沈玉琴 許聯(lián)紅 高志洪

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)是一種以慢性破壞性關(guān)節(jié)病變?yōu)樘卣鞯娜硇宰陨砻庖卟?。具有高發(fā)性、高致殘性等特點(diǎn), 早期診斷和治療是減少和阻止病情發(fā)展及防止致殘的關(guān)鍵。RA的發(fā)病機(jī)制仍未明確, 近年的研究表明瓜氨酸化現(xiàn)象可能與RA的發(fā)病相關(guān)［1,2］。在1987年美國風(fēng)濕病協(xié)會(huì)(ARA)RA的診斷標(biāo)準(zhǔn)中, 檢測(cè)血清IgM類RF是唯一的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo),但RF在疾病早期常呈陰性, 不能預(yù)測(cè)早期患者。為實(shí)現(xiàn)對(duì)RA的早期診斷, 2009年美國風(fēng)濕病學(xué)學(xué)會(huì)和歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟(ACR/EULAR)共同提出了新的RA分類標(biāo)準(zhǔn), 將抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(anti-cyclic citrullinated peptide antibodies, anti-CCP)和RF共同作為RA的血清學(xué)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)［3］。本文通過全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)抗CCP抗體, 并評(píng)價(jià)其對(duì)RA的診斷效能和臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 RA組：選取江蘇大學(xué)附屬武進(jìn)醫(yī)院2011年11～2013年6月風(fēng)濕免疫科住院類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者144例,男 /女 ：32/112, 年齡 (24～87)歲 , 平均為 (56.3±13.5)歲 , 均符合2009年美國風(fēng)濕病學(xué)學(xué)會(huì)和歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟(ACR/EULAR)修訂的RA分類標(biāo)準(zhǔn)。非RA的其他風(fēng)濕病組(非RA組)：為本院同期風(fēng)濕免疫科住院患者81例, 男/女：17/64, 年齡(22～83)歲, 平均為(55.6±15)歲。包括骨關(guān)節(jié)炎(OA)34例, 系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)11例, 干燥綜合征(SS)12例,強(qiáng)直性脊柱炎(AS)15例, 反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎(ReA)9例。RA組和非RA組間年齡、性別差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 研究方法 采用電化學(xué)發(fā)光儀(Cobas E601, 德國)測(cè)定抗CCP抗體, <7 U/ml的結(jié)果記為7 U/ml, >500 U/ml的記為500 U/ml, 抗CCP抗體>17 U/ml定為陽性臨界值。特定蛋白分析儀(BNP,德國)免疫透射比濁法測(cè)定RF, RF<9.56 IU/ml的記為9.56 IU/ml, 以RF>15 IU/ml定為陽性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析, 抗CCP抗體、RF血清水平測(cè)定結(jié)果用(±s)表示, 濃度比較采用秩和檢驗(yàn), 計(jì)數(shù)資料采用配對(duì)卡方檢驗(yàn)。使用MedCalc軟件進(jìn)行ROC曲線分析比較。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。抗CCP抗體與ESR、CRP及RF的相關(guān)性采用SPSS17.0的相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1 兩組間血清抗CCP 抗體和RF血清水平 RA組血清抗CCP抗體水平和陽性檢出率明顯高于非RA組(P<0.001)；兩組間RF水平和陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001), 見表1。

2.2 血清抗CCP抗體和RF的ROC曲線分析 依據(jù)是否診斷為RA作為狀態(tài)變量, 血清RF和抗CCP抗體檢測(cè)結(jié)果繪制ROC曲線, 見圖1。抗CCP抗體的AUC與RF差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)?？笴CP抗體檢測(cè)敏感性為94.4%高于RF的89.6%, 但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；抗CCP抗體檢測(cè)特異性為97.5%明顯高于RF的88.9%(P<0.05), 見表2。

圖1 抗CCP 抗體和RF 的ROC 曲線比較

表1 兩組間血清抗CCP 抗體和RF血清水平比較( ±s)

表1 兩組間血清抗CCP 抗體和RF血清水平比較( ±s)

?

