李 凱，王國良，朱文斌，呂永林

（1.溫州市漁業(yè)技術推廣站，浙江溫州 325003；2.寧波大學海洋學院，浙江寧波 315211；3.浙江省海洋水產(chǎn)研究所，浙江舟山 316100）

鋸緣青蟹Scylla serrata，現(xiàn)名擬穴青蟹Scylla paramamosain，屬甲殼綱Crustacea、十足目Decapoda、短尾派Brachyura、梭子蟹科Portunidae、青蟹屬Scylla，簡稱青蟹，俗稱蝤蛑。近年來，青蟹受高密度放養(yǎng)、強化投餌、過度施肥、濫用藥物等人為因素的影響，加上養(yǎng)殖水域受工業(yè)、農(nóng)業(yè)和生活污水的污染，導致種質(zhì)性狀退化，抗病力下降，發(fā)病率呈顯著上升趨勢。據(jù)我站統(tǒng)計，2007-2009年整個溫州地區(qū)鋸緣青蟹養(yǎng)殖病害直接經(jīng)濟損失高達4 691.69萬元。黃水病是當前青蟹養(yǎng)殖中最為主要的疾病之一，其發(fā)病范圍大，死亡率高，給當?shù)厍嘈佛B(yǎng)殖從業(yè)人員造成了巨大的經(jīng)濟損失，嚴重制約了該行業(yè)的發(fā)展。為探索鋸緣青蟹黃水病死亡原因、流行規(guī)律及危害狀況，進一步為該病的防治打下堅實基礎，2007-2009年，我們對溫州地區(qū)的鋸緣青蟹病害流行情況進行了跟蹤和研究。

1 材料與方法

1.1 鋸緣青蟹常規(guī)病害監(jiān)測

2007-2009 年，根據(jù)全市鋸緣青蟹養(yǎng)殖的面積、分布等整體情況，分別在樂清、瑞安、龍灣、蒼南等地開展鋸緣青蟹病害監(jiān)測，共監(jiān)測池塘78口、監(jiān)測面積192.1 hm2。對發(fā)病青蟹養(yǎng)殖塘采取實地調(diào)查、及時取樣、實驗與分析相結(jié)合的方法，對養(yǎng)殖鋸緣青蟹疾病的主要癥狀、流行情況、危害程度、管理方法以及環(huán)境因子等作詳細記錄、分析。監(jiān)測人員每月定期下到監(jiān)測點進行指導養(yǎng)殖和了解情況，并詳細記錄《溫州市青蟹病害監(jiān)測記錄表》，形成監(jiān)測點養(yǎng)殖檔案。監(jiān)測內(nèi)容為：監(jiān)測點的布置、發(fā)病池塘數(shù)量和面積、病原、發(fā)病面積、發(fā)病率、死亡數(shù)量、死亡率、疾病造成的經(jīng)濟損失、發(fā)病溫度、規(guī)格、放養(yǎng)密度和養(yǎng)殖面積等指標。

1.2 病害調(diào)查的時間與地區(qū)

2007-2009 年，我們在鋸緣青蟹病害高發(fā)季節(jié)對樂清、瑞安、龍灣、蒼南四個青蟹主要養(yǎng)殖區(qū)的36個養(yǎng)殖場(面積共104.1 hm2)進行了病害調(diào)查，共發(fā)放調(diào)查表36份，受訪人數(shù)50余人次。發(fā)放《鋸緣青蟹養(yǎng)殖病害發(fā)生情況調(diào)查表》，統(tǒng)計養(yǎng)殖面積、放養(yǎng)密度、養(yǎng)殖模式、發(fā)病時間、病蟹癥狀、危害程度及環(huán)境變化等主要情況，結(jié)合往年發(fā)放的調(diào)查結(jié)果，以分析鋸緣青蟹黃水病的發(fā)病、流行和死亡情況，找出鋸緣青蟹黃水病的流行規(guī)律。

此外，我們還分別在龍灣、瑞安等地，召集部分青蟹養(yǎng)殖從業(yè)人員，以座談會的形式開展青蟹養(yǎng)殖病害的社會調(diào)查，掌握第一手資料。

