陳明坤

在傳統(tǒng)的血清標(biāo)本分離方法中，分離速度緩慢嚴重延長了檢驗報告，尤其是急診檢驗報告的發(fā)出時間，對患者的治療造成了阻礙[1]。另外，利用傳統(tǒng)方法制備的血清中常常遺留下纖維蛋白凝絲等雜質(zhì)，在接下來的檢驗中，會對檢驗的器械造成損傷，在管道比較狹窄的器械中造成堵塞。同時，利用常規(guī)方法對血液進行分離，需要很高的操作技巧，一個小的失誤就會對血液成分造成破壞，從而延長分離時間，不能滿足臨床對檢驗結(jié)果的需要。為了避免傳統(tǒng)方法對血液檢驗造成的不便，提升檢驗速度，筆者所在科室采用肝素鈉抗凝血漿作為常規(guī)生化指標(biāo)檢測，整個過程花費時間明顯縮短，檢驗結(jié)果的誤差比常規(guī)方法更小[2-3]。為了對肝素抗凝血漿應(yīng)用于急診生化檢驗的實用性和使用方法進行探討，本科室在近期隨機抽取了120例患者進行急診生化項目檢查，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 進行本次實驗的患者均是從本院近期所收治的患者中隨機抽取的，共120例，其中，男64例，年齡14～58歲，平均29.6歲，女56例，年齡16～63歲，平均32.1歲。在本次實驗中，所用儀器為貝克曼DXC800。

1.2 方法 隨機抽取120例患者的血清和肝素抗凝血漿進行10項急診生化項目測定。在進行實驗過程中，應(yīng)該保障患者正常的生理狀態(tài)。空腹抽取患者靜脈血于真空肝素抗凝管和真空普通管各3.0 ml。將真空抗凝管的血液輕輕上下翻轉(zhuǎn)使得肝素鈉與血液混合均勻，便于肝素鈉發(fā)揮血液抗凝作用，進行離心，離心速度3000 r/min，時間15 min，將血漿分離，實驗備用。普通管放置在室溫下進行血液自行凝固，然后在37 ℃恒溫箱中水浴15～30 min，應(yīng)特別注意血液在恒溫箱中的保管，進行離心，離心速度和時間同真空抗凝管，將血清分離，實驗備用。除去檢驗過程中無法使用的實驗標(biāo)本（脂血、溶血和黃疸等），在相同條件下進行測定。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 13.0 統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料以（±s）表示，采用配對資料t檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

在檢驗結(jié)果中，血清和血漿中所檢驗的K+、Na+以及Glu的測定結(jié)果比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。而鉀（K+）的檢驗中差異更為顯著（P<0.01）。其他幾個檢驗項之間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。根據(jù)血鉀濃度的比較，血清鉀平均濃度為（Y）0.5 mmol/L，高于血漿鉀平均濃度（X），回歸方程為Y=0.715X+0.499，r=0.749。這就說明，在利用肝素鈉進行抗凝的真空管中的血液更適合于分離操作，方便血漿10項急診生化項目的檢驗。詳見表1。

組別 K+（mmol/L） Na+（mmol/L） Cl-（mmol/L） Ca2+（mmol/L） Mg2+（mmol/L） Glu（mmol/L） Bun（mmol/L）血清組 4.09±0.32 134.5±3.2 102±2.3 2.2±0.11 0.801±0.052 4.66±1.29 3.88±1.33血漿組 3.77±0.33 138.9±3.3 103±2.6 2.19±0.23 0.812±0.065 5.33±1.36 3.86±1.16 P值 0.039 0.008 0.975 0.974 0.79 0.044 0.057

