溫家根，周宏灝，張 偉

(中南大學(xué)臨床藥理研究所，湖南省遺傳藥理學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖南長沙 410078)

近年來，許多上市藥物如西布曲明、西立伐他汀等由于其嚴(yán)重的不良反應(yīng)被撤市，后續(xù)研究發(fā)現(xiàn)這些不良反應(yīng)均與藥物相關(guān)生物標(biāo)記的遺傳多態(tài)性有關(guān)［1］。目前，生物標(biāo)記的遺傳多態(tài)性與藥物療效及毒性的研究獲得了突破性進(jìn)展，以藥物基因組學(xué)為基礎(chǔ)的藥物研究平臺受到了各大制藥公司和藥物研究機(jī)構(gòu)的青睞，應(yīng)用藥物基因組學(xué)已成功開發(fā)出了曲妥珠單抗(赫塞汀)、吉菲替尼、威羅菲尼等腫瘤靶向藥物。此外，對已上市藥物的遺傳藥理學(xué)研究，同樣可以指導(dǎo)臨床合理用藥，如華法林、阿巴卡韋等。與傳統(tǒng)的研究方法相比，藥物基因組學(xué)平臺的應(yīng)用將有助于縮短藥物開發(fā)周期、降低研究成本及藥物的毒副作用［2］。本文將介紹近年來藥物基因組學(xué)的轉(zhuǎn)化和應(yīng)用概況。

1 藥物安全性有效性與藥物基因組學(xué)

藥物的安全性和有效性是新藥開發(fā)和臨床用藥的核心問題。據(jù)統(tǒng)計(jì)，絕大多數(shù)藥物在約1/3的使用者中不能取得滿意療效，約1/6的使用者發(fā)生不同程度的毒副反應(yīng)，總安全有效率不到50%［3］。美國食品藥物管理局(FDA)的數(shù)據(jù)也表明，美國約50%的病人初次服藥時(shí)使用著錯(cuò)誤的種類或劑量，每年死于藥物不良反應(yīng)的人數(shù)為10萬人，因此而住院的人數(shù)為220萬/年，造成的經(jīng)濟(jì)損失高達(dá)1770億美元［4］。近20年來，由于嚴(yán)重不良反應(yīng)被FDA召回的藥物多達(dá)40余種，給制藥企業(yè)造成的損失約400億美元，其中認(rèn)為與遺傳因素相關(guān)或很可能相關(guān)的品種約有10種，約占撤市藥物總數(shù)的25%，涉及的基因包括Ⅰ相代謝酶CYP450s、Ⅱ相代謝酶UGTs、轉(zhuǎn)運(yùn)體SLC家族、離子通道hERG、受體5-HT 等［1］。

藥物代謝酶、藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體和作用靶點(diǎn)，即藥物相關(guān)生物標(biāo)記，與藥物的藥代動(dòng)力學(xué)、藥效動(dòng)力學(xué)及毒副作用等關(guān)系密切。藥物相關(guān)生物標(biāo)記的個(gè)體差異，尤其是一些能夠明顯影響代謝酶、轉(zhuǎn)運(yùn)體及作用靶點(diǎn)的多態(tài)性，引起了體內(nèi)血藥濃度的變化及藥物反應(yīng)的異常，導(dǎo)致不良反應(yīng)出現(xiàn)及藥物的不敏感。例如，2010年，減肥藥西布曲明(曲美)因發(fā)生嚴(yán)重心血管不良反應(yīng)而被撤市［5］。早在2008年周宏灝院士等與韓國研究者共同發(fā)表的權(quán)威報(bào)道中，西布曲明便被證實(shí)在體內(nèi)可被高度遺傳多態(tài)性的藥物代謝酶CYP2B6所代謝，CYP2B6基因多態(tài)性可導(dǎo)致酶活性降低70% －100%［6］。突變者體內(nèi)西布曲明的平均濃度增加252%，代謝產(chǎn)物增加148%，其明顯增高的藥物濃度極可能造成嚴(yán)重心血管毒性。同時(shí)，西布曲明可抑制hERG離子通道，延長QT間期，從而誘發(fā)長QT間期綜合征(LQTS)，導(dǎo)致心跳驟停［7－8］。又如，2001年，西立伐他汀因?qū)е铝?1例嚴(yán)重橫紋肌溶解致死事件而被撤市［9］。后續(xù)研究證實(shí)，SLCO1B1基因521T＞C多態(tài)性是他汀類藥物主要不良反應(yīng)橫紋肌溶解的獨(dú)立決定因子，對于預(yù)測和預(yù)防他汀類藥物的肌毒性具有關(guān)鍵作用［10－11］。而具有類似毒性的同類藥物辛伐他汀、阿托伐他汀和瑞舒伐他汀等因及時(shí)修改藥品說明書，警告SLCO1B1基因521T＞C多態(tài)性攜帶者應(yīng)調(diào)整藥物劑量至25%－50%，仍然在市場上占據(jù)重要地位。

