張俊峰 許現(xiàn)偉
近幾年在臨床上抗菌藥物得到了廣泛的應(yīng)用,然而隨著應(yīng)用率的增加,使得細(xì)菌耐藥性也逐漸增強(qiáng),給臨床治療和醫(yī)院感染的控制菌構(gòu)成了嚴(yán)重威脅。目前在臨床上腸桿菌屬于常見耐藥菌,為抗感染治療中的重點[1]。本次研究中出于對腸桿菌科細(xì)菌ESBLs和AmpC酶檢測結(jié)果與耐藥性情況進(jìn)行分析探討的目的,對我院收集的236株菌株展開了ESBLs和AmpC酶檢測實驗和藥敏實驗,現(xiàn)匯報實驗結(jié)果如下。
1.1 一般資料 資料來源于我院患者標(biāo)本培養(yǎng)的腸桿菌,抽取236株作為研究對象,包括大腸埃希菌85株,克雷伯菌67株,沙雷菌屬26株,檸檬酸桿屬18株,耶爾森菌屬14株,變形菌屬9株,其他17株。
1.2 方法
1.2.1 研究方法 對以上統(tǒng)計菌株分別采取用雙紙片氯唑西林增效試驗和雙紙片確診試驗對AmpC酶與ESBLs表型進(jìn)行檢測,統(tǒng)計檢出率,而后展開藥敏試驗,對比分析產(chǎn)酶均與非產(chǎn)酶菌的實驗結(jié)果。
1.2.2 檢測方法 ESBLs檢測:采取雙紙片確診試驗進(jìn)行檢測,即紙片擴(kuò)散法進(jìn)行表型篩選,經(jīng)確證實驗進(jìn)行檢測,在篩選時頭孢他啶抑菌環(huán)直徑≤22 mm,頭孢噻肟抑菌環(huán)直徑≤27 mm,則表明菌株可能產(chǎn)ESBLs,在確證實驗時,在上述藥物中加入克拉維酸后同沒有加克拉維酸抑菌環(huán)進(jìn)行比較,增加值在5 mm或以上者證實為產(chǎn)ESBLs。
AmpC酶檢測:采取雙紙片氯唑西林增效試驗進(jìn)行檢測,即紙片擴(kuò)散法進(jìn)行表型篩選,而后經(jīng)改良Hodge試驗進(jìn)行確證。篩選時紙片擴(kuò)散法頭孢西丁抑菌圈直徑不超過18 mm者可能產(chǎn)AmpC酶,確證試驗時頭孢西丁抑菌圈變化值在2 mm以上者證實產(chǎn)AmpC酶[2]。
1.2.3 藥敏試驗 藥敏試驗采取紙片擴(kuò)散法,對臨床常用抗生素的耐藥性進(jìn)行測定,質(zhì)控菌為大腸埃希菌ATCC25922和銅綠假單胞菌ATCC27853。
1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 研究中所得到的相關(guān)數(shù)據(jù)采用SPSS 14.0統(tǒng)計學(xué)數(shù)據(jù)處理軟件進(jìn)行處理分析,針對計數(shù)資料和組間對比分別進(jìn)行t檢驗和χ2檢驗,在P<0.05時,視為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
2.1 ESBLs和AmpC酶檢測結(jié)果 經(jīng)統(tǒng)計,本組236株菌株中檢出AmpC酶菌102株,檢出率為43.22%;檢出ESBLs菌120株,檢出率為 50.85%。其中單產(chǎn) AmpC酶菌 92株(38.98%),單產(chǎn) ESBLs菌110株(46.61%),產(chǎn) AmpC酶和ESBLs菌 10株(4.24%),不產(chǎn) AmpC酶、ESBLs均 24株(10.17%)。
2.2 藥敏試驗 單產(chǎn)AmpC酶菌、單產(chǎn)ESBLs菌以及產(chǎn)AmpC酶+ESBLs菌對氨曲南、氨芐西林、阿米卡星以及頭孢噻肟的耐藥率較非產(chǎn)AmpC酶菌高(P<0.05),所有腸桿菌對青霉素均有較強(qiáng)耐藥性(P>0.05)。詳見表1。
表1 不同菌株藥敏試驗結(jié)果比較(例,%)
ESBLs為質(zhì)粒介導(dǎo)的,可以對青霉素類、頭孢菌素類及單環(huán)內(nèi)酰胺類抗生素產(chǎn)生水解作用的一種β-內(nèi)酰胺酶,其能夠在菌株間轉(zhuǎn)移以及傳播。AmpC酶則是由腸桿菌、不動桿菌、銅綠假單胞菌等一些革蘭陰性桿菌所產(chǎn)生的一種β-內(nèi)酰胺酶,且可以對第三代頭孢菌素、單環(huán)類以及頭霉素類等β-內(nèi)酰胺類抗生素產(chǎn)生顯著的耐藥性,其底物譜較ESBLs更寬,并且對酶抑制劑不敏感[3]。臨床研究證實產(chǎn)生酶的菌株一般在病情重、住院時間長以及一些惡性腫瘤患者中比較多見,并且在經(jīng)常使用免疫抑制劑或者是免疫缺陷者中的檢出率也較高。目前在臨床上腸桿菌為常見的一種耐藥菌,本次研究中出于對其耐藥性原因進(jìn)行探討的目的,對236株菌株展開了AmpC酶與ESBLs表型檢測,并對比分析了不同菌株的藥敏試驗結(jié)果,最終發(fā)現(xiàn),本組AmpC酶檢出率為43.22%,ESBLs檢出率為50.85%,且單產(chǎn)AmpC酶菌、單產(chǎn)ESBLs菌以及產(chǎn)AmpC酶+ESBLs菌對氨曲南、氨芐西林、阿米卡星以及頭孢噻肟的耐藥率較非產(chǎn)AmpC酶菌高。由此可知導(dǎo)致腸桿菌產(chǎn)生耐藥性的主要因素為產(chǎn)AmpC酶與ESBLs,因此在今后的臨床用藥治療過程中,應(yīng)對其給予關(guān)注,合理使用抗生素,以提高治療效果,降低耐藥率。
[1] 嚴(yán)子禾.雙紙片氯唑西林增效試驗檢測高產(chǎn)AmpC酶的大腸埃希菌和克雷伯菌.臨床檢驗雜志,2008,26(06):450.
[2] 周志慧.兩種檢測陰溝腸桿菌AmpC酶方法的比較.中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2012,25(05):88-90.
[3] 羅蘭.腸桿菌科菌持續(xù)產(chǎn)AmpC酶的檢出及耐藥分析.臨床檢驗雜志,2010,22(01):41-42.