李 波，張榮平，李進濤，何保麗，鄭 紅，王利梅，角建林,*

1. 昆明醫(yī)科大學(xué) 實驗動物學(xué)部，云南 昆明 650031；

2. 揚州大學(xué) 獸醫(yī)學(xué)院，江蘇 揚州 225009

解剖數(shù)據(jù)作為實驗動物主要的生物學(xué)特性，是直接描述動物體征的主要數(shù)據(jù)群。靈長類近親樹鼩(tree shrew, Tupaia belangeri) 為單系起源的攀鼩目(Peng et al, 1991；Nie et al, 2008；Dong et al, 2012；Xu et al, 2013)，由于其特殊的生物學(xué)特性，已被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)和生物學(xué)研究，WHO也曾建議用樹鼩代替瀕危的非人靈長類動物進行科學(xué)實驗 (Peng et al, 1991)。近年來，樹鼩實驗室規(guī)?；Z養(yǎng)繁殖的成功 (Jiang et al, 2011；Jiao et al, 2009； Shen et al,2011)加快了其實驗動物化的進程。本研究對實驗室馴養(yǎng)樹鼩的解剖學(xué)數(shù)據(jù)進行了全面測定與分析，為樹鼩實驗動物化提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料和方法

1.1 動物來源

實驗室馴養(yǎng)7～9月齡樹鼩70只，雌、雄各半，由昆明醫(yī)科大學(xué)實驗動物學(xué)部提供。實驗動物使用符合國家和學(xué)校動物倫理委員會規(guī)定并遵守國際慣例。

1.2 儀器、試劑及測定方法

解剖前，動物禁食不禁水12 h，稱重 (體重計購自上海精密科學(xué)儀器有限公司，YP2001N)后，腹腔注射戊巴比妥鈉鹽 35 mg/kg(北京鼎國昌盛生物技術(shù)有限責任公司，批號：20120812)，麻醉后心臟采血、處死。實驗參照《嚙齒類實驗動物生物學(xué)特性數(shù)據(jù)測定技術(shù)規(guī)程》(He et al, 2006) 相關(guān)要求進行。獲取體尺(軟尺測量)及骨骼等解剖數(shù)據(jù)后依次采集腹腔、胸腔及腦等器官。采集臟器時需將周圍脂肪及結(jié)締組織除盡，濾紙吸干表面的血液和體液，腔性器官需在去除腔內(nèi)液體和內(nèi)容物后迅速稱重 (梅特勒—托利多AL204-IC電子天平)。臟器系數(shù)=臟器重量／體重×100%。 剖取從胃幽門處至肛門處的所有腸段，置于盛有生理鹽水的平皿中并在硫酸紙上展開，分別測量十二指腸、空腸、回腸、盲腸、結(jié)腸及直腸等的長度。多個腸道需同時測量并由一人操作整個過程，避免由人為過度展開或展開不充分而造成測量數(shù)據(jù)不準確。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS11.5軟件包進行分析。正態(tài)計量資料采用t-test，非正態(tài)用秩和檢驗。

2 結(jié)果

2.1 解剖數(shù)據(jù)

樹鼩有7個頸椎、13個胸椎、6個腰椎、3個骶椎、24～27個尾椎及6個乳頭。雌、雄個體體長、尾長、尾/體比、胸寬、左后肢長以及盲腸和直腸長無顯著性差異 (P＞0.05)；體高、右耳寬、回腸及結(jié)腸長差異顯著 (P＜0.05)；體斜長、胸深、軀干長、左前肢長、右前肢長、右后肢長、左耳長、右耳長、左耳寬、龍骨長、左脛長、右脛長、十二指腸及空腸長等差異極顯著 (P＜0.01)(表1，圖1)。

表1 樹鼩雌、雄個體解剖數(shù)據(jù)測量結(jié)果Table 1 Measurement of anatomical parameters in tree shrew

圖1 樹鼩雌、雄個體腸道長度比較Figure 1 Comparison of intestinal canal length (comparison between males and females, *: P＜0.05; **:P＜0.01)

2.2 體尺指標的相關(guān)與回歸分析

部分樹鼩體尺數(shù)據(jù)的相關(guān)分析見表 2。以體長為因變量，部分體尺指標 (尾長、軀干長、左前肢長、右前肢長、左后肢長及右后肢長等)為自變量，作逐步回歸分析，回歸方程為：體長=13.90+尾長×0.16。

表2 部分樹鼩體尺指標的Pearson相關(guān)分析Table 2 Pearson correlation of body size in tree shrew

2.3 臟器及其系數(shù)測定

7～9月齡樹鼩雌、雄個體體重差異極顯著 (P＜0.01)；心、肺、膀胱及右海馬重量及系數(shù)差異極顯著 (P＜0.01)；右腎、左海馬、左頜下腺、左右甲狀腺重量差異極顯著(P＜0.01)，系數(shù)差異顯著(P＜0.05)；小腸及左腎上腺重量差異顯著(P＜0.05)，系數(shù)差異極顯著 (P＜0.01)；脾及左腎重量差異極顯著 (P＜0.01)，但系數(shù)無差異；右頜下腺重量差異顯著(P＜0.05)，但系數(shù)無差異；胃、大腸及腦重量無差異，系數(shù)差異極顯著 (P＜0.01)；右腎上腺重量無差異，系數(shù)差異顯著(P＜0.05)。