2 藥物基因組學(xué)的發(fā)展

19世紀(jì)50年代首先由Motulsky和Vogel提出了遺傳藥理學(xué)這一概念，早期遺傳藥理學(xué)主要闡釋了藥物代謝酶的異常與藥物應(yīng)答的關(guān)系，而后，普萘洛爾代謝和反應(yīng)的種族差異的發(fā)現(xiàn)證實(shí)了代謝酶的表型具有種族特異性［3］。1990年，美國正式啟動(dòng)了國際人類基因計(jì)劃(HGP)，隨著計(jì)劃的進(jìn)行，1997年藥物基因組學(xué)的概念被正式提出。2002年人類基因組計(jì)劃完成，所有兩萬個(gè)人類基因序列已被闡明，藥物基因組的研究更加深入。從2005年開始，全基因組關(guān)聯(lián)研究(GWAS)提供了很多疾病的易感位點(diǎn)，后續(xù)研究發(fā)現(xiàn)很多位點(diǎn)都與藥物的應(yīng)答相關(guān)，而基于藥物療效的GWAS則可以發(fā)現(xiàn)更多的藥物相關(guān)基因，彌補(bǔ)了候選基因研究的不足，同時(shí)也為GWAS研究成果的轉(zhuǎn)化帶來了曙光［12］。高通量測序技術(shù)的發(fā)展和生物芯片技術(shù)的完善，使得藥物基因?qū)W的研究變得更加簡單快捷，全基因組分型應(yīng)用到個(gè)體化臨床診斷與治療成為可能［13］。

藥物基因組學(xué)的研究內(nèi)容也在不斷更新，在藥物基因組學(xué)研究的起步階段，藥物代謝酶、轉(zhuǎn)運(yùn)體、藥物靶點(diǎn)的單核苷酸多態(tài)性(SNPs)是研究焦點(diǎn)［14］。然而，SNPs只能在一定程度上闡釋藥物在不同人體及群體間藥代動(dòng)力學(xué)和藥效動(dòng)力學(xué)的差異，藥物基因組學(xué)的研究逐漸轉(zhuǎn)向基因的拷貝數(shù)變異(CNV)及甲基化、mircoRNA 等表觀遺傳水平［15］。Ebert等［16］在研究結(jié)直腸癌治療時(shí)，發(fā)現(xiàn)腫瘤組織TFAP2E高甲基化后，DKK4表達(dá)水平升高，結(jié)腸癌對氟尿嘧啶出現(xiàn)嚴(yán)重的耐藥，患者預(yù)后分極明顯。其次，從生殖細(xì)胞藥物基因組學(xué)向癌癥藥物基因組學(xué)發(fā)展。在心血管、精神類、代謝類、傳染性疾病中，生殖細(xì)胞遺傳基因可以在很大程度上決定藥物應(yīng)答的個(gè)體差異，然而在腫瘤疾病中，腫瘤組織基因組出現(xiàn)很大變異，變異不僅與腫瘤的發(fā)生相關(guān)，還直接決定了化療藥物的敏感性。因此，可針對腫瘤特異基因設(shè)計(jì)靶向藥物，目前，成功開發(fā)的腫瘤靶向藥物已有曲妥珠單抗、吉菲替尼、威羅菲尼等，腫瘤藥物基因組已經(jīng)成為了藥物基因組學(xué)的研究重點(diǎn)。最后，藥物基因組學(xué)研究的另一趨勢是從藥物的單基因變異效應(yīng)向多基因遺傳變異的綜合效應(yīng)發(fā)展。藥物可以通過多個(gè)環(huán)節(jié)、多條途徑發(fā)揮作用，同樣疾病也可以通過多條途徑影響藥物的作用。例如，CYP2C9和VKORC1基因的變異只能解釋40%患者間華法林用藥劑量的差異，而CYP4F2及其他疾病因素對華法林用藥劑量也有著很大的影 響［17］。Patel 等［18］發(fā) 現(xiàn) FLT3-ITD、MLL-PTD、PHF6、ASXL1、IDH2、CEBPA等基因突變的共同效應(yīng)與急性骨髓系白血病患者柔紅霉素治療的預(yù)后明顯相關(guān)。

