王喜周,應(yīng)躍躍,陳學(xué)智,張 昊,姚曉偉
(1.麗水學(xué)院 醫(yī)學(xué)院,浙江 麗水 323000;2.麗水市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督檢測院,浙江 麗水 323000;3.浙江省景寧縣人民醫(yī)院,浙江 景寧 323500)
全葉榕Ficus pandurata var.hoiophylla為桑科Moraceae榕屬Ficus植物,別名細葉牛乳繩、小葉牛奶繩、小攀坡。其香氣濃郁,在浙西南一帶常作為調(diào)味品和保健品,尤其喜好在烹飪雞、豬蹄等葷菜時將全葉榕根莖葉放入鍋中一同煎熬,認(rèn)為它不僅增加菜肴的香味,還可降低菜肴的油膩感;全葉榕在浙西南民間是一種常用的草藥,也是畬族最常用的草藥之一,認(rèn)為它有祛乏解困,健胃消食,行氣活血,祛風(fēng)除濕的功效[1];劉傳荷等[2]認(rèn)為全葉榕是一種優(yōu)良的食藥兩用植物。全葉榕作為小香勾的基原載入《浙江省中藥炮制規(guī)范》[3],認(rèn)為全葉榕能健脾,除濕,用于消化不良、小兒疳積、腹瀉、疝氣的疾病的治療。雖然民間有長期食用或藥用全葉榕的習(xí)慣,但是對它開發(fā)研究得不多。本研究通過對其營養(yǎng)成分及黃酮進行了系統(tǒng)分析,為其進一步開發(fā)利用提供依據(jù)。
全葉榕新鮮植株采集于浙江省遂昌縣白馬山國家森林公園,經(jīng)麗水市食品藥品監(jiān)督所研究員李建良鑒定為全葉榕。選用10株大小相近的全葉榕,分別分離每株的葉、莖和根,用超純水洗凈,自然曬干,粉碎過60目篩,各株的葉、莖和根粉碎物,單獨密閉保存?zhèn)溆?。蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品購自中國藥品生物制品檢定所,產(chǎn)品號為(100080-200707);濃硫酸、硫酸鉀、氫氧化鉀、鹽酸、乙醚、石油醚、草酸、鎂粉反應(yīng)、四氫化二硼鈉、三氯化鋁、二硝基苯肼、硫脲、乙酸鋅、硫酸銅、硼酸、氫氧化鈉、酒石酸鉀鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉、苯酚等均為分析純。茚三酮為優(yōu)級純。
日本日立公司生產(chǎn)的高速氨基酸分析儀(L-8800);瑞士BUCHI公司生產(chǎn)的全自動凱氏定氮蒸餾儀(TC2200-001);瑞典波通儀器公司出品的全自動粗纖維分析儀(Fibretherm FT12);奧地利安樂帕有限公司生產(chǎn)的超高壓微波消解儀(Multiwave300);尤尼柯(上海)儀器有限公司生產(chǎn)的紫外可見分光光度計(UV-2102PC);美國PE公司生產(chǎn)的電感耦合等離子發(fā)射質(zhì)譜儀(ICP-MS,ELANDRC-e)。
1.3.1 營養(yǎng)成分及礦質(zhì)元素測定 水分:直接干燥法,參照GB 5009.3-2010《食品中水分的測定》;粗灰分:高溫灼燒法,參照 GB5009.4-2010《食品微生物學(xué)檢驗沙門氏菌檢驗》;總糖:酸水解法,參照GB/T 5009.8-2008《食品中蔗糖的測定》;蛋白質(zhì):自動凱氏定氮儀法,參照GB 5009.5-2010《食品中蛋白質(zhì)的測定》;粗脂肪:索氏抽提法,參照 GB/T 5009.6-2003《食品中脂肪的測定》;粗纖維:GB/T 5009.10-2003《植物類食品中粗纖維的測定》和Fibretherm FT12中文操作說明書;游離氨基酸:采用日立公司生產(chǎn)的高速氨基酸分析儀(L-8800),參照GB/T 8314-2002《茶游離氨基酸總量測定》;維生素C:2,4-二硝基苯肼法,參照GB/T 5009.86-2003《蔬菜、水果及其制品中總抗環(huán)血酸的測定》;水浸出物:水提法,參照GB/T 8305-2002《茶取樣》;礦質(zhì)元素:按儀器說明書在ICP-MS上測定鉻、錳、鐵、銅、鋅、砷、硒、銀、鎘、汞和鉛元素的含量。分別測定10個樣本葉、莖和根3個部位的營養(yǎng)成分及礦質(zhì)元素的含量。
1.3.2 總黃酮測定[4]材料及處理:取干全葉榕樣品2 g,精密稱定,置100 mL容量瓶中,加體積分?jǐn)?shù)為70%乙醇90 mL,超聲處理(功率250 W,頻率40 kHz)45 min,冷卻后用體積分?jǐn)?shù)為70%乙醇稀釋至刻度,搖勻,過濾,得供試品溶液。供試品溶液中總黃酮的檢識:三氯化鋁反應(yīng);鹽酸-鎂粉反應(yīng);四氫化二硼鈉反應(yīng)。對照品溶液的制備:精密稱取蘆丁對照品適量,加體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇制成不同質(zhì)量濃度的蘆丁溶液(0.000,0.096,0.200,0.400,0.800,2.000 mg·L-1)。標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備:精密量取對照品溶液2.0 mL加入具塞刻度試管中,并加鎂粉100 mg,將試管置冷水?。?5℃左右)中緩緩滴加濃鹽酸3.0 mL,搖勻,加體積分?jǐn)?shù)為70%乙醇至8 mL搖勻,置沸水浴中保溫40 min,取出,迅速冷卻至室溫,用體積分?jǐn)?shù)為70%乙醇補足至10 mL,以純水為空白對照,于526 nm波長處測定吸光度。以吸光度為橫坐標(biāo),蘆丁質(zhì)量濃度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并計算回歸方程??傸S酮的測定:精密量取樣品溶液2.0 mL置加有上述已確定鎂粉用量的具塞刻度試管中,以鎂粉用量為100 mg,反應(yīng)時間40 min,在526 nm處測吸光度。分別測定10個樣本葉、莖和根3個部位的吸光度,并根據(jù)回歸方程計算出供試品溶液中總黃酮的含量。
