周紅光，陳海彬，王瑞平，張 玉，吳勉華

(國家中醫(yī)藥管理局重點(diǎn)研究室1.南京中醫(yī)藥大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，南京 210046;2.南京中醫(yī)藥大學(xué)科技處，南京 210046;3.南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，南京 210029;4.江蘇省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，南京 210028)

中藥是大自然賜予人類的無價(jià)瑰寶，中藥復(fù)方是中醫(yī)臨床用藥的主要形式和手段，集中體現(xiàn)出中藥治療疾病的優(yōu)勢(shì)和特色。中藥復(fù)方是在“辨證立法”的基礎(chǔ)上，依據(jù)中醫(yī)“七情合和”的基本用藥原則，“藥有個(gè)性之特長，方有合群之妙用”的用藥理念，按照君、臣、佐、使關(guān)系配伍形成的“有制之師”。歷經(jīng)2000多年的臨床應(yīng)用，中藥復(fù)方的有效性、實(shí)用性和科學(xué)性已經(jīng)毋庸置疑，但中藥復(fù)方的現(xiàn)代研究至今沒有取得突破性進(jìn)展，還不能回歸到臨床指導(dǎo)中醫(yī)遣方用藥，中藥復(fù)方研究迫切需要建立符合自身特點(diǎn)的研究方法。代謝組學(xué)是20世紀(jì)90年代中期發(fā)展起來的對(duì)某一生物或細(xì)胞所有低相對(duì)分子質(zhì)量代謝產(chǎn)物進(jìn)行定性、定量分析的一門新學(xué)科［1］。作為一門新興的熱門的組學(xué)技術(shù)，代謝組學(xué)已在全球范圍內(nèi)展示出強(qiáng)勁的發(fā)展勢(shì)頭。目前，代謝組學(xué)在發(fā)現(xiàn)生物標(biāo)記物［2－4］、疾病早期診斷［5－6］、發(fā)病機(jī)制的研究［7－8］、藥理藥效的評(píng)價(jià)等方面都發(fā)揮著重要作用［9］，已被成熟應(yīng)用到惡性腫瘤［10－11］、心臟?。?2］、糖尿?。?3］等重大疾病研究當(dāng)中。代謝組學(xué)通過測定生物體系受刺激或擾動(dòng)后其代謝產(chǎn)物的變化或其隨時(shí)間的變化來研究該生物體代謝網(wǎng)絡(luò)在疾病和藥物作用下的變化。代謝組學(xué)強(qiáng)調(diào)把人作為一個(gè)整體來研究，同時(shí)在方法學(xué)上具有無創(chuàng)傷、動(dòng)態(tài)、接近生理?xiàng)l件下研究等特點(diǎn)，與中藥治病整體性、動(dòng)態(tài)性原則極其相似，為中藥復(fù)方研究提供了嶄新的和強(qiáng)有力的技術(shù)手段。將代謝組學(xué)方法和技術(shù)應(yīng)用于中藥復(fù)方的研究中，有可能使以經(jīng)驗(yàn)為基礎(chǔ)的中藥治病向以科學(xué)的方法和標(biāo)準(zhǔn)為基礎(chǔ)的現(xiàn)代化中藥治病轉(zhuǎn)變［14］。

1 代謝組學(xué)概述

代謝組學(xué)是功能基因組時(shí)代的一種研究生物系統(tǒng)的主要組學(xué)方法之一，它關(guān)注生物體系受環(huán)境刺激或基因修飾所產(chǎn)生的所有代謝產(chǎn)物的變化，并通過分析體液代謝物組成來確定生物體系的系統(tǒng)生化譜和功能調(diào)控規(guī)律［15］。生物體內(nèi)細(xì)胞的生命活動(dòng)離不開物質(zhì)代謝，代謝是生命活動(dòng)中所有生物化學(xué)變化的總稱，是生命活動(dòng)的本質(zhì)特征和物質(zhì)基礎(chǔ)。代謝組指的是生物體的一個(gè)細(xì)胞、組織或器官中所有代謝組份的集合，所有對(duì)生物機(jī)體有影響的因素均可反應(yīng)在代謝組中，生物體內(nèi)特定時(shí)刻的代謝組最能直接反映該個(gè)體特定時(shí)刻的生理病理狀態(tài)，生物體許多不能從基因組、蛋白組體現(xiàn)出的變化可以通過代謝組體現(xiàn)，基因和蛋白表達(dá)的微小變化會(huì)在代謝物上得到放大，而基因、蛋白的生命調(diào)控效應(yīng)最終都會(huì)落實(shí)在代謝層面，代謝組學(xué)是揭示機(jī)體生命活動(dòng)代謝本質(zhì)的科學(xué)，因此，代謝組學(xué)被認(rèn)為是組學(xué)研究的最終方向。

