王 留 張 代 劉秀玲
(商丘職業(yè)技術(shù)學(xué)院動(dòng)物工程系,河南省商丘市 476000)
多糖是一類具有廣泛生物活性的生物大分子物質(zhì),它存在于一切細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)中,參與生命現(xiàn)象中細(xì)胞的各種活動(dòng),目前已有300多種多糖類化合物從天然產(chǎn)物中分離。大量研究顯示,多糖類物質(zhì)具有免疫調(diào)節(jié)、降血糖、抗氧化、抗病毒、抗腫瘤、抗輻射、抗炎、抗疲勞和抗衰老等多種生物活性。大棗是中醫(yī)臨床常用的一味中藥,中醫(yī)藥理論認(rèn)為,大棗具有補(bǔ)虛益氣、養(yǎng)血安神、健脾胃等功效,在《神農(nóng)本草經(jīng)》中被列為上品[1]。大棗多糖是大棗中重要的生物活性物質(zhì),可作為免疫促進(jìn)劑,參與控制細(xì)胞的分裂和分化,調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)和衰老[2-3]。大棗多糖能有效清除人體內(nèi)的氧自由基,減輕衰老模型小鼠免疫器官的萎縮及腦的老化,這表明大棗多糖是大棗抗衰老的主要活性成分[4-5]。本研究以斷奶仔豬為試驗(yàn)對(duì)象,在斷奶仔豬日糧中添加不同水平的大棗多糖,研究日糧中添加大棗多糖對(duì)斷奶仔豬血液生理生化指標(biāo)及抗氧化能力的影響。
大棗多糖,商丘職業(yè)技術(shù)學(xué)院藥理實(shí)驗(yàn)室自制。參照李宏燕等[6]的方法,以新鄭大棗去核棗粉為原料,用85%的乙醇水浴回流脫脂,離心分離后棗渣用熱水水浴浸提法提取大棗粗多糖,無(wú)水乙醇沉淀粗多糖,氯仿正丁醇脫蛋白,H2O2脫色,沉淀依次用丙酮、乙醚、無(wú)水乙醇洗滌,45℃真空干燥,得大棗多糖??偪寡趸芰Γ═-A O C)、丙二醛(MD A)、超氧化物歧化酶(S O D)檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程有限公司。
試驗(yàn)采用單因子設(shè)計(jì),將健康、個(gè)體體重相近的40頭28日齡杜洛克×長(zhǎng)白×大約克夏三元雜交斷奶仔豬隨機(jī)分為4組,每組10頭,對(duì)照組、試驗(yàn)1組、試驗(yàn)2組、試驗(yàn)3組、試驗(yàn)4組分別在基礎(chǔ)日糧中添加 0、500、1000、1500mg/kg大棗多糖。玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧參照NRC(1998)豬的營(yíng)養(yǎng)需要及我國(guó)斷奶仔豬的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制而成(表1)。準(zhǔn)確稱量大棗多糖,經(jīng)逐級(jí)稀釋添加入基礎(chǔ)日糧即為試驗(yàn)日糧。試驗(yàn)在商丘市某養(yǎng)豬場(chǎng)進(jìn)行,采用高床保育飼養(yǎng)。試驗(yàn)期間試驗(yàn)豬的飼喂、管理和免疫按豬場(chǎng)規(guī)定程序進(jìn)行,采用干粉料日喂3次,自由采食和飲水。
試驗(yàn)期為28天,試驗(yàn)第14天、28天每組隨機(jī)抽取2頭仔豬,前腔靜脈采血10mL,分成2管,其中1管加肝素鈉抗凝,用于血液生理指標(biāo)的測(cè)定,另1管不加抗凝劑,在室溫下靜置2小時(shí),3000轉(zhuǎn)/分鐘離心20分鐘分離血清,-20℃保存,用于血液生化指標(biāo)和抗氧化指標(biāo)的測(cè)定。用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測(cè)定生理指標(biāo)即血液中白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血紅蛋白含量。用日立7020全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定生化指標(biāo)血清總蛋白、白蛋白、球蛋白含量。按試劑盒說(shuō)明書方法測(cè)定及計(jì)算抗氧化指標(biāo)即血清丙二醛、超氧化物歧化酶和總抗氧化能力。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS13.0 統(tǒng)計(jì)處理軟件的One- Way ANOVA 法進(jìn)行方差分析,用Duncan,s 法進(jìn)行多重比較,試驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。
表2為大棗多糖對(duì)斷奶仔豬血液生理、生化和抗氧化指標(biāo)的影響。從表中可以看出,試驗(yàn)第14天大棗多糖對(duì)斷奶仔豬血液生理、生化和抗氧化指標(biāo)均無(wú)影響(P>0.05);試驗(yàn)第28天,斷奶仔豬血液中紅細(xì)胞數(shù)、白細(xì)胞數(shù)和血紅蛋白、總白蛋白、白蛋白、超氧化物歧化酶、總抗氧化能力的含量隨大棗多糖的添加量的增加而增加(P<0.05),丙二醛的含量隨大棗多糖的添加量的增加而降低(P<0.05)。
表1 基礎(chǔ)日糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平 (%)