1.3 理化環(huán)境因子監(jiān)測方式和方法

1.3.1 日常水質(zhì)記錄

鋸緣青蟹監(jiān)測點養(yǎng)殖管理人員開展水質(zhì)日常記錄，監(jiān)測指標與方法如下：

水溫：表層溫度計；氣溫：溫度計；pH：南京特安公司的2003-MR水質(zhì)檢測盒；氨氮：南京特安公司的2003-MR水質(zhì)檢測盒；透明度：透明度盤。

1.3.2 實驗室定期監(jiān)測

委托瑞安市海洋與漁業(yè)局實驗室，定期對青蟹養(yǎng)殖區(qū)域的池塘水質(zhì)進行檢測。其中，海水溫度、pH、鹽度等進行現(xiàn)場測量，溶氧、亞硝酸鹽、氨氮等固定水樣后帶回實驗室再做檢測。參照國家方法測定（國家監(jiān)督局，1992），監(jiān)測指標與方法如下：

海水溫度：溫度計法，方法來源GB 13195-91；pH：玻璃電極法，方法來源GB 6920-86；鹽度：鹽度計；溶氧（DO）：采用碘量法，方法來源GB 7489-87；亞硝酸鹽：采用萘乙二胺分光光度法，方法來源HJ/T 84-2001；氨氮：采用次氯酸法，方法來源GB 7481-87。

氣象因子從瑞安市氣象局獲得，包括日平均氣溫、平均氣壓、降雨量。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

利用EXCEL、WORD和SPSS等數(shù)據(jù)統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)整理、作圖及分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 鋸緣青蟹黃水病的癥狀

在黃水病高發(fā)季節(jié)里，發(fā)病初期病蟹往往攝食量大幅下降甚至停止攝食，爬行遲緩，到后期嚴重時往往會爬至池塘的斜坡或者灘面上死亡。較前部分死蟹，大部分則直接死于池塘底部，不容易發(fā)現(xiàn)，排水時可見。病蟹應激反應強烈，人抓之則自切其螯足或步足；蟹體較瘦弱，有的體表發(fā)紅，內(nèi)臟及步足充滿黃色液體，步足基關節(jié)膜發(fā)白，或關節(jié)邊緣發(fā)紅，脫水，步足斷口有濁白色的液體流出，步足關節(jié)失去彈性：剖開頭胸甲，甲殼內(nèi)充滿黃色(部分是乳白色)的粘性液體，肝胰腺模糊呈紅棕色或乳白色，腸胃空，肌肉不清晰，鰓渾濁，有黑色雜質(zhì)，在癥狀較輕時鰓尖發(fā)黑，嚴重時全鰓發(fā)黑；甲殼內(nèi)的血淋巴由正常時的藍青色轉(zhuǎn)變?yōu)榈S色或者渾濁的乳白色牛奶狀不能凝固的變性體液；肝胰腺明顯糜爛，胃腸道無食物或腸道末端有小段糞便；游泳足色素細胞擴散等（圖1）。

圖1 黃水病的癥狀Fig.1 The symptom of"yellow water disease"

2.2 鋸緣青蟹黃水病的流行病學特征

2.2.1 鋸緣青蟹黃水病發(fā)生的時空分布

由表1和圖2可知，溫州青蟹養(yǎng)殖場發(fā)病初期主要集中在7月，40%的概率；死亡高峰期則在7月底到9月中旬之間，均為33.33%；而發(fā)病末期則在9月下旬后，概率為46.66%。這與現(xiàn)場走訪調(diào)查時青蟹養(yǎng)殖戶所提供的資料相吻合。

圖2 鋸緣青蟹每月各發(fā)病時期的概率趨勢圖Fig.2 The date of disease rate in mud crab

表1 鋸緣青蟹每月各發(fā)病時期的概率Tab.1 The date of mobidity in mud crab

2007－2009年期間，溫州地區(qū)養(yǎng)殖鋸緣青蟹各月的發(fā)病情況變化較大，發(fā)病率最高可達100%，為使發(fā)病率數(shù)據(jù)接近正態(tài)分布，因此對發(fā)病率作反正弦轉(zhuǎn)換。

