于萬(wàn)水胡廣云

（1 河南省鶴壁市中醫(yī)院，河南 鶴壁 458030；2 河南省鶴壁市?？h食品藥品檢驗(yàn)所，河南 鶴壁 456250）

坎地沙坦西酯片人體藥動(dòng)學(xué)和與必洛斯片的生物等效性及坎地沙坦吸收機(jī)制的研究

于萬(wàn)水1胡廣云2

（1 河南省鶴壁市中醫(yī)院，河南 鶴壁 458030；2 河南省鶴壁市浚縣食品藥品檢驗(yàn)所，河南 鶴壁 456250）

目的 研究評(píng)價(jià)坎地沙坦西酯片人體藥動(dòng)學(xué)和與必洛斯片的生物等效性研究。方法 藥動(dòng)學(xué)研究選取 20 例中國(guó)健康男性受試者口服8mg 坎地沙坦西酯片；生物等效性研究選擇 20 例受試者，隨機(jī)編號(hào)分成兩組，交叉給藥；建立 Caco-2 細(xì)胞模型，考察其生物等效性。結(jié)果 坎地沙坦西酯片 Cmax 約為 93ng/mL，Tmax 為 3～5h，T1/2為 9h，藥動(dòng)學(xué)個(gè)體差異較大；坎地沙坦西酯片與必洛斯片的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)無(wú)顯著差異，試驗(yàn)制劑與參比制劑等效。結(jié)論 本次試驗(yàn)研究中坎地沙坦西酯片的藥動(dòng)學(xué)特征，坎地沙坦西酯片與必洛斯片的生物等效性與國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道基本一致。

坎地沙坦西酯片；坎地沙坦；藥動(dòng)學(xué)；生物等效

坎地沙坦自身口服吸收差，臨床上多應(yīng)用其前藥，坎地沙坦西酯片。坎地沙坦西酯片在胃腸道吸收過(guò)程中，完全水解為坎地沙坦[2]。國(guó)外對(duì)坎地沙坦西酯片的研究較為深入全面，但國(guó)內(nèi)該藥的藥動(dòng)學(xué)及生物等效性方面的報(bào)道較少，本實(shí)驗(yàn)旨在研究坎地沙坦西酯片人體藥動(dòng)學(xué)和生物等效性特征，現(xiàn)敘述如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 藥品

試驗(yàn)制劑：坎地沙坦西酯片，天津武田藥品有限公司；規(guī)格：8mg/片；批號(hào)：110902；用法：口服；密閉、陰涼干燥處保存。參比制劑：必洛斯片，日本武田藥品有限公司；規(guī)格：8mg/片；批號(hào)：110902；用法：口服；密閉、陰涼干燥處保存。

1.1.2 研究對(duì)象

本實(shí)驗(yàn)共有20例中國(guó)男性健康受試者，受試者經(jīng)臨床檢查和生化檢查，并經(jīng)詢問(wèn)病史，證實(shí)所有受試者的入選標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)符合國(guó)家規(guī)定。

1.2 人體藥動(dòng)學(xué)和生物等效性研究

1.2.1 給藥方案

采用隨機(jī)、交叉的試驗(yàn)設(shè)計(jì)，20例受試者隨機(jī)編號(hào)，分為兩組，于給藥前一天晚上十點(diǎn)開(kāi)始禁食，給藥當(dāng)天早上空腹服用1片參比片或試驗(yàn)片（8mg），溫開(kāi)水送服。

1.2.2 血樣采集

采樣前預(yù)埋留置針頭，分別于給藥前（0h）及給藥后0.5h、1h、2h、3h、3.5h、4h、4.5h、5h、7h、9h、12h、24h、36h采集肘靜脈血5mL，立即離心（4000 r/min，10min），分離出血漿，分為實(shí)驗(yàn)管和備份管兩份，置于2mL聚乙烯管中，立即放入-20℃冰箱中凍存，同時(shí)記錄試驗(yàn)過(guò)程中的不良事件。

1.2.3 生物樣本分析

采用高效液相-熒光檢測(cè)法，色譜柱：Agilent C18柱（4.6× 150mm，5μm，Agilent，美國(guó)）；保護(hù)柱：Gemini C18（4×3.0mm，10μm，Phenomenex，美國(guó)）；流動(dòng)相：乙腈:磷酸緩沖鹽溶液（5mmol/L，pH=3.0）（42 : 58，v/v）；流速：1.0mL/min；柱溫：30℃；進(jìn)樣托盤(pán)溫度：4℃；熒光檢測(cè)器激發(fā)波長(zhǎng)：270nm；發(fā)射波長(zhǎng)：390nm；進(jìn)樣量：10μL。

1.2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)血漿樣本的配制與處理

配制濃度為2、5、10、20、50、100、200ng/mL等7個(gè)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)血漿樣本，取血漿樣本500μL，加入20μL內(nèi)標(biāo)溶液（100ng/mL的萘普生溶液），再加入4mL叔丁基甲醚，振蕩3min，離心5min（2000r/min），取上清液3mL，使用氮?dú)獯蹈桑詈笠?00μL流動(dòng)相復(fù)溶，進(jìn)樣分析。

