安 瑜 張新新 梁晉如 郝群峰 孫文基 王 燕▲ 寧夏自治區(qū)固原市藥品檢驗(yàn)所（固原756000）

理想的消毒劑應(yīng)具備殺菌譜廣、殺菌能力強(qiáng)、作用速度快、穩(wěn)定性好、毒性低、腐蝕性小、刺激性小 （應(yīng)該是無毒、無殘留、無腐蝕、無刺激）易溶于水、對(duì)人和動(dòng)物安全及價(jià)廉易得、對(duì)環(huán)境污染程度低等特點(diǎn)。瑞克衛(wèi)瑞消毒液具有殺菌與消毒的功效，其中含有的桂皮醛具有明顯的消炎、抗菌等作用［1，2］，是消毒液的主要活性成分之一。利用高效液相色譜方法測(cè)定瑞克衛(wèi)瑞消毒液中桂皮醛的含量未見報(bào)道［3－7］，為了能夠有效地控制本品的內(nèi)在質(zhì)量，所以建立高效液相色譜方法對(duì)其中的桂皮醛含量進(jìn)行測(cè)定，并進(jìn)行方法學(xué)的考察。以為其質(zhì)量控制提供一種可行的方法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Waters2695型高效液相色譜儀；Waters2487型UV－VIS檢測(cè)器；Empower色譜工作站；SE－96自動(dòng)純水蒸餾器；KQ－100DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超市儀器有限公司）。

1.2 試藥 瑞克衛(wèi)瑞消毒液由陜西瑞可生物科技有限公司生產(chǎn)；桂皮醛對(duì)照品（批號(hào)：20101025）（上海雙香助劑廠），丁香酚對(duì)照品（上海飛樣化工廠）；無水乙醇（分析純，天津市濱?？频匣瘜W(xué)試劑有限公司），甲醇（色譜純，天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司），水為雙蒸水（自制）。

2 方法和結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：Welchrom C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流動(dòng)相：甲醇－水（60∶40）等度洗脫；體積流量：1.0 mL·min－1；柱溫：25℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm；在該色譜條件下，樣品中桂皮醛和其他組分分離效果良好，對(duì)照品與樣品色譜圖見圖1。

圖1 HPLC圖

2.2 桂皮醛對(duì)照品溶液的配制 用200μL移液槍精密量取密度為1.05g·mL－1的桂皮醛對(duì)照品溶液20μL，置100mL容量瓶中，用無水乙醇溶解并定容至刻度，配成濃度為0.21mg·mL－1的對(duì)照品溶液。

2.3 供試品溶液的配制 用1000μL移液槍精密量取500μL瑞克衛(wèi)瑞消毒液，置10mL容量瓶中，加無水乙醇溶解并定容至刻度，搖勻，即得。

2.4 線性關(guān)系考察 分別精密吸取桂皮醛對(duì)照品溶液1，2，4，5，6，8和10μL進(jìn)樣。依“2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，以桂皮醛峰面積為縱坐標(biāo)，桂皮醛質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性回歸方程為Y＝10000000 X＋16121，r2＝0.9998，線性范圍為0.21～2.1μg。

2.5 精密性實(shí)驗(yàn) 精密吸取桂皮醛對(duì)照品溶液10μL，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定桂皮醛峰面積。結(jié)果桂皮醛峰面積的RSD為0.3%（n＝6）。

2.6 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 精密吸取桂皮醛對(duì)照品溶液10μL，于0，2，4，6，10，16和24h進(jìn)樣，測(cè)定桂皮醛峰面積。結(jié)果桂皮醛峰面積的RSD為0.1%。結(jié)果表明供試品溶液在24h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.7 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 取同一樣品溶液（批號(hào)：1103036－1），平行取樣6份（n＝6），按照“2.3”項(xiàng)下方法配制供試品溶液。按“2.1”項(xiàng)的色譜條件測(cè)定桂皮醛峰面積，結(jié)果桂皮醛峰面積的RSD為1.2%，表明方法重現(xiàn)性較好。