根據(jù)轉(zhuǎn)換值再作方差分析，了解鋸緣青蟹與季節(jié)的關系，分析見表2。

表2 鋸緣青蟹黃水病發(fā)病率的方差分析Tab．2 Analysis of variance for the disease incidence

由表 2 可知，月份的 F=4．361，P=0．002＜0．01，差異極顯著；年份的 F=0．084，P=0．920＞0．05，差異不顯著。這說明不同的月份對溫州地區(qū)養(yǎng)殖鋸緣青蟹的發(fā)病率有極顯著影響。經(jīng)進一步的多重比較表明，發(fā)病率最高的是9月，其次是6－8月。

2．2．2 鋸緣青蟹黃水病發(fā)生與養(yǎng)殖密度的關系

鋸緣青蟹養(yǎng)殖苗種一般來自本地海捕自然苗，苗規(guī)格一般在1～5 cm之間。黃水病發(fā)生與養(yǎng)殖密度的關系見表3。

表3 單養(yǎng)池塘黃水病發(fā)生與養(yǎng)殖密度的關系Tab．3 Collelation between disease occur and density in mud crab

圖3中雖僅考慮單養(yǎng)密度與發(fā)病總死亡率的關系，但可根據(jù)圖的總體趨勢發(fā)現(xiàn)，隨著養(yǎng)殖密度的增高，總死亡率有明顯增加。

由表4、圖3可知，混養(yǎng)同單養(yǎng)情況相似，隨著養(yǎng)殖密度的增高，總死亡率有明顯增加?；祓B(yǎng)主要為青蟹與蟶子、泥蚶，密度此處以青蟹密度為準。

圖3 單養(yǎng)池塘黃水病死亡率與養(yǎng)殖密度的關系Fig．3 Correlation between mortality of“YWD”and density in mud crab

表4 混養(yǎng)池塘疾病發(fā)生與養(yǎng)殖密度的關系Tab．4 Collelation between disease occur and density of poly－culture in mud crab

2．2．3 鋸緣青蟹黃水病發(fā)生與齡期和大小的關系

由表5、圖4可知，鋸緣青蟹在幼年期(150 g以下)和成年期(150 g以上)發(fā)病的概率相近，分別為0．476和0．524。說明黃水病在鋸緣青蟹整個生長周期內(nèi)均會出現(xiàn)，因此，在青蟹養(yǎng)殖的各個階段要做好防病工作，加強防范意識。

由表6、圖5可知，病蟹規(guī)格在0～50 g和250 g以上時，青蟹黃水病發(fā)病率較高。

圖4 鋸緣青蟹黃水病與齡期的關系Fig．4 Correlation between"yellow water disease"and the age in mud crab

表5 鋸緣青蟹黃水病發(fā)病齡期Tab.5 The age of"yellow water disease"in mud crab

表6 患黃水病的病蟹規(guī)格統(tǒng)計Tab.6 The specification of"yellow water disease"in mud crab

由表7、圖6可知，鋸緣青蟹在放苗半個月、脫殼期、繁殖時期和雌雄差異這4個時期都易患病，防病時需要特殊注意。

表7 特殊時期、特殊個體的發(fā)病情況Tab.7 The morbidity condition of special period and individuals

總共有15個養(yǎng)殖戶填有以上信息。概率=特殊時期、個體的個數(shù)/15。

2.2.4 鋸緣青蟹黃水病發(fā)生的環(huán)境因素

2.2.4.1 鋸緣青蟹黃水病與氣象因子的關系

用SPSS軟件對氣象數(shù)據(jù)作相關性分析，結(jié)果由表8可見，氣溫對鋸緣青蟹發(fā)病率的影響具有顯著作用，降水量對發(fā)病率的影響是高度顯著的，氣壓則無顯著影響。

