吳艷梅(河南省濮陽市婦幼保健院輸血科 457000)
支原體是泌尿生殖道非淋球菌的主要病原體之一,約有30%~40%的非淋球菌尿道炎由支原體感染所致。由于近年來抗生素的不合理運(yùn)用,致使其耐藥性逐年增高。因此,對支原體感染狀況的了解及藥敏分析就顯得尤為重要。運(yùn)用支原體培養(yǎng)及藥敏分析指導(dǎo)臨床合理用藥,降低因支原體感染導(dǎo)致不孕不育患者的耐藥性有重大意義[1]。
1.1 標(biāo)本來源 對2008年1月至2010年12月本院生殖科的1 741例支原體陽性患者用一次性無菌拭子采集標(biāo)本,男性取尿道分泌物,女性取宮頸口分泌物,采后立即送檢[2]。其中男162例,女1 579例,年齡在20~49歲。
1.2 方法 采用珠海迪爾生物工程有限公司生產(chǎn)的藥敏試劑盒,用液體培養(yǎng)的方法分離鑒定解脲支原體(Uu)和人型支原體(Mh)并做12種藥敏試驗(yàn)。每種抗生素分別有高濃度和低濃度兩孔。標(biāo)本的處理和試驗(yàn)步驟嚴(yán)格按照試劑盒規(guī)定的要求和操作程序進(jìn)行。
1.3 藥敏試驗(yàn)及步驟 藥敏試驗(yàn)藥物為交沙霉素、羅紅霉素、美滿霉素、強(qiáng)力霉素、環(huán)丙沙星、阿齊霉素、克拉霉素、司帕沙星、氧氟沙星、四環(huán)素、左氧氟沙星、紅霉素。(1)空白陰性對照。取出Uu-Mh培養(yǎng)基及試驗(yàn)板,使其在接觸標(biāo)本前接近室溫;掰開瓶蓋、揭開膠塞,用無菌吸咀吸取100μL培養(yǎng)液加入A1(空白對照孔)。(2)接種標(biāo)本。將標(biāo)本棉簽伸入混合液小瓶,靠近液面上方的瓶壁擠壓棉簽,使標(biāo)本滲入,丟棄棉簽;標(biāo)本加入后,充分搖勻使之混合。(3)加樣至藥敏測定板。吸取100μL含菌培養(yǎng)液加入其余微孔中。(4)礦物油封蓋。所有微孔滴加1~2滴試劑盒所附的無菌礦物油(注意:一定要使礦物油覆蓋液面,否則結(jié)果不準(zhǔn))。(5)培養(yǎng)。將試驗(yàn)板加蓋后置培養(yǎng)箱中,35~37℃培養(yǎng)24~48h,觀察結(jié)果[3]。
1.4 結(jié)果判斷 A行為高濃度,B行為低濃度,上下一一對應(yīng)為一種藥物。A1孔對照孔不變色,B1孔變紅色為支原體生長;A2、A3孔變紅色為Uu陽性;B2、B3孔變紅色為Mh陽性;A2、A3孔和B2、B3孔均為紅色為Uu和Mh混合感染。藥敏測定以高低兩孔均不變色為敏感;高濃度孔不變色、低濃度孔變色為中介;高濃度孔和低濃度孔均變色為耐藥。
2.1 培養(yǎng)結(jié)果 在1 741例陽性患者中,單純Uu感染1 548例占88.92%;單純Mh感染57例占3.27%;Uu+Mh混合感染136例占7.81%;可見泌尿生殖道感染以Uu感染為主。
2.2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果 支原體對交沙霉素非常敏感,其次為美滿霉素和強(qiáng)力霉素,敏感率分別為98.68%、92.88%和91.15%;對環(huán)丙沙星、紅霉素、左氧氟沙星有一定的耐藥性。見表1。
2.3 耐藥分析 支原體對左氧氟沙星耐藥率為45.26%,其次是氧氟沙星(39.35%)和環(huán)丙沙星(38.88%),羅紅霉素、紅霉素、司帕沙星耐藥率分別為26.59%、23.72%、22.69%。
表1 支原體感染對抗菌藥物敏感結(jié)果
支原體主要存在于人類泌尿生殖道及生殖腺中,是引起NGU及男女不孕不育癥的主要病原體,也是性傳播疾病的常見病原體。支原體具有黏附性,可附著于精子的頭部與體部,降低精子的活動能力,影響精子與卵子的受精,引起不育[4]。陰道支原體感染由于支原體分解尿素產(chǎn)生的NH3破壞作為天然屏障的弱酸環(huán)境,促使其他病原體易于定植感染而不利于精子存活;宮頸部的支原體能隨精子到達(dá)宮腔及輸卵管,引起黏膜壞死,輸卵管纖毛運(yùn)動停滯,導(dǎo)致輸卵管阻塞,引起女性不孕。由于支原體缺乏細(xì)胞壁,因此影響細(xì)胞壁合成的藥物對其無效,因而臨床上常用的影響蛋白合成的喹諾酮類、四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物耐藥性高,這與本次研究結(jié)果相符[5]。本地區(qū)支原體患者對交沙霉素非常敏感,其次為美滿霉素及強(qiáng)力霉素,敏感率分別占98.68%、92.88%和91.15%。而流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示,支原體對各種抗菌藥物敏感率在不同地區(qū)甚至不同醫(yī)院存在明顯差異,主要與不同地區(qū)臨床醫(yī)生用藥習(xí)慣及耐藥菌株有關(guān),因此,探討本地區(qū)甚至本醫(yī)院支原體感染及耐藥情況意義重大[6]。本次研究結(jié)果顯示,應(yīng)選擇敏感率高的交沙霉素、美滿霉素和強(qiáng)力霉素作為首選藥物。
支原體感染率日益上升,導(dǎo)致的不孕不育患者越來越多,治療支原體感染所采用的抗菌藥物也越來越多,使得耐藥菌株不斷增加,因而選擇敏感藥物治療成為臨床關(guān)注的焦點(diǎn)[7-10]。因此,治療支原體感染必須根據(jù)支原體培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)結(jié)果選擇敏感的抗生素,對合并感染者選擇對兩者都敏感的藥物進(jìn)行治療。
綜上所述,本地區(qū)泌尿生殖系支原體感染中,Uu感染率最高,其次為Uu合并Mh混合感染。Uu對交沙霉素非常敏感,其次為強(qiáng)力霉素和羅紅霉素;Mh對強(qiáng)力霉素最為敏感,其次為氧氟沙星和交沙霉素。而本地區(qū)支原體對喹諾酮類多種藥物支均產(chǎn)生較高耐藥性,這可能與臨床醫(yī)師慣用喹諾酮類抗生素有一定關(guān)系。支原體耐藥性的長期監(jiān)測是指導(dǎo)臨床用藥的重要依據(jù),臨床醫(yī)生應(yīng)根據(jù)藥敏結(jié)果合理選擇抗生素。
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