鄭偉
【摘要】目的應(yīng)用三種不同的梅毒檢測(cè)方法測(cè)定血清標(biāo)本梅毒抗體并評(píng)價(jià)檢測(cè)結(jié)果。方法收集梅毒患者血標(biāo)本100例,分別采用TPPA、TRUST、ACONSYP(SYP)三種方法檢測(cè)。結(jié)果在100例梅毒患者血清中,通過(guò)TPPA、TRUST、ACONSYP(SYP)三種方法檢測(cè)均呈陽(yáng)性的有93例,其中有98例TPPA檢驗(yàn)呈陽(yáng)性,有93例TRUST檢驗(yàn)呈陽(yáng)性,96例SYP檢驗(yàn)呈陽(yáng)性。在120例非梅毒對(duì)照組中,有116例經(jīng)TP-ELISA檢測(cè)呈陰性,其特異性為96.67%。結(jié)論TPPA、TRUST、ACONSYP(SYP)三種檢測(cè)方法均存在一定的假陽(yáng)性和假陰性現(xiàn)象,為避免此現(xiàn)象對(duì)梅毒檢出率的影響,可對(duì)TP—ELISA檢驗(yàn)呈陽(yáng)性的標(biāo)本,做TRUST和TPPA 復(fù)檢。
【關(guān)鍵詞】梅毒;TP—ELISA;TRUST;ACONSYP;TPPA
【中圖分類(lèi)號(hào)】R759.1【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1004-4949(2013)07-156-01
梅毒是由梅毒螺旋體引起的一種性傳播疾病,病原體為梅毒螺旋體,主要通過(guò)性接觸直接傳染,手術(shù)、接吻、哺乳、輸血等方式傳播。梅毒螺旋體可侵犯全身各臟器,造成多器官病變,功能失常,組織破壞甚至死亡[1]。病原學(xué)檢測(cè)和血清學(xué)檢測(cè)是目前臨床上常用的診斷梅毒的實(shí)驗(yàn)室方法,其中血清學(xué)檢測(cè)
包括非特異性抗心磷脂抗體血清試驗(yàn)和特異性抗體血清試驗(yàn)。為了盡早發(fā)現(xiàn)和確診梅毒,實(shí)驗(yàn)室工作人員需找出一種靈敏性高、操作簡(jiǎn)便、快速準(zhǔn)確的檢測(cè)方法。為此,我們收集了100例梅毒患者的血清標(biāo)本作為實(shí)驗(yàn)組和120例非梅毒患者作為對(duì)照組,分別采用TPPA、TRUST、ACONSYP(SYP)三種檢測(cè)方法,對(duì)結(jié)果進(jìn)行比較分析,現(xiàn)報(bào)道如下。
1 一般資料
1.1材料: 我們收集的100例患者均為2010年6月至2012年6月來(lái)我單位檢測(cè)的梅毒患者,經(jīng)TP-ELISA檢測(cè)血清標(biāo)本都呈陽(yáng)性,其中男69例,女31例,年齡為18-70歲,平均年齡為(44±0.6)歲,此組作為實(shí)驗(yàn)組;又選取 120例非梅毒患者作為對(duì)照組,其中孕產(chǎn)婦25例,20例冠心病患者, 10例糖尿病患者, 20例結(jié)核病患者, 15例肝病患者, 30例正常體檢者,年齡18~79歲,平均(51±0.3)歲,其中男71例,女。
1.2方法: 從梅毒患者身上抽取3ml肘靜脈血,分離血清后檢測(cè),先對(duì)呈陽(yáng)性的標(biāo)本進(jìn)行TP—ELISA檢測(cè),再分別采用TPPA、TRUST、ACONSYP(SYP)三種方法檢測(cè)。所有試劑均在有效使用期內(nèi),試驗(yàn)操作和結(jié)果判斷均嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作。
2結(jié)果
在100例梅毒患者血清中,通過(guò)TPPA、TRUST、ACONSYP(SYP)三種方法檢測(cè)均呈陽(yáng)性的有93例,其中98例患者TPPA檢驗(yàn)呈陽(yáng)性,93例患者TRUST檢驗(yàn)呈陽(yáng)性,96例患者SYP檢驗(yàn)呈陽(yáng)性。結(jié)果顯示TRUST敏感性略低于TP—ELISA、SYP和TPPA。120例非梅毒對(duì)照組中,有116例經(jīng)TP-ELISA檢測(cè)呈陰性,其特異性為96.67%。