氣溫對發(fā)病率的作用主要是通過影響水體溫度來實現(xiàn)的，水溫對蟹體的新陳代謝反應速率起著控制作用，它直接影響蟹體的生理機能。而降水通過改變養(yǎng)殖水體溶氧、pH、氨氮、鹽度等水體理化因子而起到影響作用，從相關系數(shù)分析可知，降水量的多少能顯著影響青蟹的發(fā)病，這跟調(diào)查所獲得的情況想一致。青蟹發(fā)病高峰期為農(nóng)歷八月十五期間，正是溫州地區(qū)臺風、暴雨較頻繁時期，降水量變化較大。而此時的溫差變化強烈，從而進一步引起的水體溫差變化，導致青蟹難以適應環(huán)境，抵抗力下降，易染病。

2.2.4.2 其他環(huán)境因子與發(fā)病率的關系

圖5 患黃水病的青蟹規(guī)格與發(fā)病率的關系Fig.5 Correlation between mobidity and the specification of mud crab

圖6 特殊個體發(fā)病情況Fig.6 The morbidity condition of special individuals

表8 發(fā)病率與氣象因子的相關系數(shù)Tab.8 Correlation coefficients between the incidence of diseases and meteorological

由圖7～12可知，青蟹發(fā)病可能因環(huán)境突變而導致青蟹抵抗力下降，影響蟹體的生理機能，導致病原容易侵入蟹體，引起青蟹黃水病的發(fā)生。圖中青蟹兩個發(fā)病高峰期，都出現(xiàn)在當?shù)孛酚旰团_風季節(jié)附近。兩季節(jié)的天氣變化明顯，降水、氣溫日變化較大，導致青蟹水體生活環(huán)境也相應變化。而青蟹發(fā)病往往具有滯后性，環(huán)境變化后不久青蟹才開始陸續(xù)發(fā)病。

圖7 氣溫、水溫與發(fā)病率的關系Fig.7 Correlation between temperature of air,water and mobidity

圖8 鹽度與發(fā)病率的關系Fig.8 Correlation between morbiity and salinity

圖9 溶氧與發(fā)病率的關系Fig.9 Correlation between DO and mobidity

圖10 pH與發(fā)病率的關系Fig.10 Correlation between pH and mobidity

圖11 透明度與發(fā)病率的關系Fig.11 Correlation between diaphaneity and mobidity

圖12 NO2和NH3-N與發(fā)病率的關系Fig.12 Correlation between NH3-N，NO2-N and mobidity

3 討論

3.1 鋸緣青蟹黃水病的病癥特點

本研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)病高峰期間疑似患黃水病的鋸緣青蟹會爬到池塘的斜坡或者灘面上死亡，有些直接死于池塘底部，被同類相食，排水時容易發(fā)現(xiàn)死亡青蟹殘骸，如遇脫殼時期患病，死亡后被同類所食，往往連青蟹殘骸都難發(fā)現(xiàn)，正如調(diào)查時養(yǎng)殖戶所論述，未見發(fā)病及死蟹，產(chǎn)量卻很低。

試驗對疑似患黃水病的青蟹作了外部及解剖觀察，發(fā)現(xiàn)蟹體普遍消瘦，步足基關節(jié)膜發(fā)白，應激性明顯，易自斷足，斷足處有濁白色液體流出；體腔充滿黃色液體，肝胰腺彌散，肌肉肌纖維斷裂，甚至液化，部分病蟹鰓發(fā)黑。

3.2 鋸緣青蟹黃水病發(fā)生的時空分布

根據(jù)走訪調(diào)查青蟹養(yǎng)殖戶，鋸緣青蟹黃水病在溫州各地區(qū)每年均有發(fā)現(xiàn)。每當梅雨季節(jié)和臺風季節(jié)，往往會有大量岸上淡水注入青蟹養(yǎng)殖池塘，甚至還會出現(xiàn)海水倒灌等現(xiàn)象，造成青蟹在這兩個特殊時段發(fā)病尤為嚴重，損失巨大。

