莊華章 陳永杰

（廣東醫(yī)學院附屬觀瀾醫(yī)院肛腸外科 廣東深圳 518110）

D－二聚體是纖維蛋白單體活化因子交聯(lián)后，再經纖維酶水解作用所產生的一種特殊降解產物，為纖維蛋白降解產物中的最小片段，其水平升高能特異性反映繼發(fā)性纖溶活性的增強［1，2］，研究表明D－二聚體水平在肺癌、肝癌、前列腺癌、結直腸癌等多種實體腫瘤患者中也會明顯升高［2］。PAI－1屬于絲氨酸蛋白酶抑制劑（SERPINE）超家族之一。目前有研究表明PAI－1的過表達與癌細胞的侵襲和轉移有著明顯的正相關性［3］。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年9月至2013年9月年于觀瀾醫(yī)院肛腸外科住院部的結直腸癌患者74例，年齡跨度42～77歲，中位年齡61歲，男44例，女30例。同時選擇37例良性病患者作為對照組，年齡跨度19～62歲，中位年齡38歲；男26例，女11例。

納入標準：所有參與實驗的患者均要求年齡在18歲以上，結直腸癌患者經組織病理學檢查確診。

排除標準：患有嚴重外傷或大手術4周內者；伴潰瘍性疾病者；骨組織損傷者；嚴重心血管或外周血管病變者；糖尿病、慢性阻塞性肺部疾病、肝腎疾病和免疫系統(tǒng)疾病等具有凝血功能障礙患者，近期服用抗凝藥物者。

1.2 結直腸癌分期 分期方案為Dukes分期方案。所有結直腸癌患者均根據(jù)各項術前檢查及術后病理結果進行分期，分為DukesAB期間和DukesCD個兩組，本實驗組患者AB期42例，CD期32例。

1.3 血清D－二聚體和PAI－1檢測 入選患者安靜仰臥10min，從肘正中靜脈采集4mL靜脈血注入非抗凝試管中，室溫靜置30min后，4℃下3000轉／min離心10min，分離的血清于－80℃冷凍保存直至檢測，采用ELISA法測定，術后同法測定。

1.4 統(tǒng)計方法 計量資料全部用mean±s表示，兩組患者間D－二聚體和纖維蛋白原水平比較采用Independent－Samplest檢驗的方法，結直腸癌患者各亞組的比較采用單因素方差的方法。P＜0.05為有統(tǒng)計學意義。所有數(shù)據(jù)均用SPSS17.0軟件包進行處理。

2 結 果

2.1 結直腸癌各組與對照組D－二聚體和PAI－1水平 結果如表1所示，結直腸癌患者的D－二聚體水平、PAI－1水平顯著高于對照組，差異非常顯著（P＜0.01）。

表1 結直腸癌組和對照組D－二聚體和PAI－1水平比較（mean±s）

2.2 各期患者D－二聚體的平均水平 結果如表2所示，在結直腸癌患者的各亞組中，DukesCD期患者的D－二聚體水平明顯高于AB期，并有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

表2 結直腸癌組內各亞組的D－二聚體水平比較（）

表2 結直腸癌組內各亞組的D－二聚體水平比較（）

分組 D－二聚體（μg／mL） P PAI－1（ng／mL）P DukesAB期208.12±37.98 32.68±0.71 DukesCD期624.30±118.420.03241.07±0.760.024

3 討 論

D－二聚體是纖維蛋白單體活化因子交聯(lián)后，再經纖維酶水解作用所產生的一種殊降解產物，為纖維蛋白溶解酶作用于血管內外交聯(lián)纖維蛋白所產生的最小片段，其水平升高特異反映繼發(fā)性纖溶活性的增強［1，2］，在血液凝固過程中，具有重要的正相關性［4～6］。生理條件下D－二聚體低表達甚至不表達，但是在病理條件下，D－二聚體的表達量顯著上升［7］。目前已經發(fā)現(xiàn)在彌漫性血管內凝血、血管栓塞性疾患、心肌梗死等疾病中D－二聚體水平會有顯著升高［7］。而進一步研究表明D－二聚體水平在肺癌、肝癌、前列腺癌、結直腸癌等多種實體腫瘤患者中也會明顯升高：Nagy等［8］回顧性分析了300例惡性腫瘤患者，結果提示D－二聚體水平的增高與疾病的進展和死亡率的增高密切相關，提出D－二聚體是一個潛在的預測預后的標記物。而Ketut等［9］臨床實驗表明，血漿D－二聚體水平與實體腫瘤的臨床分期呈正相關，D－二聚體高水平即提示腫瘤患者處于高凝狀態(tài)，同時預示著不良預后。Masatoshi的研究表明［10］在結直腸癌患者中，D－二聚體水平與腫瘤的浸潤深度、淋巴轉移、血管侵犯、肝轉移等有密切的相關性，結直腸癌患者D－二聚體的水平與腫瘤分期具有正相關性。目前，D－二聚體已經成為結直腸癌領域關注的熱點生物標記物之一。