近10年來，藥物基因組學(xué)在藥物研發(fā)及個(gè)體化用藥中越來越受重視。2005年，國際“遺傳藥理學(xué)研究網(wǎng)絡(luò)”(PGRN)正式成立，明確地闡釋了藥物基因型與藥物應(yīng)答的關(guān)系，使用藥物基因組學(xué)的研究結(jié)果改善疾病的治療方案，將人類基因數(shù)據(jù)囊括到疾病預(yù)防、個(gè)體化用藥的日常臨床規(guī)范中［19］。同年，“遺傳藥理學(xué)與藥物基因組學(xué)知識庫”(PharmGKB)也建立完善，該數(shù)據(jù)庫為研究者們及臨床醫(yī)生提供了眾多藥物基因組學(xué)信息［20－21］。2007年，以“藥物基因組學(xué)/生物標(biāo)記與新藥開發(fā)的管理決策”為主題的“第四屆美國食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)—制藥企業(yè)研討會(huì)”在Bethesda召開，此舉由美國食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)、藥物基因組學(xué)工作組(PWG)、美國藥品研究和生產(chǎn)協(xié)會(huì)(PhRMA)、美國生物技術(shù)工業(yè)組織(BIO)和藥品信息協(xié)會(huì)(DIA)等組織共同聯(lián)合發(fā)起，旨在將藥物基因組學(xué)與生物標(biāo)記全面應(yīng)用于新藥開發(fā)的管理決策。同時(shí)，各發(fā)達(dá)國家及地區(qū)紛紛出臺相關(guān)的規(guī)范，以加快藥物基因組學(xué)的轉(zhuǎn)化與應(yīng)用(見Tab 1)。

表1 各國發(fā)布的藥物基因組學(xué)相關(guān)規(guī)范

3 藥物基因組學(xué)在藥物研發(fā)各階段中的應(yīng)用

目前，除極少數(shù)抗腫瘤藥物是在藥物基因組學(xué)的指導(dǎo)下進(jìn)行研發(fā)，大部分藥物仍遵循傳統(tǒng)的研發(fā)路線，缺少了藥物相關(guān)遺傳標(biāo)志物的數(shù)據(jù)。然而，將藥物基因組學(xué)全面應(yīng)用到藥物研究各階段十分必要:對于新藥研發(fā)，從新化合物的發(fā)現(xiàn)直至臨床實(shí)驗(yàn)的結(jié)束，均可進(jìn)行藥物基因組學(xué)的相關(guān)研究，從而縮短藥物研發(fā)的周期，降低藥物研發(fā)成本;對于上市藥物，尤其是價(jià)格低廉療效確切但具有潛在風(fēng)險(xiǎn)的藥物，進(jìn)行藥物基因組學(xué)的再評價(jià)，可以發(fā)現(xiàn)潛在的風(fēng)險(xiǎn)基因位點(diǎn)，增強(qiáng)藥物安全性，避免撤市，甚至可以使撤市藥物重新上市。

