楊紅澎　黃亮　班立桐　王玉　董在成

摘 要：對采集于天津市寧河縣七里海地區(qū)蘆葦?shù)氐囊吧⒐饺斈⑦M行了形態(tài)學和rDNA ITS區(qū)段克隆測序及序列特征比較分析鑒定。 結(jié)果表明，采集的這種野生蘑菇為蠟傘科（Hygrophoropsidaceae）、擬蠟傘屬（Hygrophoropsis）蘑菇。

關鍵詞：葦蘑；蠟傘科；擬蠟傘屬

中圖分類號：S646.9 文獻標識碼：A DOI編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2013.05.014

天津市寧河縣七里海地區(qū)蘆葦?shù)禺a(chǎn)葦蘑。每當盛夏溽暑綿雨過后，蘆林葦海中多年敗葉腐草厚積，形成難得的底質(zhì)、濕度、溫度和光照，葦蘑便蒸郁而生。人們采集后，或鮮食，或曬干食用，味道極其鮮美，遠勝于其他蘑菇。在文獻調(diào)研中，筆者發(fā)現(xiàn)國內(nèi)外關于葦蘑的報道廖廖無幾，而且天津七里海葦蘑與一些報道注明的種屬形態(tài)不是很一致[1-2]。鑒于此，從其形態(tài)特征和DNA測序的角度對其進行了鑒定。確定其為蠟傘科（Hygrophoropsidaceae）、擬蠟傘屬（Hygrophoropsis）蘑菇。

1 材料和方法

1.1 材 料

2012年7月22日采集子實體于天津市寧河縣七里?；吹硖J葦?shù)?。選取形態(tài)完整、新鮮、菌肉肥厚、七八成熟、未被昆蟲啃食的子實體，用鏟連同基物一齊采下，詳細記錄子實體形態(tài)特征。掛上號牌，用吸水軟紙折成漏斗狀，菌柄向下包好，放入標本盒內(nèi)，送往中國科學院微生物研究所進行科屬鑒定。實物標本保存在天津農(nóng)學院菌物標本室和中國科學院微生物研究所菌物標本館。

1.2 方 法

1.2.1 形態(tài)特征描述 按常規(guī)方法觀察子實體的形態(tài)結(jié)構(gòu)， 并測量菌蓋直徑以及菌柄長度、直徑等；菌褶徒手切片，在顯微鏡下觀察孢子的形態(tài)、色澤和大小。

1.2.2 基因組DNA提取 取測試菌株，外部清潔后，掰開子實體，取里面未受污染的部分，液氮研磨處理后分裝，-80 ℃超低溫冰箱保存?zhèn)溆肹3-4]。取0.2 g左右研磨好的樣品，按參考文獻[3， 5-6]采用KI法對基因組DNA進行提取。然后將提取的DNA保存于-20 ℃?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3 rDNA ITS序列的擴增、克隆、測序及序列比較 采用通用引物LR0R和LR5擴增核糖體大亞基（nrDNA-LSU）D1～D2區(qū)段，測序、BLAST比較[7-9]。

LR0R： 5- ACCCGCTGAACTTAAGC -3

LR5： 5- TCCTGAGGGAAACTTCG -3

序列測定由北京諾賽基因組研究中心有限公司完成。

2 結(jié)果與分析

2.1 形態(tài)特征

子實體中等大，菌蓋直徑3.0～9.5 cm，幼時稍扁平，成熟后呈下凹狀，表面檸檬黃色，中部色稍深，邊緣內(nèi)卷，光滑。菌肉黃色。菌褶黃色，稍稀，延生（圖1）。菌柄長2.5～6.0 cm，粗0.5～1.4 cm，圓柱形，向下稍粗，污黃色，內(nèi)實。孢子無色，光滑，橢圓形，2.6～4.3 μm×5.1～7.7 μm。夏季群生或單生于蘆葦叢中地上。

2.2 rDNA ITS序列測序結(jié)果

包括核糖體大亞基D1～D2區(qū)的大部分序列。從核糖體大亞基D1～D2區(qū)序列比較分析，其序列與屬于黃擬蠟傘（Hygrophoropsis aurantiaca） 的28SrDNA（NCBI號碼AY586659.1）序列相似率為93%。

3 結(jié)論與討論

最早關于葦蘑的報道是新疆王秀云等[1]描述發(fā)現(xiàn)的葦蘑孢子為印褐色。2005年呂紹生[2]報道葦蘑這一蘑菇名稱，拉丁文為Agaricus Campestris。Agaricus Campestris為傘菌屬蘑菇[10-11]，孢子褐色， 光滑， 橢圓形[11]。筆者采集的葦蘑經(jīng)顯微鑒別，發(fā)現(xiàn)孢子為無色，光滑，橢圓形。擬蠟傘屬黃擬蠟傘蘑菇子實體小型至中型。菌蓋初期邊緣內(nèi)卷， 中央部位凹陷， 后期稍平展。表面平滑，橙黃色， 干后橙紅色，邊緣往往淺色。菌肉薄， 白色或黃白色， 有香味。菌褶橘黃色， 延生， 密， 窄， 有橫脈。菌柄淡褐色，基部有短絨毛，孢子無色，光滑，橢圓形，孢子印奶油色，未見囊狀體。菌絲具有鎖狀聯(lián)合[12-13]。結(jié)合標本形態(tài)特征發(fā)現(xiàn)其也具有上述類似特征。

從核糖體大亞基D1～D2區(qū)序列比較分析，并結(jié)合標本形態(tài)特征，鑒定其為擬蠟傘科（Hygrophoropsidaceae）、擬蠟傘屬（Hygrophoropsis）蘑菇。

致謝：葦蘑鑒定由中國科學院微生物研究所文華安研究員協(xié)助完成，特此表示感謝。

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