鋸緣青蟹黃水病高峰期主要集中在每年的5-6月和8-10月，與韓新全[1]和程巖雄等[2]的報道一致。因該時段正值浙江地區(qū)的梅雨及臺風季節(jié)。晝夜溫差大，降雨多，且時有臺風，造成水體環(huán)境極不穩(wěn)定。

3.3 鋸緣青蟹黃水病的發(fā)生與養(yǎng)殖密度的關系

養(yǎng)殖密度與鋸緣青蟹黃水病的發(fā)生具有很高的相關性，前幾年溫州地區(qū)由于養(yǎng)殖密度很大，死亡率也較高；最近幾年由于養(yǎng)殖密度逐漸減小，黃水病的發(fā)病率也隨之減少。當?shù)仞B(yǎng)殖戶發(fā)現(xiàn)，隨著養(yǎng)殖密度的減少，產(chǎn)量反而相差不大，病害暴發(fā)也較以前減少。

梁廣耀[3]通過試驗也曾提出，蟹苗的放養(yǎng)密度要根據(jù)蟹池、季節(jié)、個體大小和餌料等條件來定。各方面養(yǎng)殖條件較好的，可多放苗；各方面養(yǎng)殖條件較差的，可少放苗。一般每畝放苗400～500只較適宜。放養(yǎng)密度跟發(fā)病死亡有一定的內(nèi)部聯(lián)系。本實驗結(jié)果也證實了這一觀點。

3.4 鋸緣青蟹黃水病的發(fā)生與齡期和大小的關系

試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)患黃水病的青蟹主要在成年期，主要為250 g以上的成蟹。并且以繁殖期、脫殼期為主。雌雄也有較大差異，雌性個體發(fā)病率高于雄性個體，這與相關的文獻描述相類似[4]。同時文中提到甲殼類動物在蛻皮、產(chǎn)卵和交配時尤其容易感染黃水病，宿主往往是在蛻殼或蛻殼不久獲得感染，但這個階段的感染途徑還有待深入研究。

3.5 鋸緣青蟹黃水病的發(fā)生與環(huán)境因子的關系

環(huán)境因子如溫度、鹽度等會影響該黃水病的流行[5]。MESSICK[6]通過一系列實驗發(fā)現(xiàn)，低水溫、鹽度能抑制蘭蟹血淋巴當中血卵渦鞭蟲的增殖，而血卵渦鞭蟲被懷疑為黃水病的病原之一。在水溫高于15℃時蘭蟹感染黃水病病原較嚴重，水溫低于15℃則感染減少。鹽度也是黃水病病原傳播的重要因子之一，疾病均發(fā)生在狹鹽種類中。另外，疾病的流行可能還與潮汐、海流等有關。

試驗發(fā)現(xiàn)鋸緣青蟹黃水病的發(fā)生不僅跟氣溫有關，還與降水量有關，由于降水量的增加，水體中的環(huán)境因子也隨之變化。因此，溫州往往在梅雨季節(jié)和臺風季節(jié)前后，青蟹黃水病高發(fā)。馮振飛等[7]對青蟹發(fā)病與養(yǎng)殖環(huán)境因子的關系進行了分析研究，得出鹽度變化、降雨量對青蟹黃水病的發(fā)生與流行具有顯著影響。該結(jié)論與本文的結(jié)論相一致。

3.6 鋸緣青蟹黃水病的防治建議

目前因未發(fā)現(xiàn)有效治療“黃水病”的相關藥物，因此必須貫徹“以防為主、防治結(jié)合”的方針政策。在分析發(fā)病病原的同時，了解其流行病學相關特征。在易發(fā)病期間我們應該加強巡塘、勤換水，及時發(fā)現(xiàn)患病青蟹并將其與其他青蟹隔離，以免傳染給其他青蟹，發(fā)現(xiàn)死蟹也要及時撈起處理掉。另一方面我們要加強餌料管理，在病發(fā)高峰期盡量投喂新鮮的餌料，加強營養(yǎng)，增強蟹的抵抗力，而且餌料量一定要足，保證青蟹不會因饑餓導致同類相食，從而預防疾病的發(fā)生、蔓延。