3.1臨床前研究臨床前研究包括了新化合物的發(fā)現(xiàn)、藥理毒理研究、細(xì)胞及動(dòng)物模型的研究，而藥物基因組學(xué)在藥物臨床前研究的各階段均可發(fā)揮重要的作用。首先，在抗腫瘤藥物的開發(fā)中，針對腫瘤特異性標(biāo)記物設(shè)計(jì)的靶向藥物在癌癥治療中的地位日益重要。曲妥珠單抗的研發(fā)成功揭開了腫瘤靶向藥物治療的序幕，該藥物靶向性抑制乳腺癌細(xì)胞HER2受體的功能，使得HER2陽性患者獲益［24］。2002年，Sanger研究機(jī)構(gòu)發(fā)現(xiàn)60%的黑色素瘤患者均出現(xiàn)了BRAFV600E突變，突變后黑色素瘤出現(xiàn)持續(xù)增殖和凋亡抑制，而威羅菲尼(Vemurafinib)可以特異性地阻斷BRAF途徑，抑制黑色素瘤［25－27］。2007年，ALK融合基因被發(fā)現(xiàn)，并被認(rèn)為是NSCLC部分亞型中的促癌變因子，ALK基因重排的發(fā)生約占NSCLC患者的3%［28－29］。同年發(fā)現(xiàn)克唑替尼(Crizotinib)具有明顯抑制ALK和c-Met受體的功能，抑制ALK陽性腫瘤的發(fā)展［30］，該藥最終于2011年8月上市，用于NSCLCALK的治療。其次，對新化合物的研究，應(yīng)在藥物基因組學(xué)的指導(dǎo)下，明確藥物在體內(nèi)的代謝過程和藥效過程中所涉及的通路，推測潛在靶點(diǎn)、信號通路和藥動(dòng)學(xué)過程(吸收、分布、代謝、排泄，簡稱ADME)相關(guān)蛋白的遺傳變異對藥物處置及應(yīng)答的影響，設(shè)計(jì)體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。此外，必要時(shí)，還應(yīng)該利用定點(diǎn)誘變技術(shù)構(gòu)建細(xì)胞模型及使用基因敲除小鼠模型，對藥物相關(guān)的基因位點(diǎn)進(jìn)行研究，為臨床研究提供充足的證據(jù)。

3.2臨床研究

3.2.1Ⅰ臨床研究中，應(yīng)當(dāng)選擇具有藥物相關(guān)的代謝酶和轉(zhuǎn)運(yùn)體的多態(tài)性的受試者，對臨床前研究中發(fā)現(xiàn)的藥物代謝轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)基因靶點(diǎn)進(jìn)行驗(yàn)證，更加精確地預(yù)測藥物的個(gè)體化使用劑量。由于Ⅰ、Ⅱ臨床實(shí)驗(yàn)的人數(shù)有限，可采用回顧性研究的方法對相關(guān)性不強(qiáng)的生物標(biāo)記進(jìn)行研究，初步推測及估計(jì)各標(biāo)記在藥物反應(yīng)中的作用。

3.2.2Ⅲ期臨床研究提供很多藥物在患者體內(nèi)的療效、毒性及藥代動(dòng)力學(xué)方面的數(shù)據(jù)，為確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，在該期應(yīng)更多地采用前瞻性研究策略，選取潛在可獲益(療效好，毒性可能性低)的特定基因型人群，排除潛在不可獲益(無效和毒性可能性高)人群。由于入組的病例具有較大的一致性，所需的病例數(shù)較傳統(tǒng)Ⅲ期臨床研究有所降低，例如，克唑替尼臨床實(shí)驗(yàn)只招募255名局部晚期或轉(zhuǎn)移的ALK陽性NSCLC患者，由于其療效明顯，該藥很快被 FDA批準(zhǔn)上市［31］。而在威羅菲尼Ⅲ期臨床研究中，入組的病人僅為132例BRAF-V600E黑色素瘤患者，患者使用威羅菲尼后，總體生存期延長至16個(gè)月［32］。此外，該期也可以對一些基因的突變進(jìn)行回顧性研究，如抗癌藥西曲昔單抗和帕尼單抗可以靶向EGFR受體，而KRAS是EGFR下游信號，KRAS基因12號外顯子突變，則導(dǎo)致EGFR靶向藥物敏感性降低［33－34］，若Ⅲ期臨床研究能對KRAS突變進(jìn)行回顧性研究，必然會(huì)節(jié)省大量時(shí)間和經(jīng)費(fèi)，精確定位EGFR靶向藥物的獲益人群。Ⅲ期臨床研究融入藥學(xué)基因組學(xué)的主要任務(wù)在于評估基因型與藥物效應(yīng)之間的關(guān)系;同時(shí)，其另一個(gè)重要任務(wù)是開發(fā)相關(guān)基因分析的方法及試劑盒，并進(jìn)行質(zhì)量評價(jià)，確?；蚍中蛯傩院蜏?zhǔn)確性。