血細(xì)胞是血液的主要成分,其中紅細(xì)胞是血液運(yùn)送氧氣和二氧化碳的主要媒介,同時(shí)還具有重要的免疫功能。紅細(xì)胞能夠識(shí)別抗原,識(shí)別自我和非自我,清除體內(nèi)免疫復(fù)合物,增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬功能,抗原提呈,發(fā)揮效應(yīng)細(xì)胞樣作用[7]。白細(xì)胞具有參與細(xì)胞免疫、吞噬、產(chǎn)生抗體、傳遞免疫信息等重要功能,是機(jī)體抵御病原微生物等異物入侵的主要防線,白細(xì)胞數(shù)量直接反映機(jī)體的免疫狀態(tài),當(dāng)機(jī)體發(fā)生炎癥或其他疾病時(shí),白細(xì)胞數(shù)量及其比例都會(huì)發(fā)生變化[8]。諸多研究報(bào)道在斷奶仔豬飼料中添加功能性多糖能明顯改善斷奶仔豬血液生理狀態(tài),提高仔豬的生產(chǎn)性能和抗病能力。本試驗(yàn)結(jié)果表明,日糧中添加1500mg/kg的大棗多糖能夠提高斷奶仔豬血液中紅細(xì)胞數(shù)、白細(xì)胞數(shù)和血紅蛋白含量,與劉自逵等[9](2009)、張飛等[10](2011) 報(bào)道一致。
血清總蛋白主要由白蛋白和球蛋白組成,白蛋白由肝臟合成,用于組織修補(bǔ)和能量供給;血清球蛋白由漿細(xì)胞分泌形成,反映機(jī)體的抵抗力。血清總蛋白、白蛋白、球蛋白這三個(gè)指標(biāo)是動(dòng)物發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)的標(biāo)志之一,在應(yīng)激情況下,上述三個(gè)指標(biāo)均顯著下降。本試驗(yàn)結(jié)果表明,日糧中添加1500mg/kg的大棗多糖能夠提高斷奶仔豬血液中血清總蛋白、白蛋白、球蛋白含量,增強(qiáng)機(jī)體的抗應(yīng)激能力,與劉自逵等[9](2009)、彭慧珍等[11](2006) 報(bào)道一致。
丙二醛是脂質(zhì)過(guò)氧化的終末代謝產(chǎn)物,其含量反映氧自由基介導(dǎo)的脂質(zhì)過(guò)氧化程度;超氧化物歧化酶是機(jī)體內(nèi)抗氧化的重要酶類;血清總抗氧化能力的含量能全面地反映動(dòng)物機(jī)體的抗氧化狀態(tài)。大量試驗(yàn)研究顯示,多糖能夠增加動(dòng)物體內(nèi)超氧化物歧化酶和總抗氧化能力的含量,降低丙二醛含量,清除動(dòng)物體內(nèi)的自由基,提高動(dòng)物的抗氧化能力。本試驗(yàn)結(jié)果表明,日糧中添加1500mg/kg的大棗多糖能夠提高斷奶仔豬血液中超氧化物歧化酶和總抗氧化能力的含量,降低丙二醛含量,與薛凌峰等[12](2009)、李學(xué)軍等[13](2010)報(bào)道一致。
在斷奶仔豬日糧中添加1000~1500mg/kg大棗多糖能夠顯著提高斷奶仔豬血液中紅細(xì)胞數(shù)、白細(xì)胞數(shù),提高血紅蛋白、血清總蛋白、白蛋白、球蛋白、超氧化物歧化酶和總抗氧化能力的含量,降低丙二醛含量,從而改善斷奶仔豬血液生理狀態(tài),提高仔豬抗病能力和抗氧化能力。
[1]樊君,呂磊,尚紅偉,等.大棗的研究與開(kāi)發(fā)進(jìn)展.食品科學(xué),2003,24(4):161-163.
[2]劉成梅,游海.天然產(chǎn)物有效成分的分離與應(yīng)用.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2003:30.
[3]李雪華,尤盛京.大棗多糖的提取與抗活性氧研究.廣西科學(xué),2000,7(1):54.
[4]苗明三,盛家河.大棗多糖對(duì)衰老模型小鼠、脾臟和腦組織影響的形態(tài)計(jì)量學(xué)觀察.中藥藥理與臨床,2001,17(5):18-19.
[5]張慶,雷宇生,孫莉莎,等.大棗多糖對(duì)體外小鼠腹腔巨噬細(xì)胞功能的影響.中藥藥理與臨床,1999,15(3):21-23.
[6]李宏燕,樊君.大棗多糖的提取分離及純化研究.寧夏工程技術(shù),2006,5(2):145-147.
[7]李宏權(quán),劉迎春,宋建德,等.動(dòng)物的紅細(xì)胞免疫功能研究概述.山西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2002,22(3):269-273.
[8]李佩國(guó),薛瑞晨.動(dòng)物生理學(xué)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)科技出版社,2000:26-28.
[9]劉自逵,陳小軍,屠迪,等.復(fù)方黃芪多糖注射液對(duì)仔豬血液生理生化指標(biāo)的影響.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào) (自然科學(xué)版),2009,35(5):514-516.
[10]張飛,許靜波,牟藤,等.黃芪多糖對(duì)早期斷奶仔豬血液生理指標(biāo)及生長(zhǎng)性能的影響.飼料工業(yè),2011,32(13):16-18.
[11]彭慧珍,李麗立,張彬,等.白術(shù)粗多糖對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能及血液生化指標(biāo)的影響.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào) (自然科學(xué)版),2006,32(6):648-651.
[12]薛凌峰,李同洲,臧素敏,等.香菇多糖對(duì)仔豬生產(chǎn)性能、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率及抗氧化能力的影響.畜牧與獸醫(yī),2009,41(6):5-9.
[13]李學(xué)軍,朱良.茶籽多糖對(duì)生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)性能及抗氧化能力的影響.廣東飼料,2010,19(7):17-18.