續(xù)表1

3 討論

患者的病情是不斷發(fā)展的，對于患者來說，擁有更多的治療時間無疑是獲得了更多的機會，只有在充足的治療時間中，才能使得急診患者搶救成功，提高搶救的成功率，降低醫(yī)療事故的發(fā)生。在臨床的治療中，快速準(zhǔn)確無疑是診斷工作的最基本的要求，是醫(yī)務(wù)人員挽救生命的關(guān)鍵因素。而快捷準(zhǔn)確的生化檢驗工作在很大程度上影響著診斷工作的進展，所以說，實現(xiàn)生化檢驗工作的準(zhǔn)確迅速具有重要的意義[4]。近些年來，隨著患者人數(shù)的不斷上升，加快急診生化檢驗報告的生成速度無疑成為了提高醫(yī)院經(jīng)濟效益的重要手段之一。對于患者血液的急診生化檢驗而言，根據(jù)常規(guī)的檢驗方法，耗時耗力，延長了患者的病患時間，將肝素應(yīng)用于血液生化檢驗之中，不僅大幅度降低了急診生化檢驗所耗費的時間，還為診斷和救治工作的進行提供了更為可靠的診斷報告，實現(xiàn)了急診救治過程中死亡率的降低[5-6]。

肝素具有多方面的抗凝作用，是一種分子量較大的粘多糖，含有硫酸基團，自身帶多個負電荷。對于血液抗凝的作用機制主要是對血液中的凝血活酶及凝血酶的形成和活性進行抑制，阻礙血液中的血小板聚集，從而達到血液抗凝的作用。具體來說，肝素能夠與血液中的抗凝血酶發(fā)揮協(xié)同作用，在低濃度的環(huán)境下，血液中的IXa、Ⅷ和PF3之間不能發(fā)生有效的相互反應(yīng)。肝素還能進一步強化抗凝血酶Ⅲ的抗凝作用，抑制血液中絲氨酸蛋白酶的活性，達到阻止凝血酶形成的目的[7]。同時，肝素還具有抑制凝血酶的自我催化的發(fā)生和抑制血液中的X因子的作用。由于肝素能夠在多方面對血液進行抗凝，所以醫(yī)務(wù)人員在進行血液生化檢驗中，為防止血液發(fā)生凝集影響檢驗結(jié)果，故多將肝素加入到將進行檢驗的血液中，方便檢驗操作，縮短時間。下面本文將對肝素對幾項檢驗項的作用進行深入的研究。

肝素鈉抗凝血漿對K+檢驗結(jié)果的影響，通過表1觀察可知，兩組檢驗結(jié)果中的K+濃度差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01），產(chǎn)生這種情況的原因主要包括以下幾點：（1）溶血現(xiàn)象的發(fā)生。在利用肝素鈉進行血漿的抗凝過程中，發(fā)生了極少量的溶血，而在普通血液標(biāo)本的凝固過程中，血小板的破裂會釋放出一小部分的K+到血液中，同時在離心過程中，由于離心機和離心速度的影響，使得檢驗對象中的部分紅細胞細胞膜遭到破壞，存在于細胞內(nèi)的K+流入血液。（2）K+的滲出。根據(jù)細胞膜內(nèi)外濃度差的滲透原理，隨著血清分離時間的延長，紅細胞內(nèi)的部分K+會滲出到紅細胞外，升高血清中的K+濃度[8-9]。（3）肝素與血液中的K+生成肝素鉀，影響離子電極對K+的測定，使血漿K+濃度低于血清K+。

肝素鈉抗凝血漿對Na+檢驗結(jié)果的影響，通過表格數(shù)據(jù)得知，兩組中的Na+含量也存在較大的差異（P<0.05），造成這種結(jié)果的原因主要是由于實驗過程中發(fā)生了肝素與Na+的結(jié)合，降低了離子電極對Na+的敏感性，但是在肝素鈉抗凝的血漿中含有較高的Na+，由于肝素的結(jié)合有所降低了Na+在血液中的含量，所以血漿Na+高于血清Na+濃度肝素鈉抗凝血漿對Glu檢驗結(jié)果的影響，根據(jù)表1的檢測結(jié)果可知，肝素鈉抗凝血漿Glu含量明顯高于血清中Glu含量，造成這種現(xiàn)象發(fā)生的主要原因可能是因為檢驗對象在進行檢驗的過程中，由于檢驗時間過長，血液中的細胞需要進行自身代謝，導(dǎo)致標(biāo)本中部分Glu作為底物被分解消耗。相比運用肝素的抗凝血漿，由于血漿未凝集，分離過程持續(xù)時間較短，減少了細胞的代謝時間，使得Glu消耗量降低。