3.2.3藥物毒性過敏反應(yīng)應(yīng)該是Ⅳ期臨床研究應(yīng)關(guān)注的重點(diǎn)。Ⅳ期臨床研究應(yīng)針對藥物毒副作用進(jìn)行藥物基因組學(xué)的再評價(jià)(如過敏相關(guān)的HLA基因突變位點(diǎn))，發(fā)現(xiàn)藥物毒副作用的遺傳標(biāo)記物，最終完善藥物標(biāo)簽，避免藥物因嚴(yán)重藥害事件而退市。

3.3上市藥物再評價(jià)目前，大部分上市藥物在研發(fā)時(shí)均未進(jìn)行藥物基因組學(xué)的研究，且其中很大一部分藥物的安全性有效性受到了質(zhì)疑，因此上市藥物的再評價(jià)顯得尤為重要。華法林的藥物基因組學(xué)研究是目前最成功的一個(gè)案例，CYP2C9和VKORC1兩個(gè)基因突變的發(fā)現(xiàn)，使得預(yù)測華法林的個(gè)體化用藥劑量成為可能，華法林的安全性大大提升［35］。又如，5%的阿巴卡韋白人使用者可發(fā)生嚴(yán)重過敏反應(yīng)，而針對HLA-B*5701的一項(xiàng)臨床實(shí)驗(yàn)(在基因未分型和排除基因型為HLA-B*5701的兩組受試者中進(jìn)行)發(fā)現(xiàn):在排除HLAB*5701基因型的受試者中未出現(xiàn)免疫相關(guān)的過敏反應(yīng)［36］。根據(jù)這一結(jié)果，F(xiàn)DA在2008年對阿巴卡韋的藥品說明書進(jìn)行了修改。最近，Liao等［37］發(fā)現(xiàn)使用阿斯匹林可以明顯延長結(jié)直腸癌PIK3CA突變患者的生存期，而野生型則無變化，該研究提示PIK3CA突變的直腸癌患者應(yīng)當(dāng)輔助使用阿司匹林。對于一些公認(rèn)的影響藥物作用的基因靶標(biāo)國外已有專門的試劑盒，能夠快速特異地進(jìn)行患者的基因分型，臨床醫(yī)生和臨床藥師可根據(jù)測試的結(jié)果對藥物的使用進(jìn)行調(diào)整。在研究上市藥物的藥物基因組學(xué)時(shí)，選擇的藥物應(yīng)當(dāng)是療效差異明顯、不良反應(yīng)出現(xiàn)率高，針對特定的疾病無更加安全有效且價(jià)格低廉的藥物。通過以上手段，避免一些療效確切且價(jià)格低廉的藥物因潛在風(fēng)險(xiǎn)而被淘汰，節(jié)省新藥開發(fā)的費(fèi)用，同時(shí)排除了具有潛在風(fēng)險(xiǎn)的患者，增強(qiáng)藥物的安全性。

4 展望

隨著人類基因組學(xué)和藥物基因組學(xué)研究的發(fā)展，遺傳因素和基因多態(tài)性已被認(rèn)為是造成藥物毒性和療效差異的首要原因，藥物作用靶點(diǎn)也由原來所認(rèn)為的500個(gè)增至2 000個(gè)，并由此為藥物研發(fā)帶來了無限商機(jī)［38］。在藥物研發(fā)各階段全面開展藥物基因組學(xué)研究可從源頭最大限度遏制嚴(yán)重藥害事件，降低治療失效的比例，并可研發(fā)具有高科技附加值的全新藥物，努力趕超歐美制藥強(qiáng)國。最后，此舉還可明顯增進(jìn)國民健康，減少醫(yī)患糾紛，為國家節(jié)省大量的醫(yī)療資源和衛(wèi)生保險(xiǎn)開支，從而獲得巨大的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。

［1］Zhang W，Roederer M W，Chen W Q，et al.Pharmacogenetics of drugs withdrawn from the market［J］.Pharmacogenomics，2012，13(2):223－31.

［2］張 偉，周宏灝.藥物基因組學(xué)和個(gè)體化醫(yī)學(xué)的轉(zhuǎn)化研究進(jìn)展［J］.藥學(xué)學(xué)報(bào)，2011，46(1):1－5.

