加到化妝品中非常流行?！侗静菥V目》對(duì)蓮花的醫(yī)藥功效有詳盡的描述，蓮花有溫和無(wú)毒、固精氣、悅顏色、益血、益色等藥效，是美容駐顏的佳品。本文探討了蓮花子房提取物的主要成分，以及其對(duì)人體皮膚的作用機(jī)理和功效。

我們用GC-MC、HPLC高效液相色譜儀對(duì)蓮花子房的提取物成分進(jìn)行了分析，分析其主要功能成分是黃酮類(lèi)、酚類(lèi)、花青素，并探究其與皮膚的作用機(jī)理，表明蓮花子房提取物具有較強(qiáng)的還原能力、清除自由基的能力。通過(guò)探究蓮花子房提取物對(duì)人體成纖維細(xì)胞的作用，從一個(gè)角度反映蓮花子房提取物有很好的護(hù)膚和抗衰老作用，化妝品研發(fā)工作者應(yīng)該加強(qiáng)對(duì)蓮花子房提取物的研究。

關(guān)鍵字：蓮花子房提取物化妝品抗衰老制備表征

蓮為睡蓮科（Nymphaeaceae）蓮屬（Nelumbo）植物，具有多個(gè)通用名（Indian lotus，Chinese water lily，sacred lotus等）和學(xué)名（Nelumbium nelumbo， N.speciosa，N.speciosum，Nymphaea nelumbo等）[1]。蓮花在我國(guó)栽培歷史悠久，地域廣泛，在湖南、湖北、浙江、江蘇等地有廣泛種植，因此我國(guó)有著豐富的蓮花資源。睡蓮科植物蓮的臨床應(yīng)用已有2000多年的歷史，并且多個(gè)部位可以入藥，包括蓮葉、蓮子（種胚及蓮子心）、藕、蓮房和蓮花（翼瓣及雄蕊）[2]。蓮花經(jīng)千百年來(lái)不斷實(shí)踐驗(yàn)證、篩選，作為天然物質(zhì)，與化學(xué)合成物相比，添加在化妝品中對(duì)人體的副作用要小很多。蓮花中含有很多功能獨(dú)特和生物活性很高的化合物，這些化合物營(yíng)養(yǎng)豐富，有一定功效。隨著現(xiàn)代生物技術(shù)和現(xiàn)代分離純化技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用，蓮花作為天然綠色化妝品添加劑的研究也越來(lái)越受到人們的關(guān)注。

1蓮花的藥用概述

明代李時(shí)珍繼承和弘揚(yáng)前人對(duì)蓮花藥用的記載，用7000字將蓮花的藥用價(jià)值編入《本草綱目》，對(duì)蓮花各部器官的藥物功能、臨床處方以及成功案例均有詳細(xì)的記載。其中與美容養(yǎng)顏相關(guān)的是蓮蕊須（即雄蕊），它的氣味甘、澀、溫，無(wú)毒，主治：清心通腎、固精氣、烏須發(fā)、悅顏色、益血、止血崩、吐血；蓮花（即花瓣）氣味苦、甘、溫，無(wú)毒，有“鎮(zhèn)心、益色、駐顏、身輕”之效[3]。在臨床應(yīng)用中，蓮有多個(gè)部位入藥，包括蓮葉、蓮子（種胚及蓮子心）、藕、蓮房和蓮花（翼瓣及雄蕊），不同部位藥用價(jià)值并不完全相同[4]。

當(dāng)代醫(yī)學(xué)研究表明，蓮花的藥用價(jià)值部位主要是翼瓣及雄蕊和胚珠中。主要化學(xué)成分為黃酮類(lèi)物質(zhì)，包括黃酮醇類(lèi)和花青素類(lèi)。另外還有一些其他結(jié)構(gòu)的化合物，如adenine、myinositol、arbutin、β-sitosterol glucopyranoside等[4]。藥理研究表明，蓮須具有增強(qiáng)子宮平滑肌收縮、鎮(zhèn)痛的作用，對(duì)女性子宮保養(yǎng)有很好的作用。黃酮類(lèi)化合物廣泛存在于植物體內(nèi)，多數(shù)與糖結(jié)合成為黃酮甙類(lèi)。過(guò)去黃酮類(lèi)化合物限于用作染料。后來(lái)發(fā)現(xiàn)，不同的黃酮有不同的生理功能[5]。從蓮須中分離到的一些黃酮類(lèi)化合物具清除自由基抗衰老的能力[6]。

蓮花子房中胚珠是雌配子的載體，是蓮子的前身，在蓮花有性生殖過(guò)程中起著重要的作用。胚珠攜帶大量的遺傳物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)為生命的孕育做充分的準(zhǔn)備[7]。本實(shí)驗(yàn)選取蓮花子房提取物，對(duì)其成分和功效進(jìn)行分析。

2蓮花子房提取物的提取

本實(shí)驗(yàn)所用提取物來(lái)自于蓮花的子房，提取工藝為：首先將蓮花、萃取劑和水混合后進(jìn)行粉碎，得到蓮花漿狀物，然后將所述蓮花漿狀物在萃取劑中進(jìn)行萃取，得到萃取液，最后將所述萃取液依次經(jīng)過(guò)過(guò)濾、脫鹽、脫色和滅菌處理后，萃取清液即為本實(shí)驗(yàn)材料。

