劉興偉 邵夢躍 李豐田 趙艷嬌 丁世偉

遼寧省遼寧絨山羊原種場有限公司 111000

1 材料和方法

1.1 電阻測定工具的選擇

選用遼寧省畜牧科學研究院研發(fā)的“牧豐牌羊發(fā)情排卵測定儀”。其工作原理是：母羊處于發(fā)情狀態(tài)特別是接近排卵時期，由于其生殖器官充血，血液中的鹽分、離子等通過毛細管滲透到陰道腔中，使陰道中黏液的導電性增強，從而使黏液的電阻值下降。當排卵期過后，電阻值由最低值上升到最高值。當連續(xù)定時測定母羊子宮頸口的電阻值后，就會監(jiān)測到母羊排卵的時間點，從而能有效提高配種受胎率，特別是凍精配種的受胎率。

1.2 牧豐牌羊發(fā)情排卵測定儀使用方法

將檢測儀的探頭插入到母羊陰道內至子宮頸口，輕輕轉到手柄正負15°角，打開電源開關，當電阻值穩(wěn)定在十位范圍時記錄數值后即可。延時測定方法是將檢測儀的探頭插入到母羊陰道內至子宮頸口，輕輕轉到手柄正負15°角，打開電源開關，當數顯表顯示數據后按下延時開關，在規(guī)定的延時時間內顯示最后的測定數值。實驗表明，延時顯示的數據與實時測定的數據呈強正相關，可以完全代替實時測定。

在測定前要將母羊的外陰進行適當清洗、消毒，防止將病源微生物帶入母羊生殖道內，造成母羊流產、死胎和受胎率降低。將母羊體測儀的探頭用75%酒精擦洗消毒，待酒精風干后再用生理鹽水擦洗，再后將探頭極環(huán)用鹽水擦凈。

1.3 試驗母羊的選擇

精心挑選有正常發(fā)情周期的繁殖母羊300只，其中3-6周歲母羊100只，為A組；1.5-2.5周歲母羊100只，為B組；8月齡-16月齡母羊100只，為C組。

1.4 試驗時間與地點

于2010年8月-12月，分別在遼寧絨山羊原種場科技示范場和遼寧省遼陽市下達河鄉(xiāng)智豐種羊場進行母羊挑選，并在母羊正常發(fā)情狀態(tài)下進行母羊頸宮電阻值的測定。

1.5 母羊排卵觀察方法

采用腹腔鏡法觀測母羊的排卵狀態(tài)，即將母羊仰臥、頭低尾高保定后，腹部后方常規(guī)剪毛消毒，在腹中線兩側乳房前2-3cm處的一側選血管稀少處作一1.0-1.5cm的切口，拉開皮膚，利用腹腔鏡探針外套刺破肌肉層和腹膜，抽出內部探針，將探針留在腹腔內；腹中線另一側對稱位置作同一切口，插入子宮鉗。然后利用子宮鉗和探針外套尋找子宮角末端，將卵巢暴露進行排卵及卵泡發(fā)育情況觀測。用上述同樣方法進行另一側卵巢發(fā)育及排卵觀測。觀測結束后及時做好相關記錄供分析之用。

1.6 測量時間的設計

在母羊未發(fā)情的狀態(tài)下，每隔2小時進行一次電阻值測定，不做母羊排卵觀側，以保證母羊有足夠的體力使試驗順利進行。母羊發(fā)情后，每1小時進行一次電阻值測定，并同時進行排卵及卵泡發(fā)情情況的觀測，詳細做好各項記錄工作。

1.7 數據統計方法

（1）各時間區(qū)段進行比較

通過試驗測定出電阻值和排卵時間點以后，以排卵時間點為中心劃定時間范圍。具體劃分方法如下：

排卵時間點±2小時，排卵時間點前±2小時-±4小時，排卵時間點后±2小時-±4小時。

通過各時區(qū)測定數值的統計，計算出各時區(qū)電阻值的平均值和排卵發(fā)生的百分率，以生物統計方法進行比較。

（2）繪制不同類別羊電阻值變化規(guī)律進行直觀比較

以時間為橫坐標，電阻值變化為縱坐標，比較距離排卵時間點不同時間范圍的電阻值變化規(guī)律。

（3）輸精試驗效果比較

在遼陽市下達河鄉(xiāng)雞鳴寺村和黑龍江省七臺河地區(qū)挑選2-7周歲的繁健康絨山羊母羊120只，分為2組，對照組42只，采用陰道檢查鑒定發(fā)情方法。試驗組78只，采用電阻測定法確定輸精時間，各組均進行細管凍精配種試驗，子宮頸口輸精，一個情期輸精2次。配種后60天根據不返情率統計兩組的凍精配種受胎率，進行樣本百分數差異顯著性檢驗。