1.3.3 統(tǒng)計方法 原始數(shù)據(jù)采用SPSS 12.0軟件進行多樣本均數(shù)的兩兩比較(SNK),結(jié)果以x±s表示。
由表1可知:全葉榕葉、莖、根主要成分為蛋白質(zhì)、還原糖和粗纖維,其中葉部的蛋白質(zhì)、總糖、水浸出物和脂肪質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高,分別為174.6,171.4,257.7和14.3 g·kg-1,并且除總糖外與莖、根有顯著性差異;粗纖維最高為莖,達450.7 g·kg-1,葉莖根三者間有顯著性差異。其中葉片的蛋白質(zhì)分別比甘薯、芋頭及山藥等根莖類高 4~6倍;比竹筍粗蛋白高4倍[5]??偺羌s為 149.9~171.4 g·kg-1,可起到降低血漿膽固醇水平,改善大腸功能和血糖生成等作用[6];多糖具有增強機體免疫功能等作用,全葉榕所含的糖類成分可能與民間用其抗疲勞有關(guān)[7];全葉榕蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)較高,而脂肪質(zhì)量分?jǐn)?shù)偏低,非常符合現(xiàn)代人飲食的需要。
表1 全葉榕葉、莖、根的化學(xué)營養(yǎng)成分組成Table 1 Nutritional components of Ficus pandurata var.hoiophylla
由表2可知:全葉榕葉莖根的氨基酸總量分別為為 147.4,23.4和 29.6 g·kg-1,三者間有顯著性差異;根莖葉3部位各種氨基酸種類齊全,配比均衡。在實驗條件下檢測出除色氨酸以外的17種,包括多種人體必需氨基酸,其中人體不能合成需食物供應(yīng)的7種必需氨基酸,其中全葉榕葉部含7種,其量為55.0 g·kg-1;莖與根中含有 6種,分別為 6.6和 8.5 g·kg-1。葉莖根 7種人體必需的氨基酸占氨基酸總量分別為37.33%,26.45%,26.98%(三者間有顯著性差異),其必需氨基酸與非必需氨基酸的比例分別為 1∶1.7,1∶2.8,1∶2.7,超過中國建議的必需氨基酸與非必需氨基酸的比例(1∶4)[8];具有抗中樞疲勞作用的3種支鏈氨基酸(纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸)質(zhì)量分?jǐn)?shù)比較高,占總氨基酸的12.13%。
由表3可見:全葉榕葉、莖、根等3個部位中微量元素較豐富,其中葉片總量最高,根其次,莖最少,且三者間有顯著性差異。3個部位中鐵、鋅和錳質(zhì)量分?jǐn)?shù)均很高,且不同部位間有顯著差異。
供試樣品總黃酮的檢識結(jié)果:鹽酸-鎂粉反應(yīng)顯紅色;四氫硼鈉反應(yīng)顯紅色;三氯化鋁反應(yīng)顯黃色并有熒光。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得回歸方程為:y=0.663 7x+0.001 7(R2=0.999 7)。結(jié)果表明(表4):根部提取所得總黃酮較多(22.02 mg·g-1),其次是葉部(20.85 m·g-1),最少是莖部(7.44 mg·g-1),3 組數(shù)據(jù)多個樣本均數(shù)兩兩比較,葉和根與莖均有顯著性差異(P<0.05),葉與根沒有顯著性差異。其質(zhì)量分?jǐn)?shù)與無花果 Ficus carica 葉的總黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)(24.00 mg·g-1)[9]相當(dāng)。
表2 全葉榕葉、莖、根的氨基酸組成Table 2 Amino acids components of Ficus pandurata var.hoiophylla
表3 全葉榕葉、莖、根的礦質(zhì)元素組成Table 3 Content of mineral elements in Ficus pandurata var.hoiophylla