在青蟹放苗季節(jié)的選擇上，建議選擇放秋苗。因秋苗生長期避開了黃水病的高峰期，秋苗一般可在該病的高峰期前就能上市出售。

4 本研究的主要結(jié)論與存在的問題

本文對鋸緣青蟹黃水病流行病學做了較深入研究。通過對溫州的樂清、瑞安、龍灣、蒼南等地的10余個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的實地調(diào)查走訪、連續(xù)3年的青蟹養(yǎng)殖病害監(jiān)測以及池塘環(huán)境因子的日常記錄和實驗室檢測，經(jīng)研究認為鋸緣青蟹黃水病的致病因素為季節(jié)、養(yǎng)殖密度、鹽度和降水量的變化。

本文得出的主要如下：

（1）鋸緣青蟹黃水病流行病學特征

調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)，鋸緣青蟹黃水病與降雨有著一定的相關性。該病的暴發(fā)和流行主要集中于5-6月的梅雨季節(jié)和8-10月的臺風季節(jié)。梅雨或者臺風都將會帶來大降水，池塘水質(zhì)鹽度急劇下降，青蟹因環(huán)境突變而導致抵抗力下降，影響蟹體的生理機能，導致病原容易侵入蟹體，引發(fā)黃水病的發(fā)生。同時研究發(fā)現(xiàn)，所檢測的其他水質(zhì)指標與黃水病的相關性較弱，在未來的研究中可增加其他水質(zhì)因子的監(jiān)測。

（2）引發(fā)鋸緣青蟹黃水病的主要因素

根據(jù)鋸緣青蟹黃水病的疾病發(fā)生與時空分布、養(yǎng)殖密度、齡期和大小、環(huán)境因子的關系分析，表明如下結(jié)論：不同的月份對溫州地區(qū)養(yǎng)殖鋸緣青蟹的發(fā)病率有極顯著影響，發(fā)病率最高的是9月份。其次是6-8月；在單養(yǎng)和混養(yǎng)兩種養(yǎng)殖模式下，鋸緣青蟹黃水病發(fā)病率均隨著養(yǎng)殖密度的增高，總死亡率有明顯增加；黃水病在鋸緣青蟹整個生長周期內(nèi)均會出現(xiàn)，最易患病的四個時期分別為放苗后半個月、脫殼期、繁殖時期和雌雄差異，成蟹易患黃水病，雌性個體發(fā)病率高于雄性個體；氣溫、降水量的變化將顯著影響青蟹黃水病的消長。該結(jié)果與歷年青蟹黃水病流行病學調(diào)查與文獻報道的結(jié)果相符。

[1]韓新全.鋸緣青蟹黃水病及并發(fā)病的綜合控制措施[J].科學養(yǎng)魚,2005(8):56.

[2]程巖雄,羅華明,丁秀穎,等.養(yǎng)殖鋸緣青蟹的流行病學調(diào)查研究[J].科學養(yǎng)魚,2007(10):32-33.

[3]梁廣耀.鋸緣青蟹養(yǎng)殖中若干問題的探討[J].海洋技術,1992,11(2):79-82.

[4]FIELD R H,HILLS J M,ATKINSON R J A,et al.Distribution and seasonal prevalence of Hematodinium sp.infection of the Norway lobster(Nephrops norvegicus)around the west coast of Scotland[J].ICES J Mar Sci,1998,55:846-858.

[5]MESSICK G A.Hematodinium perezi infections in adult and juvenile blue crabs Callinectes sapidus from coastal bays of Maryland and Virginia,USA[J].Dis Aquat Org,1994,19:77-82.

[6]許文軍,施 惠,徐廣慶,等.鋸緣青蟹黃水病病原研究及綜合防控初報[J].中國水產(chǎn),2006(8):23-26.

[7]馮振飛,王國良,倪海兒.養(yǎng)殖鋸緣青蟹黃水病流行病學及其預報模型[J].水產(chǎn)科學,2009,28(12):713-716.