高健美

桔梗元參湯治療過敏性鼻炎實驗研究

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目的研究桔梗元參湯對過敏性鼻炎的治療作用及作用機制。方法建立卵蛋白致小鼠過敏性鼻炎模型，通過觀察過敏性鼻炎小鼠行為學、血液、嗜酸性粒細胞、IgE及分泌淋巴細胞因子含量，確定桔梗元參湯的治療作用及作用機制。結(jié)果對過敏性鼻炎小鼠連續(xù)用藥 21d，桔梗元參湯組癥狀好轉(zhuǎn)率＞90%，鼻黏膜嗜酸性粒細胞增多，IgE抗體水平降低，ELISA實驗結(jié)果示桔梗元參湯能夠使OVA小鼠Th1淋巴細胞因子（IF-γ和IL-2）含量明顯升高，使Th2淋巴因子（IL-4和IL-10）含量顯著降低。結(jié)論桔梗元參湯對過敏性小鼠能夠通過糾正Th1/Th2平衡失調(diào)，抑制IgE水平發(fā)揮其治療過敏性鼻炎的作用。

桔梗元參湯；過敏性鼻炎；IgE；Th1/Th2

桔梗元參湯是清朝名醫(yī)黃元御《四圣心源》中的名方，主要成分包括桔梗、元參、杏仁、橘皮、半夏、茯苓、甘草、生姜，具有宣肺平喘，和胃降逆的功效[1]。本研究通過建立卵蛋白致小鼠過敏性鼻炎模型，探討桔梗元參湯對過敏性鼻炎的治療作用及機制。

1 材料

1.1 動物清潔級7周齡BALB/c小鼠60只，雌性，體重20～25g。

1.2 藥物與制劑取桔梗、元參、杏仁、橘皮、半夏、茯苓、甘草、生姜，加水煎煮3次，合并濾液，制成凍干粉于-80℃條件下儲存。

2 方法

2.1 桔梗元參湯對卵蛋白致小鼠過敏性鼻炎的治療作用

2.1.1 建立小鼠過敏性鼻炎模型采用 OVA混懸液腹腔注射及滴鼻造模法，參照文獻并改進[2]。將60只小鼠隨機分為六組，分別為對照組、模型組、陽性對照組、桔梗元參湯高、中、低劑量組。除OVA過敏性鼻炎模型制備外，其它各組在均于小鼠初次致敏第21天開始灌胃給藥，每日1次，連續(xù)治療21 d。

2.1.2 行為學觀察觀察小鼠噴嚏、抓搔、流涕。每7天觀察一次，用積分迭加法評分[3]。

2.1.3 嗜酸性粒細胞含量檢測通過檢測各組小鼠血液血細胞，以確定桔梗元參湯對血液嗜酸性粒細胞的影響。

2.1.4 IgE抗體水平變化體內(nèi)IgE水平增高是過敏性鼻炎的典型特征[4]。采用 ELISA法檢測血清OVA特異性IgE，于酶標儀490nm處測量OD值。

2.1.5 分泌淋巴細胞因子功能檢測眼球摘除法收集外周血，37℃靜置30min，收集血清，采用ELISA檢測試劑盒測定血清中 IL-4、IL-10、IFN-γ、IL-2濃度。

3 結(jié)果

3.1 桔梗元參湯顯著改善小鼠過敏性鼻炎癥狀連續(xù)用藥21d后，桔梗元參湯低、中、高劑量組均鼻炎癥狀均有改善，以中劑量組效果最佳，好轉(zhuǎn)率在70%以上，確定桔梗元參湯中劑量組作用14d為最佳治療濃度和時間（見圖1和圖2）。

圖1 桔梗元參湯對OVA致小鼠過敏性鼻炎癥狀的影響

圖2 過敏性鼻炎小鼠鼻炎癥狀組間好轉(zhuǎn)率比較

3.2 桔梗元參湯對嗜酸性粒細胞影響實驗結(jié)果顯示，桔梗元參湯作用14天后能夠顯著降低過敏性鼻炎小鼠外周血EOS百分含量及絕對值（見表1）。

表1 外周血EOS百分比及EOS計數(shù)

3.3 sIgE抗體水平變化桔梗元參湯能夠通過降低小鼠體內(nèi)sIgE含量發(fā)揮其治療作用（見圖3）。

3.4 小鼠血清Th1/Th2細胞因子水平變化桔梗元參湯顯著升高Th1淋巴細胞因子，降低Th2淋巴細胞因子，通過糾正Th1/Th2平衡失調(diào)發(fā)揮其治療作用（見表2）。

圖3 小鼠血清sIgE (OD值)

表2 小鼠血清Th1/Th2細胞因子含量(ng?L-1)

4 討論

過敏性鼻炎屬于中醫(yī)學“鼻鼽”、“鼽嚏”的范疇。鼻黏膜嗜酸性粒細胞（EOS）浸潤和 Th1/Th2平衡失調(diào)是過敏性鼻炎的重要病理學特征。西醫(yī)治療過敏性鼻炎以免疫療法和藥物治療為主，均存在不足。因此，尋找天然、高效、低毒的藥物為目前研究的熱點。

本實驗通過桔梗元參湯對過敏性鼻炎小鼠模型治療作用研究表明，桔梗元參湯能夠顯著改善過敏性鼻炎小鼠的癥狀，使其血清sIgE水平降低，鼻黏膜EOS浸潤減輕，并顯著升高Th1（IF-γ、IL-2）淋巴細胞因子，降低Th2（IL-4、IL-10）淋巴細胞因子。提示桔梗元參湯能夠通過調(diào)節(jié)機體免疫反應，糾正 Th1/Th2平衡失調(diào)發(fā)揮治療過敏性鼻炎的作用，具有非常好的臨床應用前景。

[1] 孫洽熙,黃元御醫(yī)學全書·四圣心源[M].2版.北京：中國中醫(yī)藥出版社,2009：848.

[2] JunejaL, HS Parmar. Ovalbumin induced allergic rhinitis and development of prediabetes to rats： possible role of th2 cytokines[J]. Inflamm Allergy Drug Targets, 2013,12(3)：199-205.

[3] Shin JH, SW Kim, YS Park. Role of NOD1-mediated signals in a mouse model of allergic rhinitis[J]. Otolaryngol Head Neck Surg, 2013,147(6)：1020-1026.

[4] Nishimura T. Existence of antigen-specific immunoglobulin E is not sufficient for allergic nasal eosinophil infiltration in mice[J]. Int Arch Allergy Immunol, 2013,161(2)：125-128.

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1673-5846(2013)07-0294-02

山東萬杰醫(yī)學院醫(yī)學系，山東淄博 255213