黃 毅 鄭維思 鄭瑩瑩 彭東洲 譚 紅

廣東省珠海市慢性病防治站，廣東 珠海 519000

飛揚(yáng)草有效成分的定性分析

黃 毅 鄭維思 鄭瑩瑩 彭東洲 譚 紅

廣東省珠海市慢性病防治站，廣東 珠海 519000

目的：對飛揚(yáng)草進(jìn)行化學(xué)成分初步研究。方法：采用化學(xué)法和HPLC法對飛揚(yáng)草水提液、乙醇提取液、石油醚提取液進(jìn)行化學(xué)成分系統(tǒng)預(yù)試，對其化學(xué)成分進(jìn)行分析鑒別。結(jié)果：通過化學(xué)鑒別，初步推斷其主要含有糖和苷類、氨基酸、酚類或鞣質(zhì)、有機(jī)酸、甾體或三萜類和黃酮成分；進(jìn)一步采用HPLC法對其提取物中所含的多酚類成分進(jìn)行鑒別，可檢測出沒食子酸和槲皮素。結(jié)論：該研究提示飛揚(yáng)草提取物可能含有的化學(xué)成分的種類，為其開發(fā)利用提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

飛揚(yáng)草；鑒別；化學(xué)法；薄層色譜法

飛揚(yáng)草（Euphorbiae hirtae herba）為大戟科大戟屬（Euphorbia）植物，又名飛揚(yáng)、腳癬草、大乳汁草、奶子草、天泡草等，為一年生草本。分布于熱帶與亞熱帶，在我國廣泛分布于南方地區(qū)，主產(chǎn)廣東，資源十分豐富，是南方民間臨床作為外用，應(yīng)用于濕疹、皮炎及頑癬療效顯著的一味常用草藥，在民間廣為流傳。飛揚(yáng)草有清熱解毒、殺蟲止癢功效，可用于治療腸炎、菌痢、上呼吸道感染、尿路感染，還可通乳，消腫，治療各種出血［1］。本文通過化學(xué)法和HPLC法，研究了飛揚(yáng)草提取物化學(xué)成分的主要類別，為其進(jìn)一步研究開發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與試藥

島津LC－20A型高效液相色譜儀，島津SPD－20A紫外檢測器；Sartorius BS分析天平；C5860A型超聲波清洗器；沒食子酸對照品（批號110831－200803）、蘆丁對照品（批號100080－200707）購于中國藥品生物制品檢定所；槲皮素對照品（批號090426，純度＞98%，上海融禾醫(yī)藥有限公司），飛揚(yáng)草（采自珠海，風(fēng)干粉碎，備用。）；試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 化學(xué)法鑒別［2］根據(jù)藥材成分在各種溶劑中溶解度的不同，分別采用水、乙醇、石油醚（60－90℃）提取，進(jìn)行化學(xué)鑒別。

2.1.1 水浸液的化學(xué)鑒別 飛揚(yáng)草粗粉10g加水100ml，在50－60℃的水浴上加熱1h后過濾，濾液作為供試品溶液，按表1中的項(xiàng)目進(jìn)行化學(xué)鑒別。

2.1.2 乙醇提取液化學(xué)鑒別［3］取10g飛揚(yáng)草粗粉，加100ml乙醇，沸水浴中回流提取1小時(shí)（若以葉子為原料，要除葉綠素，方法是濾液加水稀釋成70%濃度，加等量石油醚萃取葉綠素，分出下層70%乙醇層，按下列步驟操作），濾過。濾液回收乙醇至無醇味，取1/2量濃縮液，加10ml乙醇溶解，供甲項(xiàng)檢識。剩余的濃縮液加10ml 5%鹽酸，充分?jǐn)嚢?，濾過，濾液部分供乙項(xiàng)檢識。酸水不溶部分，加10ml醋酸乙酯溶解，醋酸乙酯液用5%氫氧化鈉溶液振搖洗滌2次（每次2～3ml），棄去堿水層。醋酸乙酯層再用蒸餾水洗1～2次，至水洗液呈中性，棄去水洗液，置于水浴上蒸發(fā)除去醋酸乙酯，殘留物用15ml乙醇溶解，供丙項(xiàng)檢識。

表1 樣品水浸液的化學(xué)鑒別

表2 樣品乙醇提取液化學(xué)鑒別－甲項(xiàng)檢識

鑒別項(xiàng)目 化學(xué)反應(yīng) 反應(yīng)陽性判別依據(jù)甾體或三萜類（1）氯仿－濃硫酸反應(yīng) 氯仿層顯紅色或青色，硫酸層白色沉淀蒽醌 堿液反應(yīng) 加入10%KOH液，若顯紅色或紫紅色，加酸后顏色消失。有綠色熒光（2）三氯化銻－三氯甲烷反應(yīng)

表3 樣品乙醇提取液化學(xué)鑒別－乙項(xiàng)、丙項(xiàng)檢識

2.1.3 石油醚提取液化學(xué)鑒別 取2g中藥粗粉，加10ml石油醚，室溫下浸漬提取2～3小時(shí)，濾過，濾液作為供試品溶液，按表4中的項(xiàng)目進(jìn)行化學(xué)鑒別。

