張忠祥

窯街煤電有限責(zé)任公司總醫(yī)院消化科，甘肅蘭州 730080

胃癌患者血清VEGF-C、Ang-2的表達(dá)及臨床意義

張忠祥

窯街煤電有限責(zé)任公司總醫(yī)院消化科，甘肅蘭州 730080

目的 研究胃癌患者血清中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-C（VEGF-C）、血管生成素-2（Ang-2）的表達(dá)變化及其與胃癌的臨床病理特征的關(guān)系，探討VEGF-C與Ang-2在胃癌中的相互關(guān)系。 方法收集120例胃癌患者及49例健康者（對(duì)照組）血清，采用酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)（ELISA）檢測(cè)血清中VEGF-C、Ang-2水平。 結(jié)果 胃癌患者血清中VEGF-C、Ang-2含量較對(duì)照組均明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；VEGF-C表達(dá)水平升高與胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（P<0.01）、浸潤(rùn)深度（P<0.05）、TNM 分期（P<0.01）相關(guān)；Ang-2 表達(dá)水平升高與胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（P<0.01）、浸潤(rùn)深度（P<0.01）、TNM 分期（P<0.01）相關(guān)；VEGF-C 與 Ang-2 表達(dá)成正相關(guān)關(guān)系（r=0.478，P<0.05）。 結(jié)論血清中VEGF-C、Ang-2可作為胃癌生物學(xué)指標(biāo)，兩者聯(lián)合可能成為判斷胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后的重要指標(biāo)。

胃癌；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-C；血管生成素-2；酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移

胃癌是消化系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其死亡率位于消化系統(tǒng)腫瘤首位。胃癌的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致患者死亡和預(yù)后較差的重要原因。而胃癌作為實(shí)體腫瘤，其浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移依賴于腫瘤血管生成[1]。目前研究認(rèn)為腫瘤的血管生成是一系列血管生長(zhǎng)刺激因子和抑制因子作用失衡的結(jié)果。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-C（vascular endothelial growth factor-C，VEGF-C）屬于VEGF家族成員之一，是特異性的淋巴管生成因子，被認(rèn)為與腫瘤病理過(guò)程中的淋巴管生成密切相關(guān)[2]。研究認(rèn)為VEGF-C是通過(guò)自分泌和旁分泌兩種機(jī)制同時(shí)促進(jìn)胃癌的進(jìn)展[3]。 血管生成素-2（angiopoietin-2，Ang-2）是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的與血管生成及血管成熟有關(guān)的因子，Ang-2與Ang-1能夠競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞Tie-2受體，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞分裂移位，促進(jìn)新生血管生長(zhǎng)[4]。近來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，Ang-2的促進(jìn)腫瘤血管生成作用可能與VEGF因子的表達(dá)密切相關(guān)。本研究應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）檢測(cè)胃癌患者血清中VEGF-C及Ang-2蛋白的表達(dá)情況，探討其與胃癌發(fā)生的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選擇2010年9月～2012年4月本院確診的胃癌住院患者120例，所有病例均經(jīng)病理確診，采用2010年國(guó)際抗癌聯(lián)盟/美國(guó)癌癥聯(lián)合委員會(huì)（UICC/AJCC）TNM分期標(biāo)準(zhǔn)，Ⅰ期20例，Ⅱ期26例，Ⅲ期38例，Ⅳ期36例；排除冠心病、高血壓及糖尿病等慢性疾病及胃轉(zhuǎn)移癌；其中，男75例，女45例，年齡34～79歲，中位年齡48歲。選擇同期本院體檢人員中的健康者49例對(duì)照組，其中，男30例，女19例，年齡32～59歲，中位年齡為42.5歲。兩組年齡、性別比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

1.2 樣本收集及檢測(cè)

所有被檢患者術(shù)前均未進(jìn)行放、化療，取清晨空腹靜脈血3～4 ml，非抗凝管保存，室溫靜置0.5 h后2000 r/min離心分離血清，-80℃保存待測(cè)；血清中VEGF-C及Ang-2蛋白的含量按照ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)檢測(cè)，在波長(zhǎng)450 nm下讀取光密度值并計(jì)算VEGF-C、Ang-2的濃度。所有試劑盒均購(gòu)自美國(guó)ADL公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗(yàn)和Pearson相關(guān)分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清VEGF-C和Ang-2水平的比較

胃癌患者血清中VEGF-C、Ang-2含量較對(duì)照組明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（表1）。血清VEGF-C和Ang-2 呈正相關(guān)（r=0.478，P<0.05）。

表1 兩組血清VEGF-C和Ang-2水平的比較（ng/ml，±s）

表1 兩組血清VEGF-C和Ang-2水平的比較（ng/ml，±s）

與對(duì)照組相比，*P<0.05

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2.2 胃癌患者血清VEGF-C、Ang-2與臨床病理特征的相關(guān)性

血清中VEGF-C含量與胃癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)深度、TNM分期有關(guān)（P<0.05），與性別、年齡、有無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)（P>0.05）；胃癌患者血清Ang-2含量與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)深度、TNM分期有關(guān)（P<0.05），與性別、年齡、有無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)（P>0.05）（表 2）。