3 討論
人體感染梅毒螺旋體后特異性抗螺旋體抗體和非特異性抗類(lèi)脂質(zhì)抗體在患者血清中產(chǎn)生。由于梅毒的特異性抗體出現(xiàn)的早、消失的遲,所以即使經(jīng)過(guò)正規(guī)的治療,仍可將特異性抗體檢出,甚至可終生檢出[2]。
目前常用的梅毒檢測(cè)方法分為以下三類(lèi):
3.1病原學(xué)檢查: 早期梅毒檢測(cè)的最好方法是病原學(xué)檢查,在暗視野顯微鏡下觀察患者在用藥前取出的淋巴結(jié)穿刺液或病灶滲出物,觀察其形態(tài)特征和運(yùn)動(dòng)方式。
3.2血清學(xué)檢查: 該法通過(guò)檢測(cè)非特異性抗心磷脂類(lèi)抗體和TP特異性抗體,是梅毒診斷的重要手段。目前常用的檢測(cè)方法:甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)(TRUST)、膠體金(SYP)、密螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)等。SYP采用雙抗原夾心法原理,具有較高的靈敏度,可快速定性檢測(cè)出梅毒螺旋體抗體。但在血漿濃度或血清過(guò)低的情況下,SYP會(huì)呈現(xiàn)假陰性反應(yīng)。SYP檢驗(yàn)具有操作簡(jiǎn)便、結(jié)果快速、成本低廉的優(yōu)點(diǎn),主要用于臨床急診患者篩查,但不適合批量檢測(cè);TRUST的特異性和敏感性都低于SYP法。它會(huì)受風(fēng)疹、結(jié)核病、猩紅熱、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等傳染病影響檢測(cè)結(jié)果,或?qū)υ缙诿范尽摲?、三期梅毒及治療后梅毒呈假陰性反?yīng)。由于TRUST敏感性和特異性的局限性, TRUST不適于梅毒的診斷,只適于篩選試驗(yàn); ELISA利用抗原的不同特性檢測(cè)血清中TP_IgG抗體和早期的IgM抗體。此法操作簡(jiǎn)便、結(jié)果準(zhǔn)確、成本低廉,主要用于大批量血標(biāo)本的篩查試驗(yàn),如臨床各科室手術(shù)前的檢查和輸血等。但TP—ELISA本身也存在問(wèn)題,如標(biāo)本中一些血漿蛋白紊亂,類(lèi)過(guò)氧化物酶樣物質(zhì)的增高,都會(huì)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果造成影響,造成假陽(yáng)性[3];TPPA具有相當(dāng)高的敏感性和特異性,但由于梅毒患者血清梅毒螺旋體抗體滴度未達(dá)到試劑盒的檢測(cè)范圍,會(huì)導(dǎo)致TPPA對(duì)早期梅毒的檢出率比較低,產(chǎn)生假陰性反應(yīng)[4]。TPPA主要用于對(duì)前三種方法檢測(cè)出的陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行復(fù)檢。
3.3分子生物學(xué)法: 隨著分子生物學(xué)技術(shù)發(fā)展,PCR和免疫印跡技術(shù)為梅毒的診斷提供了新的檢測(cè)手段。分子生物學(xué)法具有較高的敏感性和較強(qiáng)的特異性,尤其是在先天性梅毒、早期梅毒及神經(jīng)梅毒的檢測(cè)中,為梅毒的早期診斷與預(yù)防做出了重大貢獻(xiàn)。
總之,為了滿足病人和臨床需要,梅毒的診斷必須根據(jù)患者病史、臨床癥狀、體檢及實(shí)驗(yàn)室檢查等進(jìn)行綜合分析,實(shí)驗(yàn)室工作人員需將不同檢測(cè)方法進(jìn)行合理的搭配,采用TP—ELISA和TPPA 或TRUST進(jìn)行梅毒檢測(cè),這樣既能提高梅毒的檢出率,又可利于梅毒的早期診斷。
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