吳群英，李伯林，李景云

（1.桂林醫(yī)學院 生物技術學院，廣西 桂林541004；2.廣西師范大學 生命科學學院，廣西 桂林541004；3.廣西中醫(yī)藥大學 基礎醫(yī)學院，廣西 南寧530001）

1 引言

羅 漢 果 （Siraitia grosvenorii （Swingle）C.Jeffrey）為葫蘆科（Cucurbitaceae）羅漢果屬植物，是廣西特有的藥用和甜料植物[1]。羅漢果果實性涼味甘，有潤肺止咳、涼血、潤腸，通便的功效，在治療百日咳、慢性支氣管炎、胃腸疾病等方面療效顯著，為歷代藥典所收載，是國家衛(wèi)生部和國家中醫(yī)藥管理局列為第一批藥食同源名單的重要品種，被譽為“東方神果”[2～4]。近年來，隨著羅漢果功效的不斷驗證，市場對羅漢果的需求日益增加，羅漢果已廣泛應用于醫(yī)藥、保健食品及食品領域[5]。傳統(tǒng)的羅漢果繁殖主要采用塊根和壓蔓進行無性繁殖，不僅繁殖系數(shù)低，而且隨著無性繁殖代數(shù)增加，病毒通過垂直傳播代代相傳，導致病毒積累和種質(zhì)嚴重退化[6]，利用莖尖脫毒技術培育脫毒苗是解決病毒危害、實現(xiàn)高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的重要措施[7]。羅漢果脫毒的研究始于20世紀90年代，目前僅有3篇報道[8～10]，但迄今為止，尚無脫毒苗大田生產(chǎn)性能的報道。本研究以羅漢果脫毒苗和常規(guī)組培苗為材料，探討了脫毒苗的生產(chǎn)性狀，為脫毒苗在生產(chǎn)上的應用提供參考。

2 材料與方法

將從永福縣龍江鄉(xiāng)采摘的羅漢果青皮品種的莖段作為外植體，建立無菌體系，以繼代的組培苗作為常規(guī)組培苗（簡稱組培苗，以下同）；以常規(guī)組培苗為材料進行脫毒處理[10]，得到脫毒組培苗（簡稱脫毒苗，以下同）。將高約3cm的脫毒苗和常規(guī)組培苗，分別接入1/2MS＋1.0mg/L IBA ＋0.1%活性炭＋1.5%蔗糖的生根培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。移栽試驗在廣西師范大學生物園試驗基地大棚內(nèi)進行。

大田移栽于5月21日將脫毒苗和常規(guī)苗各41株，移栽至廣西桂林市臨川縣藍田鄉(xiāng)進行大田種植，并對脫毒苗和常規(guī)苗的生長情況進行觀察和記錄。9月2日統(tǒng)計組培苗掛果情況。所有栽培管理技術參照當?shù)毓r(nóng)種植習慣。

3 結(jié)果與分析

3.1 組培苗大田性狀

從長勢看，脫毒苗生長迅速，平均比對照苗抽出新葉的時間短，能夠很好地適應外界環(huán)境條件。將脫毒苗和常規(guī)苗移栽入大田生長40d后，脫毒苗和常規(guī)苗的生長情況如表1所示。由表1可見，脫毒苗與常規(guī)苗相比，脫毒生長旺盛，葉片數(shù)多，節(jié)間長，植株抽長迅速，葉片寬大呈心形，先端急尖，葉色濃綠，無花葉病病癥（圖1）。對照苗長勢弱，葉片褪綠，葉片上有點樣深綠皰斑，與脫毒苗有很大差別（圖2）。

表1 脫毒苗與常規(guī)苗外觀形態(tài)的比較

3.2 羅漢果組培苗的產(chǎn)量

將組培苗移栽至大田后，其存活率和開花掛果情況如表2所示，常規(guī)苗的存活率為85.36%，脫毒苗僅為73.17%，存活的常規(guī)苗在種植第一年開花和掛果率均為零，而存活的脫毒苗雖然移載至大田種植時間比較短，但仍有12株當年就開花并掛果，單株產(chǎn)量多達100只，大果多，均勻（圖3、圖4）。

圖1 羅漢果花葉病癥，花葉，皺縮

圖2 羅漢果脫毒苗葉片

表2 羅漢果種植第一年掛果情況

圖3 羅漢果脫毒苗掛果情況（示掛果數(shù)量多）

圖4 羅漢果脫毒苗掛果情況（示大果）

4 結(jié)語

羅漢果一般于每年的3～4月種植，9～11月成熟。傳統(tǒng)生產(chǎn)的羅漢果是兩年以上植株掛果。本次試驗于5月21日將脫毒苗和常規(guī)苗移栽至大田，此時種植時間已比羅漢果正常種植時期晚了將近2個月，但由于進行了脫毒處理，消除了病毒引起的組織代謝異常，脫毒苗植株生長迅速，在生產(chǎn)上表現(xiàn)出長勢強、葉片增大，葉色濃綠，提前進入結(jié)果期的優(yōu)勢，單株產(chǎn)量多達100只，果形大，數(shù)量多，充分顯示了脫毒苗增產(chǎn)復壯的效果。

羅漢果脫毒苗移栽至大田后成活率偏低其原因是多方面的，一方面，可能是由于脫毒苗在誘導分化產(chǎn)生大量叢生芽過程中出現(xiàn)了玻璃苗，移栽至大田后玻璃苗光合與吸收功能不全，導致成活率偏低；另一方面，在種植過程中各種人為因素的影響也是應該考慮的。羅漢果脫毒苗種植大田后，是否更容易感染病毒？栽培上應怎樣成分發(fā)揮脫毒苗的增產(chǎn)潛力？都有待于進一步的試驗研究。

[1]李典鵬，張厚瑞.廣西特產(chǎn)植物羅漢果的研究與應用[J].廣西植物，2000，20（3）：270～276.

[2]廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生廳.廣西中藥志：第二輯[M].南寧：廣西壯族自治區(qū)人民出版社.1983.

[3]中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].北京：化學工業(yè)出版社，2005.

[4]范繼善.實用食品添加劑[M].天津：天津科學技術出版社，1993.

[5]曾祥林.廣西特產(chǎn)植物羅漢果研究進展[J].廣西醫(yī)學，2009，31（8）：1182～1185.

[6]付長亮，馬小軍，白隆華.羅漢果組織培養(yǎng)研究進展[J].中國中藥雜志，2005，30（5）：25～328.

[7]林 緯，黎起秦，彭好文，等.羅漢果組培苗種植存在問題及解決措施[J].廣西農(nóng)業(yè)科學，2003（4）：74～75.

[8]林治良，陳振光.羅漢果無花葉病苗培育[J].福建農(nóng)業(yè)大學學報，1995，24（2）：162～166.

[9]杭 玲，陳麗娟.羅漢果莖尖脫毒快繁技術[J].西南農(nóng)業(yè)學報，1999，12（3）：125～127.

[10]吳群英，李伯林，李景云.羅漢果組培苗脫毒方法研究[J].廣東農(nóng)業(yè)科學，2012，39（24）：18～20.