表2 胃癌患者血清VEGF-C、Ang-2與臨床病理特征的相關(guān)性

3 討論

腫瘤的生長(zhǎng)依賴于新生血管且與腫瘤的發(fā)展密切相關(guān)，新生腫瘤血管不僅供給腫瘤細(xì)胞充足的營(yíng)養(yǎng)及氧氣，其內(nèi)皮細(xì)胞還通過(guò)旁分泌作用及產(chǎn)生腫瘤生長(zhǎng)啟動(dòng)因子直接促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)[5]。VEGF-C是目前發(fā)現(xiàn)的強(qiáng)力促血管形成因子之一，也是腫瘤細(xì)胞分泌的促血管形成的關(guān)鍵因子，VEGF-C可直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞并刺激有絲分裂，改變血管內(nèi)皮細(xì)胞通透性，為新生血管提供基質(zhì)和支持，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移[1]。Hachisuka等[6]研究表明，胃癌組織VEGF-C表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，可用于胃癌患者術(shù)前對(duì)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的判斷。趙金偉[7]等研究發(fā)現(xiàn)，胃癌患者術(shù)前血清VEGF-C水平較健康人群明顯升高，且胃癌患者血清VEGF-C水平與組織VEGF-C表達(dá)無(wú)關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，胃癌組血清中VEGF-C含量明顯高于對(duì)照組，且有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的VEGF-C水平明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，浸及漿膜層者VEGF-C水平明顯高于未浸及漿膜層者，TNM分期Ⅲ、Ⅳ期患者VEGF-C水平明顯高于Ⅰ、Ⅱ期患者，以上結(jié)果提示VEGF-C可能參與胃癌浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移，有望成為評(píng)價(jià)胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后的有效指標(biāo)。

血管生成素是與血管生成有關(guān)的一個(gè)家族，包括Ang-1、Ang-2、Ang-3和Ang-4 4個(gè)成員。Ang-2基因位于第8號(hào)染色體短臂（8p23），表達(dá)分泌型蛋白。Ang-2與受體Tie-2結(jié)合，使后者不能磷酸化，從而阻斷血管穩(wěn)定信號(hào)，引起血管不穩(wěn)定[4]。Ang-2可促進(jìn)腫瘤性血管新生，刺激血管內(nèi)皮始祖細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞蛋白酶的產(chǎn)生；直接分泌信號(hào)肽啟動(dòng)腫瘤早期血管形成信號(hào)，參與腫瘤發(fā)生發(fā)展[8]。本研究發(fā)現(xiàn)，胃癌患者血清中Ang-2含量明顯升高，與胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)深度、TNM分期有關(guān)，提示Ang-2可能通過(guò)調(diào)控腫瘤血管生成，參與胃癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及浸潤(rùn)。Ang-2生物學(xué)功能取決于細(xì)胞內(nèi)環(huán)境和其他血管再生因子的相互作用。Ley[9]等研究發(fā)現(xiàn)在VEGF、bFGF存在時(shí)Ang-2能夠促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖，缺乏時(shí)Ang-2又可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。Engin[4]等發(fā)現(xiàn)Ang-2可能由于胞質(zhì)內(nèi)容物不同而呈現(xiàn)促進(jìn)或抑制血管生成的作用，胃癌中Ang-2而不是Ang-1與Tie-2的結(jié)合及其在胞質(zhì)內(nèi)濃度與腫瘤血管生成相關(guān)。Ang-2伴隨VEGF的表達(dá)上調(diào)，促進(jìn)新生血管生成；當(dāng)Ang-2強(qiáng)表達(dá)時(shí)，局部缺氧得到緩解，VEGF表達(dá)水平降低，導(dǎo)致血管的退化[10]。張真真等[11]發(fā)現(xiàn)，Ang-2/Ang-1的比值可能是決定胃癌血管生成和腫瘤生長(zhǎng)的最終因素，推測(cè)在胃癌血管生成中血管生成素及其受體系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用是以Ang-2的作用為主導(dǎo)的。

目前臨床對(duì)于VEGF-C與Ang-2在胃癌中關(guān)系的研究比較少，本研究證實(shí)在胃癌患者血清中，VEGF-C與Ang-2表達(dá)均上調(diào)，且兩者呈正相關(guān)關(guān)系，提示胃癌中這兩種因子可能共表達(dá)并共同參與腫瘤血管形成這一病理過(guò)程。但具體的分子調(diào)控機(jī)制尚需進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)證實(shí)。隨著對(duì)VEGFC及Ang-2研究的深入，VEGF-C和Ang-2可望成為腫瘤臨床治療的新靶點(diǎn)。

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Expression and clinical significance of serum VEGF-C and Ang-2 in patients with gastric cancer

ZHANG Zhong-xiang

Department of Gastroenterology,Genaral Hospital of Yaojie Coal Electricity Group Co.Ltd in Gansu Province,Lanzhou 730080,China

ObjectiveTo study the relationship between expression changes of serum vascular endothelial growth factor-C(VEGF-C)and angiogenin-2(Ang-2)in patients with gastric cancer and clinicopathological features of gastric cancer,and to investigate the mutual relations of VEGF-C and Ang-2 in gastric cancer.MethodsThe serum of 120 patients with gastric cancer and 49 cases of health people(control group)were collected and levels of VEGF-C and Ang-2 were detected by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).ResultsThe levels of VEGF-C and Ang-2 in patients with gastric cancer were markedly higher than that of control group with statistically significant difference(P＜0.05).Elevated levels of VEGF-C expression was related to and lymph node metastasis of gastric cancer(P＜0.01),depth of invasion(P＜0.05)and TNM stage(P＜0.01);elevated levels of Ang-2 expression were related to lymph node metastasis of gastric cancer(P＜0.01),depth of invasion(P＜0.01)and TNM stage(P＜0.01);VEGF-C and Ang-2 expression was positively correlated(r=0.478,P＜0.05).ConclusionSerum VEGF-C,Ang-2 can be used as biological indicators of gastric cancer,their combination may become important indicators of judging lymph node metastasis and prognosis of gastric cancer.

Gastric cancer;Vascular endothelial growth factor-C;Angiopoietin-2;Enzyme-linked immunosorbent assay;Lymph node metastasis

R735.2

A

1674-4721（2013）08（c）-0012-03

2013-03-28 本文編輯：魏玉坡）