［2］Zhang W，Zhou H H.Translational approach for pharmacogenomics and personalized medicine［J］.Acta Pharm Sin，2011，46(1):1－5.

［3］周宏灝，遺傳藥理學(xué)的應(yīng)用意義［M］//周宏灝，張偉，主編.新編遺傳藥理學(xué).北京:人民軍醫(yī)出版社，2011:20－6.

［3］Zhou H H，The significance in application of Pharmacogenetics［M］//Zhou H H，Zhang W，edit.Xinbian Yichuanyaolixue.Beijing:People's Militray Medical Press，2011:20 －6.

［4］WHO.Promoting rational use of medicines:Core Components——WHO Policy Perspectives on Medicines 5［R］.WHO，Geneva，Switzerland(2002).

［5］范 嵐，彭向東，郭志華，等.CYP450氧化還原酶的遺傳多態(tài)性對藥物代謝的影響［J］.中國藥理學(xué)通報(bào)，2009，25(9):1131－3.

［5］Fan L，Peng X D，Guo Z H，et al.Genetic polymorphisms of cytochrome P450 oxidoreductase and its effect of drug metabolism［J］.Clin Pharmacol Bull，2009，25(9):1131 －3.

［6］Bae S K，Cao S，Seo K A，et al.Cytochrome P450 2B6 catalyzes the formation of pharmacologically active sibutramine(N-{1-［1-(4-chlorophenyl)cyclobutyl］-3-methylbutyl}-N， N-dimethylamine)metabolites in human liver microsomes［J］.Drug Metab Dispos，2008，36(8):1679 －88.

［7］Kim K S，Kim E J，Lee H A，et al.Effect of sibutramine HCl on cardiac hERG K+channel［J］.Mol Cell Biochem，2009，320(1-2):125－31.

［8］Harrison-Woolrych M，Clark D W，Hill G R，et al.QT interval prolongation associated with sibutramine treatment［J］.Br J Clin Pharmacol，2006，61(4):464－9.

［9］Staffa J A，Chang J，Green L.Cerivastatin and reports of fatal rhabdomyolysis［J］.N Engl J Med，2002，346(7):539 －40.

［10］Vladutiu G D，Isackson P J.SLCO1B1 variants and statin-induced myopathy［J］.N Engl J Med，2009，360(3):304.

［11］Kameyama Y，Yamashita K，Kobayashi K，et al.Functional characterization of SLCO1B1(OATP-C)variants，SLCO1B1*5，SLCO1B1*15 and SLCO1B1*15+C1007G，by using transient expression systems of HeLa and HEK293 cells［J］.Pharmacogenet Genomics，2005，15(7):513 －22.

［12］Zhou K，Pearson E R.Insights from genome-wide association studies of drug response［J］.Annu Rev Pharmacol Toxicol，2013，53:299－310.

［13］Cordero P，Ashley E A.Whole-genome sequencing in personalized therapeutics［J］.Clin Pharmacol Ther，2012，91(6):1001 －9.

［14］Crews K R，Hicks J K，Pui C H，et al.Pharmacogenomics and individualized medicine:translating science into practice［J］.Clin Pharmacol Ther，2012，92(4):467 －75.

［15］Kacevska M，Ivanov M，Ingelman-Sundberg M.Epigenetic-dependent regulation of drug transport and metabolism:an update［J］.Pharmacogenomics，2012，13(12):1373 －85.

［16］Ebert M P，Tanzer M，Balluff B，et al.TFAP2E-DKK4 and chemoresistance in colorectal cancer［J］.N Engl J Med，2012，366(1):44－53.

［17］Cooper G M，Johnson J A，Langaee T Y，et al.A genome-wide scan for common genetic variants with a large influence on warfarin maintenance dose［J］.Blood，2008，112(4):1022 －7.

［18］Patel J P，Gonen M，F(xiàn)igueroa M E，et al.Prognostic relevance of integrated genetic profiling in acute myeloid leukemia［J］.N Engl J Med，2012，366(12):1079－89.

［19］彭 娟，譚勝藍(lán)，周宏灝，等.華法林藥物基因組學(xué)和個(gè)體化用藥［J］.中國藥理學(xué)通報(bào)，2013，29(2):169－72.