全葉榕的營養(yǎng)成分測定結(jié)果表明全葉榕蛋白質(zhì)和維生素C的質(zhì)量分?jǐn)?shù)較高,同時,富含多種對人體有益的礦質(zhì)元素,特別是含有豐富的錳、鋅和鐵,提示其可能與抗疲勞有關(guān)。全葉榕氨基酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)豐富,比例適宜,符合聯(lián)合國糧農(nóng)組織/世界衛(wèi)生組織的參考蛋白模式,屬于優(yōu)質(zhì)蛋白。根據(jù)全葉榕的根莖葉三者的微量元素、營養(yǎng)成分、氨基酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)綜合比較,全葉榕的葉片營養(yǎng)價值最高,其次是根。全葉榕營養(yǎng)成分、礦質(zhì)元素及氨基酸的組成表明:全葉榕有較高的營養(yǎng)價值;全葉榕葉莖根的總黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為20.85,7.44和22.02 mg·g-1,超過肉蔻Myristica fragrans(20.9 g·kg-1),茴香 Foeniculum vulgare(2.5 g·kg-1),肉桂 Cinnamomum cassia(11.1 g·kg-1)等許多辛香料的黃酮含量[10]。黃酮具有保肝[8]、 抗氧化[11]、 調(diào)血脂[12]、 強免疫的功能,故全葉榕中的黃酮可能是民間用全葉榕作為保健品的物質(zhì)基礎(chǔ)之一。本研究表明:全葉榕在營養(yǎng)保健和醫(yī)藥用方面具有一定的開發(fā)價值,值得在保健和藥用功能方面開展動物實驗研究。
表4 全葉榕葉、莖、根的總黃酮Table 4 Content of total flavonoid in Ficus pandurata var.hoiophylla
[1]雷后興.中國畬族醫(yī)藥學(xué)[M].北京:中國中醫(yī)藥出版社,2007:307-308.
[2]劉傳荷,倫璇,夏國華.條葉榕的組織培養(yǎng)與快速繁殖[J].植物生理學(xué)通訊,2010,46(6):603-604.LIU Chuanhe,LUN Xuan,XIA Guohua.Tissue culture and rapid propagation of Ficus pandurata Hance var.angustifolia Cheng[J].Plant Physiol Commun,2010,46(6):603-604.
[3]浙江食品藥品監(jiān)督管理局.浙江省中藥炮制規(guī)范[S].杭州:浙江科學(xué)技術(shù)出版社,2005:304-305.
[4]陳化,吳迎椿.超聲波提取小葉榕總黃酮及鑒別[J].時珍國醫(yī)國藥,2008,19(7):1677-1678.CHEN Hua,WU Yingchun. Extraction and identification of total flavanone of Xiaoyerong by ultrasonic wave[J].LI Shizhen Med Mater Med Res,2008,19(7):1677-1678.
[5]黃芝蓉.家常食物藥用大全[M].北京:中國中醫(yī)藥出版社.2000:193.
[6]王子花,申瑞玲,李文全.膳食纖維降血糖研究進展[J].糧食與油脂,2006(7):42-44.WANG Zihua,SHEN Ruiling,LI Wenquan.Research progress in dietary fiber lowering blood glucose[J].Grease Food,2006(7):42-44.
[7]楊世林,熱娜·卡斯木.天然藥物化學(xué)[M],北京:科學(xué)出版社,2010:106-140,218-220.
[8]何照范,張迪青.保健食品化學(xué)及其檢測技術(shù)[M],北京:中國輕工業(yè)出版社,1997:43-60.
[9]楊潤亞,明永飛,王慧.無花果葉中總黃酮的提取及其抗氧化活性測定[J].食品科學(xué),2010,31(16):78-82.YANG Runya,MING Yongfei,WANG Hui. Extraction and free radical scavenging activity of total flavonoids from the leaves of Ficus carica Linn.[J].Food Sci,2010,31(16):78-82.
[10]石雪萍,吳亮亮,高鵬,等.20種食用辛香料抗氧化性及其與黃酮和多酚的相關(guān)性研究[J].食品科學(xué),2011,32(5):83-86.SHI Xueping,WU Liangliang,GAO Peng,et al.Ethanol extracts from twenty edible spices:antioxidant activity and its correlations with total flavonoids and total phenols contents[J].Food Sci,2011,32(5):83-86.
[11]VIJAYAKUMAR S,PRESANNAKUMAR G,VIJAYALAKSHMI N R.Antioxidant activity of banana flavonoids[J].Sep Purif Technol,2008,79:279-282.
[12]BHAVNA S,CHANDRAJEET B,PARTHA R.Hypoglycemic and hypolipidemic effects of flavonoid rich extract from Eugenia jambolana seeds on streptozotocin induced diabetic rats[J].Food Chem Toxicol,2008,46:2376-2383.