■付大波 訾乃濤 熊曉燕 周 櫻
(武漢新華揚(yáng)生物股份有限公司,湖北武漢 430074)
玉米、豆粕、小麥和菜粕是常見飼料原料,本試驗(yàn)室測得其木聚糖含量分別為7.34%、4.3%、5.25%和6.14%。小麥與玉米相比,其代謝能僅為玉米的90%。大量研究表明,在添加了大量小麥的飼糧中添加木聚糖酶可以提高小麥中營養(yǎng)物質(zhì)的利用率,從而發(fā)揮“小麥+木聚糖酶=玉米”的優(yōu)勢(高樹冬等,2001;徐歡根等,2001)。對(duì)各種飼料的營養(yǎng)價(jià)值進(jìn)行準(zhǔn)確評(píng)定是配制畜禽日糧的關(guān)鍵。體外消化模擬系統(tǒng)的運(yùn)用,可快速地選擇可利用原料,分析各種原料的適用酶譜,評(píng)價(jià)原料的營養(yǎng)價(jià)值,建立新飼料原料體外消化數(shù)據(jù)庫,為研發(fā)、生產(chǎn)、市場奠定基礎(chǔ)。本試驗(yàn)研究體外用木聚糖酶對(duì)玉米、豆粕、小麥和菜粕進(jìn)行酶解,通過測定消化率,確定木聚糖酶對(duì)玉米、豆粕、小麥和菜粕的降解效率及適宜酶量。
木聚糖酶酶活單位:在pH值5.5、37℃條件下,1 min從5 mg/ml木聚糖溶液中釋放1 μmol還原糖所需酶量為1個(gè)木聚糖酶酶活單位(U)。
均采用兩步酶解法。胃蛋白酶-胰蛋白酶兩步酶解處理的主要參數(shù)是:溫度為37℃,底物的量為2 g,緩沖液pH值為2.0,胃蛋白酶濃度為2 mg/ml,錐形瓶中消化45 min后,轉(zhuǎn)入800~1 400 kD透析袋中,調(diào)節(jié)消化液的pH值至7.5,添加1.5 mg/ml胰蛋白酶溶液,在39℃恒溫?fù)u床中培養(yǎng)4 h。
每種飼料原料分別進(jìn)行體外酶解試驗(yàn),每種原料設(shè)6個(gè)木聚糖酶水平(0、500、1 000、2 000、3 000、4 000 U/kg),每個(gè)水平4個(gè)重復(fù)(見表1)。
表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
飼料原料酶解前后的干物質(zhì)、粗蛋白和能量含量的測定:蛋白質(zhì)測定采用凱氏定氮法;能值測定采用氧彈式測熱法;干物質(zhì)測定采用100~105℃烘箱干燥法。
表2 木聚糖酶對(duì)玉米消化率的影響(%)
由表2可知,與對(duì)照組相比,木聚糖酶改善了玉米的干物質(zhì)、粗蛋白和能量消化率;粗蛋白消化率約在60%左右,能量消化率約在40%左右。處理組2(添加量1 000 U/kg)干物質(zhì)和能量改善效果均最佳,與對(duì)照組相比分別提高16.22%、20.26%,粗蛋白消化率提高了6.23%。
由表3可知,與對(duì)照組相比,木聚糖酶對(duì)豆粕的干物質(zhì)、粗蛋白和能量消化率均有改善作用。處理組2對(duì)干物質(zhì)的改善效果最佳,與對(duì)照組相比,提高了8.28%;處理組2粗蛋白和能量消化率的改善效果相對(duì)較好,與對(duì)照組相比分別提高了6.85%和5.54%。處理組1(添加量500 U/kg)對(duì)粗蛋白消化率的改善效果最好,高達(dá)75.93%,與對(duì)照組相比提高了8.38%。
表3 木聚糖酶對(duì)豆粕消化率的影響(%)
表4 木聚糖酶對(duì)小麥消化率的影響(%)
由表4可知,木聚糖酶對(duì)小麥干物質(zhì)和能量消化率基本沒有影響,對(duì)粗蛋白消化率有提高的趨勢,其中處理組3粗蛋白消化率最高,與對(duì)照組相比提高了3.65%。
表5 木聚糖酶對(duì)菜粕消化率的影響(%)
由表5可知,木聚糖酶對(duì)菜粕的粗蛋白消化率有增加的趨勢。總體來看,處理組1(添加量500 U/kg)和處理組4(添加量3 000 U/kg)有較好的效果。與對(duì)照組相比,處理組1干物質(zhì)、粗蛋白和能量消化率分別提高了2.21%、4.68%和7.45%;處理組4干物質(zhì)、粗蛋白和能量消化率則分別提高了3.10%、7.59%和2.79%。