2.8 加樣回收率實(shí)驗(yàn) 精密吸取已知濃度同一批號(hào)的樣品溶液（批號(hào)：1103037－1，濃度0.85mg·mL－1）4mL，共6份，分別置25mL容量瓶中，再分別加入桂皮醛對(duì)照品溶液17mL，按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，并按“2.1”項(xiàng)下的色譜條件，依法測(cè)定，計(jì)算平均加樣回收率。結(jié)果見表1。

表1 桂皮醛加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果（n＝6）

2.9 樣品測(cè)定 取瑞克衛(wèi)瑞消毒液按“2.3”項(xiàng)方法制備供試品溶液，分別精密吸取供試品溶液10μL，注入高效液相色譜儀中，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定峰面積。按外標(biāo)法計(jì)算供試品溶液中桂皮醛的含量。結(jié)果見表2。

表2 瑞克衛(wèi)瑞消毒液中桂皮醛的含量（n＝3）

3 討 論

3.1 本實(shí)驗(yàn)共測(cè)得了三批樣品中桂皮醛的含量 結(jié)果發(fā)現(xiàn)三批樣品中桂皮醛含量分別為0.83mg·mL－1、0.85mg·mL－1和0.85mg·mL－1，批與批之間的含量相差不是很大，說明廠家在生產(chǎn)產(chǎn)品時(shí)，質(zhì)量體系控制的比較嚴(yán)格。雖然，三批樣品具有一定的局限性，但是可以看出，本文所建立的高效液相色譜方法測(cè)定瑞克衛(wèi)瑞消毒液中桂皮醛的含量，重現(xiàn)性較好。

3.2 流動(dòng)相的選擇 本實(shí)驗(yàn)初的時(shí)候，參考不同的文獻(xiàn)，分別采用了乙腈－水、甲醇－水不同比例作為流動(dòng)相，結(jié)果發(fā)現(xiàn)桂皮醛在甲醇－水（60∶40）和乙腈－水（40∶60）系統(tǒng)中均能達(dá)到理想的分離效果?？紤]到溶劑的毒性以及成本問題，本實(shí)驗(yàn)選擇甲醇－水（60∶40）系統(tǒng)作為最終的流動(dòng)相。而且在此流動(dòng)相系統(tǒng)下，樣品運(yùn)行時(shí)間為20min左右，在確保理想分離度的前提下，時(shí)間是相對(duì)比較短的。

［1］陸頌規(guī)，王 巖，彭紅英.不同產(chǎn)地桂枝中桂皮醛的GC含量測(cè)定［J］.中藥材，2007，30（2）：174－175.

［2］王 寧.高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定解風(fēng)酒中阿魏酸、原兒茶酚酸和桂皮醛［J］.中成藥，2012，34（1）：71－73.

［3］李曉妮，葛 新，李青山.高效液相色譜法測(cè)定祖師麻風(fēng)濕膏中桂皮醛的含量［J］.藥物分析雜志，2008，28（9）：1559－1561.

［4］李生有.高效液相色譜法測(cè)定胃痛七味散膠囊中桂皮醛的含量［J］.中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2005，25（3）：248－249.

［5］謝 敏，張秋萍.HPLC法測(cè)定養(yǎng)脾散中桂皮醛的含量［J］.中藥材，2008，31（7）：1086－1087.

［6］董 媛，明全忠.HPLC法測(cè)定八味肉桂膠囊中桂皮醛的含量［J］.西北藥學(xué)雜志，2007，22（3）：101－103.

［7］柏 冬，范 斌，牛曉紅，等.HPLC－系統(tǒng)內(nèi)標(biāo)法測(cè)定桂枝湯中芍藥苷、甘草苷、肉桂酸、桂皮醛和甘草酸［J］.中草藥，2010，41（3）：387－390.