宮鋒巖 孫庶麗 劉勤曉

酶免四項再檢標(biāo)本檢測結(jié)果分析

宮鋒巖 孫庶麗 劉勤曉

目的 對HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP酶免四項中再檢標(biāo)本檢測結(jié)果進(jìn)行追溯,分析造成再檢的原因, 為是否對單試劑陽性獻(xiàn)血者進(jìn)行永久屏蔽提供參考依據(jù)。方法 追溯分析2010年1月1日~2012年12月31日本站無償獻(xiàn)血者酶免四項再檢標(biāo)本2329例, 用原試劑進(jìn)行雙孔再檢的情況。結(jié)果 再檢標(biāo)本66.98%為陰性, 陽性符合性僅為33.02%。陽性獻(xiàn)血者中除抗-TP主要為雙試劑陽性報廢外, 其他3項均以單試劑陽性報廢為主, 尤其是抗-HIV, 單試劑陽性報廢占87.10%。結(jié)論單試劑陽性獻(xiàn)血者永久屏蔽會造成一定比例合格獻(xiàn)血者的流失。建議對單試劑陽性獻(xiàn)血者實行暫時屏蔽, 并定期追蹤復(fù)查, 復(fù)查陰性者可解除屏蔽, 復(fù)查陽性者再進(jìn)行永久屏蔽較為合理。

酶免四項；再檢；屏蔽

酶免四項再檢標(biāo)本指獻(xiàn)血者標(biāo)本在初檢、復(fù)檢兩次檢測中, HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP四項中1項或1項以上單試劑陽性或處于灰區(qū)或雙試劑處于灰區(qū)的標(biāo)本, 經(jīng)用原試劑雙孔復(fù)試后, 再檢陽性獻(xiàn)血者屏蔽, 以后不能獻(xiàn)血。本文對威海市中心血站2010年1月1日~2012年12月31日所有酶免四項再檢標(biāo)本檢測結(jié)果進(jìn)行追溯, 分析造成再檢的原因, 為是否對弱陽性獻(xiàn)血者進(jìn)行永久屏蔽提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2010年1月1日~2012年12月31日本站所有酶免四項再檢標(biāo)本2329例, 其中HBsAg 803例；抗-HCV 720例；抗-HIV 277例；抗-TP 529例。

1.2 試劑與設(shè)備 HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP初復(fù)檢試劑均為中國藥品生物制品檢定所批批檢檢定合格的兩種不同廠家的國產(chǎn)試劑, 且均處于效期內(nèi)；RSP-150加樣系統(tǒng)(瑞士)；FAME24/20后處理(瑞士)。

1.3 方法 采用兩種不同廠家的酶免試劑對獻(xiàn)血者標(biāo)本進(jìn)行HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP的檢測, 四項中1項或1項以上單試劑陽性或處于灰區(qū)或雙試劑處于灰區(qū)的標(biāo)本, 經(jīng)用原試劑雙孔復(fù)試后, 雙孔均陰為陰性, 雙孔均陽或一陰一陽為陽性, 仍處于灰區(qū)按陽性計算, 再檢陽性獻(xiàn)血者屏蔽, 以后不能獻(xiàn)血。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 使用PASW18.0統(tǒng)計分析軟件, 采用χ2檢驗, P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2329例再檢標(biāo)本中1560例為陰性, 占66.98%, 769例為陽性, 僅占33.02%, 表明初次檢測陽性的2329例標(biāo)本中, 66.98%并非真正的陽性, 而是操作污染所致。見表1。

表1 2010~2012年酶免四項再檢陽性統(tǒng)計［n(%)］

表2 2010~2012年酶免四項陽性統(tǒng)計［n(%)］

2.2 2010~2012年酶免檢測陽性淘汰1544人中, 雙試劑陽性775人, 占50.19%, 單試劑陽性769人, 占49.81%, 表明本站所用兩家試劑檢測符合性不高, 尤其是抗-HIV試劑, 雙試劑陽性僅占12.9%。見表2。

3 討論

為保障血液安全, 相關(guān)法規(guī)要求血液檢測必須使用2種不同的試劑檢測2遍［1］, 目的是為了2種試劑互補, 提高真陽性標(biāo)本的檢測能力。只有2遍檢測結(jié)果均合格, 血液才能發(fā)放使用［2］。否則, 血液報廢, 該獻(xiàn)血者屏蔽。

本試驗所有陽性報廢中除抗-TP主要為雙試劑陽性報廢外, 其他3項均以單試劑陽性報廢為主, 尤以抗-HIV更為明顯。抗-HIV陽性標(biāo)本中, 雙試劑陽性僅為16份, 108份為單試劑陽性, 通過CDC的確認(rèn)結(jié)果看, 8份確認(rèn)陽性均為雙試劑強陽性標(biāo)本, 108份單試劑陽性均為假陽性, 與實行兩遍檢測的初衷不符,與文獻(xiàn)報道一致［3］。說明近幾年, 大家普遍把注意力集中在窗口期問題上, 試劑廠家想方設(shè)法提高試劑靈敏度來減少漏檢, 往往忽視了假陽性的淘汰問題［4,5］,造成一定比例獻(xiàn)血者的流失。原因是靈敏度高的ELISA試劑假陽性就多, 靈敏度與特異性成反比［6］。