1.2.3.2 方法專屬性

取6份來(lái)源不同的空白樣本和6份給藥后1h的臨床樣本，按照上述血漿樣本方法處理，進(jìn)樣分析，以考察該方法的專屬性。

1.2.3.3 精密度與準(zhǔn)確度

取低、中、高濃度（5、20、160ng/mL）的標(biāo)準(zhǔn)血漿樣本，每個(gè)濃度平行5份，按照上述血漿樣本方法處理，進(jìn)樣分析，連續(xù)3d重復(fù)該操作，以考察精密度和準(zhǔn)確度。用上述建立好的方法測(cè)定血漿中坎地沙坦的濃度，繪制藥時(shí)曲線，并使用WinNonlin軟件對(duì)不同時(shí)間點(diǎn)的血藥濃度進(jìn)行統(tǒng)計(jì)矩參數(shù)計(jì)算（NCA模塊）及模型擬合（PK模塊）計(jì)算房室參數(shù)。

1.2.4 生物統(tǒng)計(jì)

使用SPSS軟件對(duì)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)差異進(jìn)行比較、試驗(yàn)前后的主要檢查指標(biāo)等進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析以確定生物等效性。

1.2.5 等效性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)AUC和Cmax進(jìn)行生物等效性分析。當(dāng)試驗(yàn)制劑與參比制劑間AUC的90%置信區(qū)間在80%～125%等效區(qū)間內(nèi)，Cmax的90%置信區(qū)間在75%～133%等效區(qū)間內(nèi)，Tmax經(jīng)非參檢驗(yàn)無(wú)差異時(shí)認(rèn)為兩制劑生物等效。

2 結(jié) 果

2.1 高效液相-熒光檢測(cè)法

本試驗(yàn)中，高效液相-熒光檢測(cè)法測(cè)定血漿中坎地沙坦?jié)舛鹊姆椒ǚ€(wěn)定，專屬性好，空白無(wú)干擾，血漿中內(nèi)源性雜志不干擾測(cè)定。日間及日內(nèi)精密度良好，低、中、高濃度日內(nèi)精密度的RSD分別為3.2%、2.6%、2.5%，日間精密度的RSD分別為8.2%、3.3%、6.5%，均＜10%，滿足要求。各樣本的準(zhǔn)確度均在85%～115%范圍內(nèi)，符合要求。

2.2 藥動(dòng)學(xué)

經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析得出，口服給藥后3～4h達(dá)峰，生物利用度約為40%，坎地沙坦西酯片Cmax約為93ng/mL，Tmax約為3～4h，T1/2約為7～9h，藥動(dòng)學(xué)個(gè)體差異較大，具體藥動(dòng)學(xué)數(shù)據(jù)如表1所示。

表1 坎地沙坦西酯片藥動(dòng)學(xué)參數(shù)

2.3 生物等效性

經(jīng)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后的試驗(yàn)制劑（T）的AUC INF和AUClast在參比制劑（R）的80%～125%范圍，試驗(yàn)制劑的Cmax在參比制劑的70%～133%范圍，因此判定為本試驗(yàn)中兩種制劑等效。二者的平均藥時(shí)曲線圖比較見(jiàn)圖1。

圖1 試驗(yàn)制劑與參比制劑的平均藥時(shí)曲線圖

3 討 論

3.1 藥代動(dòng)力學(xué)及生物等效性

坎地沙坦西酯片的口服生物利用度為15%～40%左右。坎地沙坦可進(jìn)入血液循環(huán)，絕大部分經(jīng)腎臟排泄，少部分經(jīng)腸道或膽汁排泄，本試驗(yàn)得出該藥的半衰期為7.8h，但有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道認(rèn)為半衰期要更長(zhǎng)。單劑量（8mg劑量）口服表觀清除率為0.26L/（h·kg），患者個(gè)體差異較大，口服清除率為3.5～25L/h，目前國(guó)內(nèi)坎地沙坦藥動(dòng)學(xué)及生物等效性方面的研究較少，希望臨床上在這方面有更多更深入的研究。

3.2 吸收機(jī)制

Caco-2細(xì)胞是一種在體外條件培養(yǎng)的，結(jié)構(gòu)與小腸上皮細(xì)胞類似的體外細(xì)胞模型，能高效的表達(dá)多種蛋白和酶，國(guó)內(nèi)外廣泛應(yīng)用其研究藥物的吸收機(jī)制?？驳厣程沟奈辗绞綖楸粍?dòng)擴(kuò)散方式，在一定范圍內(nèi)無(wú)濃度依賴性，無(wú)pH依賴性。

3.3 坎地沙坦的研究進(jìn)展

坎地沙坦是由武田公司研發(fā)的口服AT1受體拮抗劑，具有強(qiáng)大的抑制血管收縮作用，降壓效果明顯，不良反應(yīng)及并發(fā)癥少[4]。長(zhǎng)期應(yīng)用坎地沙坦可逆轉(zhuǎn)心室肥厚，可用于充血性心衰的治療。有文獻(xiàn)報(bào)道，坎地沙坦具有保護(hù)器官的作用，可延緩腎小球的硬化，對(duì)末期腎病患者有一定的療效?？驳厣程沟氖褂脤?duì)糖尿病患者體內(nèi)的血糖、血脂水平?jīng)]有影響，可用于糖尿病合并高血壓患者。其對(duì)縮血管的拮抗作用，還能應(yīng)用于急性中風(fēng)患者的早期治療[5]?？傊驳厣程故前踩?、高效、高親和力的AT1受體拮抗劑，由于其各方面的優(yōu)越特性，其臨床評(píng)價(jià)相當(dāng)高，值得進(jìn)一步的研究探討。

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