通過探究發(fā)現(xiàn)，肝素抗凝血漿中的LDH和α-HBD兩種物質(zhì)的含量低于血清組（P<0.05），造成這種情況發(fā)生的原因可能是因為在血液進行凝固和離心的過程中，由于離心機轉(zhuǎn)速過快和操作的失誤，導(dǎo)致血細胞在實驗過程中出現(xiàn)了變形和被擠，細胞膜破裂，使得細胞內(nèi)高濃度的LDH釋放進入血清中，導(dǎo)致血清中的LDH含量升高，兩組實驗結(jié)果的差異性較大。對于α-HBD，當(dāng)α-羥基丁酸存在于周圍環(huán)境中，LDH的H亞基則與其發(fā)生反應(yīng)，生成物為α-HBD，隨著血清中的LDH數(shù)目的增多，其在血清中的含量也升高，使得兩組的實驗結(jié)果存在較大的差異性。

肝素鈉抗凝血漿對TP和GGT檢驗結(jié)果的影響，在兩組實驗結(jié)果中，TP含量也存在一定的差異，原因可能是因為利用肝素進行抗凝后的血漿同血清比較而言，血漿中的纖維蛋白原的含量有所升高，若此時通過血漿中TP含量比血清中TP之間的比較，可以更為直接的得到體內(nèi)蛋白質(zhì)的總量。表格中肝素抗凝血漿中的GGT含量明顯低于血清中，這就表明，血漿中GGT的活力明顯高于血清，其在肝素抗凝酶催化下所進行的活力變化機制仍需進一步探討。

就目前臨床血清學(xué)應(yīng)用而言，靜脈血清作為生化檢驗分析的標(biāo)本而得到了較為普遍的使用，靜脈血清在很大程度上決定著患者血液中各項指標(biāo)的測定以及臨床診斷依據(jù)。但是，在實際應(yīng)用過程中，血清的檢測不一定就代表著正常指標(biāo)的測定，也有可能因為標(biāo)本的污染而影響測驗的結(jié)果。這是因為血清分離的過程耗時較長，在整個過程中血細胞所進行的生理代謝和凝固、離心都有可能導(dǎo)致細胞變形、擠壓和破壞等情況的發(fā)生，這些情況一旦發(fā)生，都會對檢測的部分項目結(jié)果造成影響，并隨著研究時間的延長導(dǎo)致結(jié)果差異的拉大。應(yīng)用肝素進行抗凝后，可以避免血液凝固的發(fā)生，提高了血清學(xué)檢測過程和結(jié)果的準(zhǔn)確性，為臨床診斷提供了更為實用和可靠的依據(jù)。

經(jīng)過本實驗的深入研究分析，確定肝素抗凝血漿檢驗適合于血漿10項急診生化項目。將肝素運用于血漿的生化檢驗中，由于肝素自身的抗凝作用，能夠保證檢驗過程中的檢驗對象的活性，避免因為血液凝集影響檢驗結(jié)果。同時，肝素的應(yīng)用還有效的降低了檢驗所需要的時間，為臨床救治提供了更為充足的救治時間，適合于急診自動生化檢驗的需求。需要進行特別說明的是，在進行肝素的應(yīng)用中，在凝血過程中，血小板的參與也會釋放一定量的鉀離子，導(dǎo)致血漿和血清中的鉀離子的濃度存在差異，通常約為0.5 mmol/L，此濃度差在檢驗中應(yīng)特別注意。

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