2.4 主要臟器指標的相關(guān)與回歸分析

樹鼩主要臟器測定數(shù)據(jù)的相關(guān)分析見表 4。以體重為因變量，主要臟器指標(心、肺、肝、脾、左右腎及腦等)為自變量，作逐步回歸分析，回歸方程為：體重=62.73+左腎×79.21+心臟×24.09。

3 討論

解剖數(shù)據(jù)是藥物安全性評價實驗及病原微生物感染的檢測指標，可以客觀反映實驗動物生長發(fā)育程度、病變程度和功能狀態(tài)等 (Sun et al, 2009)，對其種屬標準化鑒定亦有一定意義 (Ye et al,2011)。本研究豐富了中緬樹鼩的解剖數(shù)據(jù)，為其實驗動物化提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。結(jié)果顯示7～9月齡樹鼩的絕大部分體尺、臟器及系數(shù)指標因性別不同而存在顯著或極顯著性差異，與Ye et al (2011)報道的野生成年樹鼩結(jié)果基本一致。因此，若無特殊情況，在實驗中應(yīng)選擇雌、雄個體各半，并分別對其進行統(tǒng)計分析和比較，研究結(jié)果與Peng et al(1991)報道的解剖數(shù)據(jù)比較，絕大部分相近（如體長、尾長、耳長、脾臟重、腎臟重、腦重、腎上腺重、卵巢重及睪丸臟器系數(shù)等）。差異較大的是腦垂體重量，由于腦垂體體積較小，故該差異可能是由稱量儀器與取材不同所導(dǎo)致。

小型哺乳動物的消化道長度和重量與其食性和食物質(zhì)量密切相關(guān) (Gross et al, 1985; Korn, 1992;Derting & Bogue, 1993)。小腸是食物消化和營養(yǎng)吸收的主要部位，在能量消耗增加或食物質(zhì)量降低時，樹鼩小腸長度及重量的增加可獲得更多的能量以滿足生存需要 (Cai et al, 2010)。本研究結(jié)果顯示雌、雄個體的小腸各腸段均存在差異 (P＜0.05)，雌性小腸重量顯著高于雄性 (P＜0.05)。因此，在實驗室條件下，雌、雄個體對食物的消化和吸收能力是否存在差異仍有待進一步研究。

本研究結(jié)果顯示雌、雄個體腦重量差異不顯著(P＞0.05)，系數(shù)差異顯著 (P＜0.05)，體重差異極顯著 (P＜0.01)，與Ye et al (2011)的結(jié)果相反，這可能與個體發(fā)育階段及生活環(huán)境相關(guān)。野生樹鼩的確切年齡較難掌握，且其機體受季節(jié)及營養(yǎng)狀況的影響較大 (Cao, 1989；Jiao et al, 2011; Li et al, 1994； Li et al , 2011)。實驗動物隨年齡的增長，其腦、心、肺、脾及腎等主要臟器系數(shù)都呈下降趨勢 (Sun et al,2009)。提示若能開展多年齡段或采用動態(tài)觀測方法檢測樹鼩臟器重量及生長發(fā)育情況，將更有助于建立其基礎(chǔ)生物學(xué)數(shù)據(jù)。

在臟器及其系數(shù)的測定分析中，與國內(nèi)近年較少的研究結(jié)果相比 (He et al, 2008；Ye et al, 2011)，個體心臟、肝臟、肺臟、胰腺、腦及腸等均存在差異。其中，雌、雄個體心臟重量與系數(shù)差異極顯著(P＜0.01)，這與野生成年個體情況一致 (Ye et al,2011)，但重量較輕，而肝臟重量小，胰腺重量大，且其重量與系數(shù)差異均不顯著(P＞0.05)。以上結(jié)果的差異可能由多方面原因?qū)е拢?1)研究對象、飼養(yǎng)環(huán)境及飼養(yǎng)條件等客觀條件不同，本研究采用 7～9月齡樹鼩，與前期工作選用個體的年齡存在差異，且所選樹鼩主要在實驗室條件下以顆粒飼料喂養(yǎng)，與前期馴養(yǎng)及野外條件存在根本的不同；(2)個體的處死及測定方法不同，動物致死時，心臟及肝臟等器官內(nèi)血液的充盈程度將直接影響其重量，因此，采集內(nèi)臟器官應(yīng)在采血后，且不同的采血部位也會影響臟器重量，本研究麻醉后心臟采血5～8 mL的致死方法可能也是導(dǎo)致差異的原因之一；(3)結(jié)締組織及血管等分離情況不同；(4)研究對象不同的生長發(fā)育階段導(dǎo)致能量代謝及積蓄不同；(5)樣本量不同，Ye et al (2011)使用雄性25只，雌性35只，He et al (2008)使用雄性12只、雌性15只，而本研究使用雄、雌性各35只。

表3 樹鼩雌、雄個體部分臟器測定結(jié)果 (mean±SD)Table 3 Measurement of body and organ weight and coefficient in tree shrews

近年來，樹鼩作為人類疾病動物模型有了新的發(fā)展。由于種系、性別、年齡、體重及飼養(yǎng)條件等因素影響，進一步完善實驗室馴養(yǎng)樹鼩的生物學(xué)數(shù)據(jù) (體尺、臟器重量、血液生理及血液生化等基礎(chǔ)指標)，對其實驗動物化研究及應(yīng)用具有重要意義。

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