朱俊民 李付廣

1 材料與方法

1.1 材料 鄭州大學第一附屬醫(yī)院兒科門診收治48例過敏性哮喘患兒(2011年4月～2012年5月), 均有明確的哮喘病史和癥狀, 符合支氣管哮喘診斷標準(GINA), 皮膚過敏原檢測發(fā)現室塵螨(HDM)抗原陽性, 分組：①哮喘組, 有輕微癥狀的哮喘患者；②HDM治療組。HDM過敏原提取物Der.P1(Alutard-SQ, ALK-Abeeo, Denmark)皮下注射進行標準化SIT治療1.5～2年。

表1 各組特點

HDM-SIT采取皮下注射的方式, 前15周每周注射1次,初次劑量為0.00196 μg, 抗原量逐漸增加, 至劑量最大到9.8 μg后, 保持劑量一定, 增加間隔時間, 最長的間隔時間達8周。采集哮喘患兒哮喘組和HDM治療組外周靜脈血各3 ml, 放入含EDTA抗凝的采血管中。

1.2 方法

1.2.2 方法 采用流式細胞儀對采集的標本進行淋巴細胞的檢測, 并登記結果。

1.3 實驗結果分析 應用SPSS17.0進行數據的統(tǒng)計與分析。

2 結果

2.1 流式細胞技術檢測數據結果及分析 由表2可知, 與哮喘組相比,Treg細胞占T細胞的百分比在HDM治療組明顯增高(P<0.05)。

表2 特異性免疫治療前后 Treg/T細胞比率(%)

表2 特異性免疫治療前后 Treg/T細胞比率(%)

注：a 與哮喘組相比差異有統(tǒng)計學意義, P<0.05

組別 CD4+CD25high+ CD127-/CD4+(%)哮喘組 6.11±1.06 HDM治療組 9.45±0.76 P 0.000a

2.2 流式細胞檢測圖如下

圖1 流式細胞分析哮喘組外周血淋巴細胞的含量

圖2 流式細胞分析SIT治療組外周血淋巴細胞的含量

3 討論

過敏性哮喘是由變應原進入人體后, 刺激易感機體產生相應的IgE類抗體, 誘發(fā)Ⅰ型變態(tài)反應。使大量的肥大細胞、嗜酸性粒細胞、肺泡巨噬細胞等炎癥細胞在氣道聚集, 并分泌多樣化、大量的介質和細胞因子, 這些物質不斷的相互作用導致氣道反應性增高, 氣道痙攣、分泌物增多, 引起氣道的慢性炎癥［1］。近年來流行病學調查顯示, 我國哮喘病的發(fā)病率逐年升高, 兒童過敏性哮喘的發(fā)病率顯著高于成年人。由于哮喘漫延性和反復性, 使得兒童的身體健康和心理健康深受影響, 給患兒、家庭和社會都造成了極大的經濟和心理負擔。過敏性哮喘過敏原多種多樣, 而室塵螨在兒童過敏性哮喘中最為常見。

在本文的研究中, 患病兒童臨床觀察發(fā)現, SIT可以減輕患兒的臨床癥狀, 減少疾癥狀, 減少吸入激素的用量。這表明SIT可有效改善哮喘的臨床癥狀, 是目前一種有效的特異性治療哮喘的方法。本實驗發(fā)現, 隨著SIT治療的進行, 用流式細胞技術檢測患者外周血, 發(fā)現T細胞細胞占細胞百分比在HDM治療組比哮喘組顯著升高(P<0.05)。特異性免疫治療后T細胞細胞的升高, 提示了在這個治療過程中, 有可能是Treg細胞中的細胞亞群發(fā)揮了重要的抑制哮喘的作用, 這與以病反復發(fā)作, 而且還可以減輕發(fā)作的嚴重程度, 同時也可合并有過敏性鼻炎患者的鼻部前的研究結果相一致［7］。由此推測, 隨著細胞數量和功能的恢復, 可能是通過細胞間的直接接觸或免疫抑制因子(IL-10、TGF-β)抑制效應性T細胞的活化, 也可以抑制專職抗原提呈細胞的抗原加工提呈功能, 緩解哮喘的發(fā)生發(fā)展。細胞如何發(fā)揮作用, 其確切作用機制仍需進一步的研究。

［1］許以平, 金丕煥, 溫挺桓, 等.螨類過敏與支氣管哮喘.現代免疫學, 1981, 1(2): 15-18.

［2］Sakaguchi S, Miyara M, Costantino C M, et al.FOXP3+ regulatory T cells in the human immune system.Nat Rev Immunol, 2010,10(7):490-500.

［3］Sakaguchi S.Regulatory T cells: history and perspective.Methods Mol Biol, 2011(707): 3-17.

［4］Wang W, Li X, Liu YG, et al.Effect of house dust mite immunotherapy on interleukin-10-secreting regulatory T tells in asthmatic children.Chinese Med J, 2010, 123(15):2099-2104.

［5］Bosco A, Ehteshami S, Stern D A, et al.Decreased activation of inflammatory networks during acute asthma exacerbations is associa.Mucosal Immunol, 2010, 3(4):399-409.

［6］Ray A, Khare A, Krishnamoorthy N, et al.Regulatory T cells in many flavors control asthma.Mucosal Immunol, 2010, 3(3):216-229.

［7］Razi C H, Harmanci K, Abaci A, et al.The immunostimulant OM-85 BV prevents wheezing attacks in preschool children.J Allergy Clin Immunol, 2010, 126(4):763- 769.

［8］Lee D C, Harker J A, Tregoning J S, et al.CD25+ natural regulatory T cells are critical in limiting innate and adaptive immunity and resolving disease following respiratory syncytial virus infection.J Virol, 2010, 84(17):8790-8798.