［19］Peng J，Tan S L，Zhou H H，et al.Pharmacogenomics of warfarin and its personalized treatment［J］.Chin Pharmacol Bull，2013，29(2):169－72.

［20］Owen R P，Klein T E，Altman R B.The education potential of the pharmacogenetics and pharmacogenomics knowledge base(PharmGKB)［J］.Clin Pharmacol Ther，2007，82(4):472 －5.

［21］Thorn C F，Klein T E，Altman R B.Pharm GKB:the pharmacogenetics and pharmacogenomics knowledge base［J］.Methods Mol Biol，2005，311:179 －91.

［22］Little S.The impact of FDA guidance on pharmacogenomic data submissions on drug development［J］.IDrugs，2005，8(8):648 － 50.

［23］Akihiro I，Satoshi T，Yoshiaki U.Current Japanse regulatory situations of pharmacogenomics in drug administration［J］.Expert Rev Clin Pharmacol，2008，1(4):505 －14.

［24］Eiermann W.Trastuzumab combined with chemotherapy for the treatment of HER2-positive metastatic breast cancer:pivotal trial data［J］.Ann Oncol，2001，12，:S57 －62.

［25］Yang H，Higgins B，Kolinsky K，et al.RG7204(PLX4032)，a selective BRAFV600E inhibitor，displays potent antitumor activity in preclinical melanoma models［J］.Cancer Res，2010，70(13):5518－27.

［26］Gray-Schopfer V，Wellbrock C，Marais R.Melanoma biology and new targeted therapy［J］.Nature，2007，445(7130):851 －7.

［27］Davies H，Bignell G R，Cox C，et al.Mutations of the BRAF gene in human cancer［J］.Nature，2002，417(6892):949 － 54.

［28］Soda M，Choi Y L，Enomoto M，et al.Identification of the transforming EML4-ALK fusion gene in non-small-cell lung cancer［J］.Nature，2007，448(7153):561－6.

［29］Rikova K，Guo A，Zeng Q，et al.Global survey of phosphotyrosine signaling identifies oncogenic kinases in lung cancer［J］.Cell，2007，131(6):1190 －203.

［30］Christensen J G，Zou H Y，Arango M E，et al.Cytoreductive antitumor activity of PF-2341066，a novel inhibitor of anaplastic lymphoma kinase and c-Met，in experimental models of anaplastic large-cell lymphoma［J］.Mol Cancer Ther，2007，6(12 Pt 1):3314－22.

［31］Camidge D R，Bang Y J，Kwak E L，et al.Activity and safety of crizotinib in patients with ALK-positive non-small-cell lung cancer:updated results from a phase 1 study［J］.Lancet Oncol，2012，13(10):1011－9.

［32］Sosman J A，Kim K B，Schuchter L，et al.Survival in BRAF V600-mutant advanced melanoma treated with vemurafenib［J］.N Engl J Med，2012，366(8):707－14.

［33］Messner I，Cadeddu G，Huckenbeck W，et al.KRAS p.G13D mutations are associated with sensitivity to anti-EGFR antibody treatment in colorectal cancer cell lines［J］.J Cancer Res Clin Oncol，2013，139(2):201 －9.

［34］Kullmann F，Hartmann A，Stohr R，et al.KRAS mutation in metastatic pancreatic ductal adenocarcinoma:results of a multicenter phaseⅡstudy evaluating efficacy of cetuximab plus gemcitabine/oxaliplatin(GEMOXCET)in first-line therapy［J］.Oncol Basel，2011，81(1):3－8.

［35］Johnson J A，Gong L，Whirl-Carrillo M，et al.Clinical pharmacogenetics implementation consortium guidelines for CYP2C9 and VKORC1 genotypes and warfarin dosing［J］.Clin Pharmacol Ther，2011，90(4):625－29.

［36］Mallal S，Phillips E，Carosi G，et al.HLA-B*5701 screening for hypersensitivity to abacavir［J］.N Engl J Med，2008，358(6):568－79.

［37］Liao X，Lochhead P，Nishihara R，et al.Aspirin use，tumor PIK3CA mutation，and colorectal-cancer survival［J］.N Engl J Med，2012，367(17):1596－606.

［38］Jungic S，Tubic B，Skrepnik T.The role of biomarkers in the development of novel cancer therapies［J］.Drug Metabol Drug Interact，2012，27(2):89 －99.