3蓮花子房提取物的成分分析

本實(shí)驗(yàn)主要采用快速溶劑萃取儀（APLE-1000/2000/3000）進(jìn)行蓮花子房提取物的前處理?？焖偃軇┹腿》ㄊ且豁?xiàng)全新的樣品前處理技術(shù)，通過(guò)升高溫度與壓力結(jié)合使用水、有機(jī)溶劑，可快速、有效地從基體中萃取待測(cè)物。僅需10min～20min即可完成，并且萃取效率高，24組萃取同時(shí)進(jìn)行，對(duì)于蓮花子房提取物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)可以一次完成萃取[8]。

對(duì)上述經(jīng)快速溶劑萃取法萃取分離的蓮花子房提取物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行定性分析，本實(shí)驗(yàn)主要采用GC-MS和高效液相色譜法來(lái)測(cè)定。

其中之一的GC-MS的條件為：進(jìn)樣口溫度240℃，柱溫采用程序升溫，初溫140℃，保持3min后以3℃/min速度升至180℃，恒溫1min，再以1.0℃/min升至220℃，保持7min。載氣為高純氦氣，流速1.0ml/min。采用分流進(jìn)樣：分流比100∶1，進(jìn)樣量為0.2μl。質(zhì)譜條件：接口溫度280℃，EI離子源，電子能量70eV，離子源溫度230℃，四級(jí)桿溫度150℃，電子倍增器電壓1500 V，質(zhì)量掃描范圍30～500u。

其中之一的高效液相色譜儀的具體色譜條件為：色譜柱選用Nova-pakC18柱（3.9mm×150mm），預(yù)柱C18（3. 9mm×15mm），流動(dòng)相：甲醇-0.4% 水（1∶ 1）；檢測(cè)波：360nm，流速：1.0mL/min，進(jìn)樣量：20μL，柱溫：室溫。

分離分析出的物質(zhì)如下表1：

表1蓮花子房提取物中分離分析出的物質(zhì)

4蓮花子房提取物的抗衰老功效實(shí)驗(yàn)

目前普遍接受的皮膚衰老機(jī)理和皮膚衰老的主要表現(xiàn)：

1）造成皮膚衰老的因素有很多，目前主要分為自然老化和光老化[9]。自然老化由機(jī)體的內(nèi)部因素引起，比如機(jī)體在代謝過(guò)程中產(chǎn)生自由基，自由基是一類(lèi)瞬時(shí)形成的含不成對(duì)電子的原子或功能基團(tuán)，普遍存在于生物系統(tǒng)。自由基的化學(xué)性質(zhì)活潑，可攻擊生物體內(nèi)的DNA、蛋白質(zhì)和脂類(lèi)等大分子物質(zhì)，造成損傷，如DNA的斷裂、交聯(lián)、堿基羥基化等。其種類(lèi)多、數(shù)量大，是活性極高的過(guò)渡態(tài)中間產(chǎn)物，如O2ˉ、OH 和各類(lèi)活性氧中間產(chǎn)物（reactive oxygen metabolite ROM）[10]。大量實(shí)驗(yàn)證明，體內(nèi)自由基過(guò)多可使超氧化物歧化酶與抗氧化酶的活性減低，加速機(jī)體的衰老進(jìn)程。因此，如何清除體內(nèi)的自由基以及抗氧化能力的提高，是延緩機(jī)體的衰老的關(guān)鍵。

2）皮膚衰老最明顯的表現(xiàn)是皮膚松弛、產(chǎn)生皺紋，皺紋的產(chǎn)生在很大程度上由成纖維細(xì)胞的衰老造成。成纖維細(xì)胞是皮膚真皮中的主要細(xì)胞成分，其正常的增殖、分化維系著皮膚正常的結(jié)構(gòu)和生理功能，真皮衰老反映在細(xì)胞水平主要表現(xiàn)為成纖維細(xì)胞的衰老[11]。

針對(duì)以上皮膚衰老的機(jī)理和主要表現(xiàn)，本文進(jìn)行了蓮花子房提取物清除自由基的實(shí)驗(yàn)和蓮花子房提取物對(duì)人體成纖維細(xì)胞的作用探究實(shí)驗(yàn)。

從圖片中可以看出，添加蓮花子房提取物的2、3組細(xì)胞密度均大于空白對(duì)照組。且2、3組細(xì)胞排列整齊、大小均一、胞體光滑，細(xì)胞健康。

剩余的4、5、6、7、8組的細(xì)胞密度均大于空白對(duì)照組，具體濃度分布見(jiàn)圖3蓮花子房提取物添加量對(duì)人體成纖維細(xì)胞濃度的影響。

（2）對(duì)72h后八組細(xì)胞濃度數(shù)據(jù)進(jìn)行整理得如下折線圖

從折線圖中可以看出，72h后添加蓮花子房提取物的組比空白對(duì)照組的細(xì)胞濃度都高，大約相差2000CPM。說(shuō)明添加蓮花子房提取物對(duì)細(xì)胞分裂增長(zhǎng)有明顯促進(jìn)作用，且和添加濃度有依賴(lài)關(guān)系，整體呈上升趨勢(shì)。蓮花子房提取物對(duì)人體成纖維細(xì)胞的活性和健康有促進(jìn)作用。

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