纖溶酶原激活物抑制劑－1（plasminogen activator inhibitor－1，PAI－1）屬于絲氨酸蛋白酶抑制劑（SERPINE）超家族之一。從目前的研究看來PAI－1的過表達與癌細胞的侵襲和轉移有著明顯的正相關性。在多數(shù)的體外實驗和組織免疫染色中都發(fā)現(xiàn)PAI－1在侵襲性較強的癌細胞中表現(xiàn)出了較高的表達趨勢和敏感性，提示了PAI－1具有作為惡性侵襲性腫瘤標記物及作為預后因子的應用價值。László［11］等 人 應 用 組 織 蛋 白 酶 B 和 L（CATB，CATL）、u－PA、PAI－1、CEA及CA－199聯(lián)合檢測56例結直腸癌組織，25例潰瘍性結腸炎組織，26例結直腸腺瘤組織和35例正常腸組織，結果顯示PAI－1的 敏 感 度 為 94%，CATB82%，u－PA69%，CATL41%，高于 CEA（30%）及 CA－199（18%）。PAI－1，CATB和u－PA比CEA及CA－199表現(xiàn)出更高的精確度。PAI－1、CATB和CATL對結直腸癌的預后有重要影響。Yasuhide［12］等人的研究表明PAI－1的血漿水平是預測結直腸癌術后復發(fā)的一個有前景的生物標記物。

以上研究提示在結直腸癌患者中，存在某種機制，導致血液處于高凝狀態(tài)。在本實驗中，結直腸癌患者血清D－二聚體和PAI－1水平在手術前后均明顯高于正常組（P＜0.01），而術后患者明顯高于術前（P＜0.01），說明D－二聚體和PAI－1在一定程度上反映結直腸癌轉移與機體的高凝狀態(tài)具有相關性；而DukesCD期患者的D－二聚體和PAI－1水平顯著高于AB期（P＜0.05），也就間接證明了CD期腫瘤生長的加劇。因此，本研究發(fā)現(xiàn)在結直腸癌的轉移過程中，凝血機制的激活，纖維蛋白的活性度增高和纖溶因子釋放的受阻，與該病的進展有重要的正相關性，進而可以影響到患者的預后。因此，D－二聚體和PAI－1對于結直腸癌的分期及預后可能有較大的參考意義，可成為一個指導診療的重要指標。

［1］Rosovsky RP，Kuter DJ.Catheter－related thrombosis in cancer patients：pathophy－siology，disgnosis，and management［J］.Hematol Oncol Clin North Am，2005，19（1）：183－202.

［2］Kalweit GA，F(xiàn)eindt P，Micek M，et al.Markers of activated hemostasis and fibrinolysis in patients with pulmonary malignancies：comparison of plasam levels in cantral venous and pulmonary venous blood［J］.Thromb Ras，2002，97（3）：105－111.

［3］Yasuhide Y，Tokuzo A，Kazuko M，et al.Plasma concertrations of VCAM－1and PAI－1：A predictive biomarker for post－operative recurrence in colorectal cancer.［J］.Cancer Sci，2010，101（8）：1886－1890.

［4］Sallah S，Husain A，Sigounas V，et al.Plasma coagulation markers in patients with solid tumors and venous thromboembolic disease receivingoral anticoagulation therapy［J］.ClinCancerRes，2004，10（21）：7238.

［5］黃尉國，王鴻利，張穎琪.血漿D－二聚體檢測及其臨床應用［J］.中華醫(yī)學檢驗雜志，1995，18（2）：171.

［6］Tseng CS，Lo HW，Chen PH，et al.Clinical significance of plasma D－dimer levels and serum VEGF levels in patients with hepatocellular carcinoma［J］.Hepatogastroenterology，2004，51（59）：1454.

［7］Blackwell K，Hurwitz H，Lieberman G，et al.Circulating D－dimmer levels are better predictors of overall survival and disease progression than carcinoembryonic antigen levels in patients with metastatic colorectal carcinoma［J］.Cancer，2004，101（1）：77

［8］Nagy Z，Horvath O，Kadas J，et al.D－dimer as a potential prognostic marker［J］.Pathol Oncol Ras，2012，1（18）.

［9］Kakkar AK，DeRuvo N，Chinswangwatanakul V，et al.Extrinsic－pathway activation in cancer with high factorⅦa and tissue factor［J］.Lancet，1995，346（8981）：1004.

［10］Masatoshi O，Yoshitake A，Takashi O，et al.High preoperative plasma D－dimer level is associtated with advanced tumor and short survival after curative resection in patients with colorectal cancer［J］.Jpn J Clin Oncol，2001，31（8）：388.

［11］Laszlo H，F(xiàn)abio F，Romilda C，et al.Tumor marker utility and prognostic relevance of cathepsin B，cathepsin L，urokinase－type plasminogen activator，plasmiknogen activator inhibitor type－1，CEA and CA－199in colorectal cancer［J］.BMC Cancer，2008，10（8）：194－206.

［12］Yasuhide Y，Tokuzo A，Kazuko M，et al.Plasma concertrations of VCAM－1and PAI－1：A predictive biomarker for post－operative recurrence in colorectal cancer.［J］.Cancer Sci，2010，101（8）：1886－1890.