表2 血清抗CCP抗體和RF濃度檢測(cè)的AUC、敏感度和特異度比較

2.3 抗CCP抗體濃度與ESR和CRP的相關(guān)性 抗CCP抗體濃度和RF濃度, 及與RA活動(dòng)度相關(guān)的血清學(xué)指標(biāo)ESR和CRP水平均無相關(guān)性(P>0.05), 見表3。

表3 抗CCP 抗體濃度與ESR、CRP及RF的相關(guān)性

3 討論

RF是一種以變性IgG為靶抗原的自身抗體, 主要存在于RA患者的血清和關(guān)節(jié)液中, 是最早應(yīng)用于RF診斷的檢測(cè)指標(biāo), 但在其他結(jié)締組織疾病、慢性感染性疾病、腫瘤及正常老年人群也可出現(xiàn)RF升高, 甚至正常人中也有一定的陽性率, 故特異性較差?？笴CP抗體是環(huán)狀聚絲蛋白的多肽片段, 以IgG型為主。2000年Schellekens等［4］首先報(bào)道了用ELISA法檢測(cè)抗瓜氨酸抗體, 該方法采用針對(duì)環(huán)狀瓜氨酸而非自然條件下的線狀瓜氨酸為抗原 故將檢測(cè)出的抗體稱之為抗環(huán)瓜氨酸抗體(anti-cyclic citrullinated peptide antibodies,抗CCP抗體), 近年來抗CCP抗體才被廣泛應(yīng)用［5］。

本研究發(fā)現(xiàn)RF在RA組中陽性率為88.9%, 非RA組中陽性率為11.1%, 在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、干燥綜合癥、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎及骨關(guān)節(jié)炎中均存在RF陽性?？笴CP抗體在RA組和非RA組中的陽性率分別為93.1%和2.5%, 僅系統(tǒng)性紅斑狼瘡中存在2例陽性。

ROC曲線分析結(jié)果顯示, 抗CCP抗體的AUC為0.956與RF(0.930)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。當(dāng)抗CCP抗體以11.34 U/ml,RF以>13.8 IU/ml為最佳cut-off 值時(shí), 抗CCP抗體檢測(cè)敏感性為94.4%高于RF的89.6%, 但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；抗CCP抗體檢測(cè)特異性為97.5%明顯高于RF的88.9%(P<0.05)?？笴CP抗體的高特異性對(duì)于RF陰性的RA患者有非常高的診斷價(jià)值。另外, 本文未發(fā)現(xiàn)抗CCP抗體與RF血清水平存在相關(guān)性。分析抗CCP抗體與RA活動(dòng)度相關(guān)的血清學(xué)指標(biāo)ESR和CRP水平均無明顯相關(guān)性, 與Munevver S等報(bào)道的結(jié)果相一致。

本實(shí)驗(yàn)室采用的電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)抗CCP抗體具有較高的敏感性和特異性, 結(jié)果穩(wěn)定可靠, 自動(dòng)化程度高, 可用于臨床常規(guī)檢測(cè), 可提高RA早期診斷的準(zhǔn)確性。

［1］Klareskog L, Widhe M, Hermansson M, et al.Antibodies to citrullinated proteins in arthritis: pathology and promise.Curr Opin Rheumatol, 2008(20): 300-305.

［2］Suzuki A, Yamada R, Yamamoto K.Citrullination by peptidylarginine deiminase in rheumatoid arthritis.Ann N Y Acad Sci, 2007(1108):323-339.

［3］Polido PJ, Vieira SE, Fonseca JE.Rheumatoid arthritis: what is refractory disease and how to manage it .Autoimmun Rev, 2011,10(11): 707-713.

［4］Schellekens GA, Visser H, de Jong BA, et al.The diagnostic properties of rheumatoid arthritis recognizing a cyclic citrullinated peptide.Arthritis Rheum, 2000(43): 155-163.

［5］Cho SY, Kang SY, Lee HJ, et al.A comparative evaluation of the diagnostic value of anti- cyclic citrullinated peptide and rheumatoid factor in rheumatoid arthritis.Korean J Lab Med, 2008, 28 (1): 39-45.