木聚糖普遍存在于植物性飼料原料的細(xì)胞壁中,是半纖維素中主要的結(jié)構(gòu)形式,單胃動(dòng)物沒有分解這種戊聚糖的酶。當(dāng)動(dòng)物采食含水溶性木聚糖高的飼料時(shí),可溶性木聚糖可以與細(xì)胞壁的其他成分緊密結(jié)合,嵌入在細(xì)胞壁基質(zhì)中的營養(yǎng)物質(zhì)會(huì)極大影響消化酶的消化作用;木聚糖能吸收其自身重量10倍的水,提高腸道食糜黏度,食糜通過腸道速度降低,從而降低營養(yǎng)物質(zhì)的吸收;食糜黏性會(huì)使小腸黏膜表面的不動(dòng)水層增厚,降低養(yǎng)分向腸絨毛的擴(kuò)散;另外,它的存在對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)包裹所形成的“籠壁”效應(yīng),使飼料中的營養(yǎng)物質(zhì)不能被充分暴露于動(dòng)物消化液的表面,影響動(dòng)物的消化吸收,降低了飼料的營養(yǎng)價(jià)值(鐘茂等,2006)。
木聚糖酶的應(yīng)用可有效促進(jìn)益生菌的增殖而抑制病原菌的增殖,其研究主要集中在動(dòng)物試驗(yàn)中,很少有試驗(yàn)研究其體外消化率。在玉米-豆粕型日糧中添加以木聚糖酶為主的復(fù)合酶制劑后,能量利用率可提高2%~5%(Friesen等,1992)。本試驗(yàn)中,玉米粗蛋白消化率基本在60%左右,木聚糖酶添加量為1 000 U/kg時(shí),干物質(zhì)和能量改善效果均最佳,分別提高16.22%、20.26%。木聚糖酶添加量為500 U/kg時(shí),對(duì)豆粕粗蛋白消化率改善效果最好達(dá)75.93%,提高了8.38%。吳建忠等(2005)認(rèn)為,木聚糖酶通過降解畜禽消化道內(nèi)的木聚糖,降低食糜黏性,促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收,減少畜禽下痢,從而促進(jìn)畜禽生長和提高飼料轉(zhuǎn)化率。有些學(xué)者卻認(rèn)為,木聚糖酶改善日糧營養(yǎng)價(jià)值的機(jī)理并不是降低日糧的黏度,而是通過降解木聚糖,從而打破細(xì)胞壁的堅(jiān)固結(jié)構(gòu),使包含在細(xì)胞中的養(yǎng)分釋放出來(Cowieson,2005;Petterson等,1988),從而提高這部分養(yǎng)分的消化利用率(Inborn等,1993)。王修啟等(2003)報(bào)道,木聚糖酶使小麥的干物質(zhì)消化率提高5.98%。王海英等(2003)在小麥日糧中添加木聚糖酶后,能量利用率和粗蛋白質(zhì)的消化率顯著提高。飼養(yǎng)試驗(yàn)證實(shí),雙低菜籽粕日糧中添加木聚糖酶可提高日糧的營養(yǎng)價(jià)值,提高肉雞采食量和增重(俞燕等,2009)。本試驗(yàn)中,木聚糖酶對(duì)小麥粗蛋白消化率有提高的趨勢,在添加到2 000 U/kg時(shí),粗蛋白消化率達(dá)到最高,提高了3.65%;木聚糖酶對(duì)菜粕的能量、粗蛋白和干物質(zhì)消化率有增加的趨勢,在500 U/kg及3 000 U/kg時(shí)有較好的效果。
本試驗(yàn)條件下研究表明:①木聚糖酶改善了玉米的干物質(zhì)、粗蛋白和能量消化率,玉米粗蛋白消化率基本在60%左右;添加量為1 000 U/kg時(shí),干物質(zhì)和能量改善效果均最佳,與對(duì)照組相比分別提高16.22%、20.26%;②木聚糖酶添加量為500 U/kg時(shí),對(duì)豆粕粗蛋白消化率改善效果最好,高達(dá)75.93%,提高了8.38%;③木聚糖酶添加量為500 U/kg時(shí),對(duì)菜粕的干物質(zhì)、粗蛋白和能量消化率分別提高了2.21%、4.68%和7.45%;④粗蛋白消化率大小順序:小麥>豆粕>菜粕>玉米。