2 試驗結果

2.1 不同時間區(qū)段內電阻值變化情況，如表1所示。

表1：不同時間區(qū)段時宮頸電阻值變化規(guī)律明細表 單位：歐姆、個、%

對表中各組排卵母羊比率、卵泡成熟率進行樣本百分數差異顯著性檢驗，P、Q、M、N與O組比較，P＜0.01，差異極顯著；P、M 之間，P、N 之間，Q、N之間，P、Q之間兩組數值＜0.05，差異顯著。通過分析說明，當母羊子宮頸口黏液電阻值下降至最低值時即排卵點±2小時的時區(qū)內，絕大多數母羊發(fā)生了排卵現象，并且此區(qū)間內卵泡的成熟比率極顯著高于其他時間區(qū)間的比率。

2.2 不同年齡母羊在整個發(fā)情周期內宮頸電阻值的變化規(guī)律

將1.5-2.5周歲母羊與3-7周歲母羊測得的宮頸電阻值的平均值繪制成曲線，如圖1所示。

圖1：不同年齡的母羊發(fā)情周期宮頸黏液電阻值的變化曲線

通過圖1可以看出，盡管兩個曲線的下降和上升速率不同，但到達電阻最低點的數值是接近的，大約在100歐姆上下范圍內.1.5-2.5周歲母羊組發(fā)情持續(xù)時間較短，電阻值上升和下降的數率較快，表現為曲線較為陡直。而3-7周歲母羊組母羊的發(fā)情持續(xù)時間較長，表現為曲線較為舒緩，這與實際生產中成壯年母羊的發(fā)情時間較長，未成年母羊的發(fā)情持間較短的變化規(guī)律是一致的。

2.3 細管凍精配種受胎效果

采用遼寧絨山羊0.25mL細管冷凍精液進行配種，經檢測，所用凍精解凍后的活力為0.35±0.05，38-40℃解凍后在 38℃的存活時間平均為6.5±0.5小時，其配種效果如表2所示。

表2：不同發(fā)情鑒定方法凍配效果明細表單位：只、%

通過樣本差數顯著性檢驗，兩組之間P＜0.01，差異極顯著，說明通過測定宮頸黏液電阻法判斷母羊發(fā)情排卵狀態(tài)進行輸精可以取得更好的凍精配種效果。

3 討論與分析

（1）不同年齡的母羊，其子宮頸口電阻值的變化速率是不同的，但兩者又有其共同點，即變化規(guī)律是相同的。如都是未發(fā)情和發(fā)情結束后電阻值數值最高并且比較恒定，發(fā)情開始后逐漸降低，至排卵前后降至最低點，排卵后又上升到最高數值。

（2）母羊在一個發(fā)情周期中，其體內的激素會出現一系列的變化。在發(fā)情開始時，雌激素水平上升，會引起母羊生理上的許多變化，生殖器官毛細血管充血，血管和黏膜的通透性增加，血壓可能也會有所上升。在這些因素的作用下，血液中的液體成份及溶于液體成份的鹽類等物質就會滲透到生殖道中，越接近排卵，滲出的液體成份越多，鹽類等電解質成份濃度越高，其導電性越強，電阻值越低。母羊排卵結束后，雌激素水平下降，孕酮水平上升，母羊的生理又回復到未發(fā)情時的狀態(tài)，自然其電阻值又恢復到原來的高數值狀態(tài)。

（3）本研究之所以選擇母羊子宮頸外口的電阻值進行試驗測定，是因為宮頸外口位置比較固定，在測定時只要把羊發(fā)情排卵檢測儀插入母羊陰道底部即可測定相同部位的電阻，便于進行比較和分析。另外，宮頸外口的黏液由于位置較深，揮發(fā)較慢，又是分泌數量較多的部位，能夠準確地反映出母羊生殖道管腔內黏液的主要特點。而陰道腔中黏液的主要來源是宮頸外口的黏液和陰道外壁黏液的混合體，蒸發(fā)較快并且?；煊心蛞海绊憸y定結果的準確性，故沒有采用。

（4）本試驗所采用的測定儀器是遼寧省畜牧科學研究院設計并制作的“牧豐牌羊用發(fā)情排卵檢測儀”，主要是依靠儀器探頭的兩個電極環(huán)插入母羊宮頸外口，通過濕潤的黏膜和黏液構成導電回路進行測定的。其中電極環(huán)之間的黏液覆蓋面積對測定結果是有所影響的，因此在儀器的設計時，將兩電極環(huán)的距離和直徑縮小，同時將電極環(huán)設計成與探頭探稈水平狀態(tài)，都是為了不浪費粘液，保證多次測定結果準確并具有可比較性。如果采用其他儀器測定，由于設計參數不同，內阻不同，其測定數值和測定的準確性也必然存在差異。

（5）由于所測定的儀器已經申請國家專利，故不能對儀器的具體結構和參數作具體介紹，望見諒。

（6）本研究在試驗的過程中，只采用遼寧絨山羊做為測定樣本，沒有對其他品種的山羊進行測定。另外，在凍配時由于條件限制，凍配母羊樣本較少，沒有對其他生理狀態(tài)的母羊如藥物處理母羊、春季配種母羊進行測定，需要在以后的研究中進一步完善。