再檢標(biāo)本中66.98%為陰性, 陽性符合性僅為33.02%, 表明初次檢測陽性的2329例標(biāo)本中, 66.98%并非真正的陽性,其初試有反應(yīng)性可能由于假反應(yīng)性或技術(shù)誤差導(dǎo)致, 檢測結(jié)論為無反應(yīng)性, 血液可放行供臨床使用［2］。產(chǎn)生的原因包括以下幾方面：①檢測人員的責(zé)任心不強或技術(shù)不夠熟練, 對標(biāo)本離心不徹底、標(biāo)本溶血、加樣過程吸入紅細(xì)胞、孵育時間和溫度掌握不準(zhǔn)確、洗滌針頭堵塞、洗板位設(shè)置不合理、讀板光路老化等均可導(dǎo)致檢測結(jié)果錯誤［7］。②儀器設(shè)備的使用維護(hù)不到位, 加樣針密封塞漏氣、設(shè)備未按檢定周期進(jìn)行校準(zhǔn)檢定、設(shè)備管路未定期清洗出現(xiàn)霉變等直接影響檢測結(jié)果。③實驗室質(zhì)量管理不規(guī)范, 室內(nèi)質(zhì)量控制措施有效性差。建議采取以下措施來減少假陽性：①加大實驗室人員的培訓(xùn)與考核力度, 使其具備高度的責(zé)任心和熟練的操作技能, 對檢驗工作的重要性有充分的認(rèn)識, 針對日常工作中出現(xiàn)的問題能主動分析, 及時采取糾正及預(yù)防措施。②建立詳盡規(guī)范的SOP, 并保證被嚴(yán)格執(zhí)行。③加強實驗室管理, 從檢測試劑的選擇、設(shè)備的定期維護(hù)校準(zhǔn)、環(huán)境溫濕度的控制等細(xì)節(jié)入手, 盡量減少試劑、設(shè)備、環(huán)境因素對酶免檢測結(jié)果的影響。

當(dāng)前, 臨床供血壓力日益增大, 如何在保證血液質(zhì)量安全的前提下, 盡可能地保留獻(xiàn)血者尤為重要［8］。針對假陽性問題, 如何制定符合我國國情的假陽性獻(xiàn)血者歸隊策略受到諸多學(xué)者的關(guān)注［9,10］。通過此次調(diào)查分析, 建議對單試劑初試有反應(yīng)性標(biāo)本進(jìn)行再次核查, 再次核查仍為有反應(yīng)性可實行暫時屏蔽, 并定期進(jìn)行追蹤復(fù)查［11］, 復(fù)查陰性者解除屏蔽,并召回獻(xiàn)血者, 復(fù)查陽性者再考慮永久屏蔽, 并給獻(xiàn)血者以合理的解釋。

［1］ 全血及成分血質(zhì)量要求.中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB18469-2012.中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局.

［2］ 中華人民共和國衛(wèi)生部.血站技術(shù)操作規(guī)程.衛(wèi)醫(yī)政發(fā)［2012］1號附件.

［3］ 吳亞玲,祝宏,勵曉濤,等.獻(xiàn)血者抗-HCV陽性標(biāo)本中RIRA確認(rèn)情況的研究.中國輸血雜志, 2010,23(11):941.

［4］ 吳為民,季陽,王迅,等.全國血站系統(tǒng)檢驗室室間質(zhì)控調(diào)查分析.中國輸血雜志, 2000,13(4):205-208.

［5］ 鄭嵐,王迅,許莉萍,等.全國采供血機構(gòu)五項傳染病標(biāo)志物檢測室間質(zhì)量評價.臨床輸血與檢驗, 2005,7(1):69-71.

［6］ 趙江燕,毛焱,桑葉,等.兩步法及中和試驗在HBsAg檢測中的應(yīng)用.臨床輸血與檢驗, 2004,6(3):199-200.

［7］ 張德志.關(guān)于ELISA檢測影響因素分析.中外醫(yī)學(xué)研究, 2010, 8(4):53.

［8］ 劉宇寧,蔡菊英,劉曉音.血液篩查HBsAg、抗-HCV假陽性獻(xiàn)血者歸隊的調(diào)查分析.中國輸血雜志, 2012,25(3):261.

［9］ 郭永建,姚鳳蘭,林授,等.HIV-1和HCV核酸檢測、血液處置和獻(xiàn)血者屏蔽與歸隊指引(上).中國輸血雜志, 2011, 24(1): 79-84.

［10］ 葛紅衛(wèi),林授,汪德海,等.HIV-1和HCV核酸檢測、血液處置和獻(xiàn)血者屏蔽與歸隊指引(下).中國輸血雜志, 2011, 24(2): 172-176.

［11］ 王迅,賈堯,伍曉菲,等.血液肝炎病毒篩查試驗結(jié)果的分析.微生物與感染, 2006,3(3):143-146.

Enzyme analysis of results in detection of four further specimens

GONG Feng-yan, SUN Shu-li, LIU Qin-xiao. Department of Laboratory Central Blood Bank of Weihai City, Weihai 264200, China

Objective To analyze the reasons for check again in the four specimens detection of HBsAg, anti-HCV, anti-TP, in order to provide a reference for whether to shield permanently for single reagent positive blood donors.Methods Retrospective analysis on report from January 1,2010 to December 31, 2012 enzymes from blood donors specimens of four further 2,329 cases, double again with the original reagent test.Results Found a specimen of 66.98% was negative, positive compliance was only 33.02%.Anti-TP-positive blood donors in addition to the main positive for double reagent scrap outside while the other 3 were dominated by single reagent positive scrap, especially anti--HIV, single reagent positive scrap accounted for 87.1%.Conclusion Single reagent positive conclusion permanent screening of blood donors will result in loss of certain percentage of eligible blood donors.Recommended for single reagent temporarily-positive blood donors screened, and regular follow-up review, review the negative can be lifted by shielding, review positive and permanent masking more reasonable.

Enzyme four； Check again；Shield

264200 山東省威海市中心血站檢驗科(宮鋒巖)，質(zhì)管科(孫庶麗)；威海市口腔醫(yī)院麻醉科(劉勤曉)