表4 樣品石油醚提取液化學(xué)鑒別

2.1.4 藥材直接化學(xué)檢識

表5 藥材直接化學(xué)檢識

2.1.5 結(jié)果 結(jié)果見表6。

表6 樣品提取液的化學(xué)鑒別

注：＋：化學(xué)反應(yīng)陽性 ＋＋：化學(xué)反應(yīng)現(xiàn)象較明顯 ＋＋＋化學(xué)反應(yīng)現(xiàn)象很明顯 －：化學(xué)反應(yīng)陰性

2.2 有機(jī)酸及多酚類成分的HPLC鑒別

2.2.1 供試品溶液的制備

樣1：取飛揚(yáng)草細(xì)粉l g，精密稱定，加入水50 ml、加熱回流1小時(shí)，濾過，定容至50 m l作為供試液。

樣2，3：取飛揚(yáng)草細(xì)粉 l g，精密稱定，分別加入50ml50%乙醇、乙醇超聲提取30分鐘，濾過，定容至50 ml作為供試液。

樣4：取飛揚(yáng)草細(xì)粉l g，精密稱定，加入鹽酸－甲醇（1：20）50 ml回流60分鐘，迅速冷卻至室溫，過濾，殘?jiān)由倭考状枷礈?，洗液并入濾液中，轉(zhuǎn)移至50 m l量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45 m）過濾，取續(xù)濾液，即得。

2.2.2 對照溶液的制備 分別取沒食子酸、槲皮素、蘆丁對照品適量，精密稱定，加甲醇制成濃度為每1m l分別含40μl的溶液，即得。

2.2.3 色譜條件 色譜柱：CLC—ODS柱（250 mm×4.6 mm，5m）。檢測波長256 nm，柱溫40℃，流速1ml/min，進(jìn)樣量10ul。流動相：溶劑A，0.5%（體積分?jǐn)?shù)）甲酸；溶劑B，甲醇；梯度洗脫。

2.2.4 結(jié)果 結(jié)果如圖1所示。

3 討論

3.1 系統(tǒng)預(yù)試法，即在未知情況下對植物中可能含有的各類成分進(jìn)行比較全面系統(tǒng)的定性檢查。本試驗(yàn)采用植物化學(xué)成分系統(tǒng)預(yù)試法，對飛揚(yáng)草提取物進(jìn)行了化學(xué)成分研究，初步推斷飛揚(yáng)草中主要含有糖和苷類、氨基酸、酚類或鞣質(zhì)、有機(jī)酸、甾體或三萜類和黃酮成分。

3.2 如圖1所示，分別采用水、50%乙醇和95%乙醇提取樣品，HPLC指紋圖譜較為相似，但隨乙醇濃度的增加，沒食子酸及tR為11.5、24.5的成分量有所減少。

3.3 甲醇提取液經(jīng)酸水解樣品，原tR為26.5和21.5min左右的峰減小，24.5左右的峰增大，并出現(xiàn)了槲皮素的峰。說明原藥材中可能含有槲皮苷類的成分。樣品中蘆丁峰不明顯。3.4 水提取樣品及甲醇提取液經(jīng)酸水解樣品中含有沒食子酸，乙醇提取液中未檢出。根據(jù)沒食子酸易溶于乙醇的性質(zhì)，且其為可水解鞣質(zhì)的結(jié)構(gòu)單元，加熱提取及酸水解會使可水解鞣質(zhì)水解而轉(zhuǎn)化成沒食子酸，可推測出原藥材中含有鞣質(zhì)。

［1］章佩芬，羅煥敏.飛揚(yáng)草藥理作用研究概況［J］.中藥材，2005，28（5）：437.［2］肖崇厚，暢松松.洪筱坤，等.中藥化學(xué)［M］.上海：?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1997：595.

［3］國家藥典委員會.中國藥典（I部）［S］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：46.

Qualitative Analysis on Effective Constituents of Euphorbiae hirtae herba

HUANG Yi，ZHEN WeiSi，ZHENG Yingying，PENG dongzhou，TAN Hong
（Zhuhai Chronic Disease Prevention And Control Station，GUANG DING，Zhuhai，519000，China）

Objective：To analyze the effective constituents of Euphorbiae hirtae herba.Methods：Used the method of systematic pretest and HPLC to identify its chemical composition in the ethanol extract，water extract and ligroin extract。Results：It is concluded that Euphorbiae hirtae herba might contain carbohydrates and their glycosides，amino acids，phenols and tannin，organic acids，steroidal triterpene，flavonoids.The results of HPLC showed that Gallic acid and Quercetin can be found in the extract.Conclusion：The research shows the kinds of the chemical compositions in the Euphorbiae hirtae herba and provides evidence for its further development and utilization of the drug resources.

Euphorbiae hirtae herba；identification；chemical methods；HPLC

R284.1

A

1007－8517（2013）06－0026－02

2013.01.25）