代謝組學(xué)最大的特色在于建立了以整體觀來剖析生命現(xiàn)象的理念，通過采用核磁共振譜(NMR)和質(zhì)譜(MS)等現(xiàn)代儀器分析手段，定性定量檢測生物體液(包括尿液、血漿或血清、唾液、腦脊液、精液、汗液等)中盡可能多的內(nèi)源性代謝物，即代謝組，并借助于模式識(shí)別等化學(xué)計(jì)量學(xué)方法對(duì)測得的代謝物圖譜加以分析，以了解和反映機(jī)體的整體狀態(tài)。代謝組學(xué)是一項(xiàng)動(dòng)態(tài)的、開放的、多參數(shù)應(yīng)答的新技術(shù)和新方法，它跳過生命體內(nèi)的復(fù)雜調(diào)控過程，通過分析代謝物，給出最終的、整體的結(jié)果，反映的是基因、藥物、食物、環(huán)境、時(shí)間等各種內(nèi)外因素綜合作用于機(jī)體后的總的反應(yīng)，從系統(tǒng)的角度來解釋生命現(xiàn)象，是判定健康、疾病及藥物治療效果合適的分子集合。代謝組學(xué)技術(shù)和研究策略在健康監(jiān)測、疾病診斷、個(gè)性化治療、療效評(píng)價(jià)、藥物開發(fā)等方面都有巨大的優(yōu)勢(shì)。

2 代謝組學(xué)在中藥復(fù)方研究中的應(yīng)用

2.1 代謝組學(xué)與中藥復(fù)方多靶點(diǎn)、整體性作用機(jī)制研究中藥復(fù)方作用的最基本特征是“整體大于部分之和”。目前，中西方學(xué)術(shù)界公認(rèn)，中藥復(fù)方進(jìn)入機(jī)體后，通過多種組成成分發(fā)揮多途徑、多靶點(diǎn)、多環(huán)節(jié)的協(xié)同整合作用，在慢性、多基因、復(fù)雜性、難治性疾病的治療中，比單成分、單靶點(diǎn)的藥物有更明顯的療效優(yōu)勢(shì)。但中藥復(fù)方的療效優(yōu)勢(shì)大多仍僅來源于臨床經(jīng)驗(yàn)的總結(jié)和判斷，運(yùn)用生化和分子生物學(xué)方法在單一機(jī)制的藥理模型和分子水平分析中藥復(fù)方作用機(jī)制，很難詮釋中藥復(fù)方多靶點(diǎn)、整體性、動(dòng)態(tài)性作用機(jī)制。代謝組學(xué)屬于全局系統(tǒng)生物學(xué)研究方法，強(qiáng)調(diào)把人體作為一個(gè)完整的系統(tǒng)來研究，是基于疾病和藥物干預(yù)下的系統(tǒng)代謝網(wǎng)絡(luò)的整體性和動(dòng)態(tài)性的變化來評(píng)價(jià)中藥復(fù)方的整體效應(yīng)。代謝組學(xué)研究方法與中藥復(fù)方治病強(qiáng)調(diào)整體觀、辨證施治等思想相符合，中藥復(fù)方的多靶點(diǎn)、整體性作用機(jī)制在代謝組學(xué)研究中將可能得到充分說明。柳氏等［16］采用代謝組學(xué)技術(shù)，以代謝物組的整體變化作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)黃連解毒湯對(duì)兩個(gè)熱病證候均具良好干預(yù)作用，可使其向康復(fù)方向發(fā)展，可見從病證整體代謝物組的變化來評(píng)價(jià)中藥復(fù)方的作用機(jī)制，更能客觀地反映中藥多成分、多靶點(diǎn)的特性。趙氏等［17］通過尿液代謝組學(xué)分析，研究二至丸對(duì)自然衰老小鼠內(nèi)源性代謝產(chǎn)物的影響，結(jié)果二至丸組與空白對(duì)照組相比，小鼠尿液代謝物共有36種發(fā)生改變，二至丸長期給藥對(duì)自然衰老小鼠的內(nèi)源性物質(zhì)有影響，能從提高機(jī)體免疫、調(diào)節(jié)神經(jīng)功能、調(diào)整內(nèi)分泌、促進(jìn)物質(zhì)代謝、抗氧化作用、清除自由基等多層次、多途徑、多靶點(diǎn)的延緩衰老。魯氏等［18］基于IH NMR代謝組學(xué)方法研究了昆仙膠囊對(duì)MRL/Ipr小鼠狼瘡性腎炎的影響及作用機(jī)制，結(jié)果昆仙膠囊組與模型組比較，小鼠尿蛋白濃度，血清抗ANA抗體及抗ds-DNA抗體水平明顯降低，同時(shí)尿液中乳酸、檸檬酸、葡萄糖、谷氨酰胺、丙氨酸降低，α-酮戊二酸、肌酸/肌酐、馬尿酸鹽升高，得出昆仙膠囊可以明顯改善MRL/Ipr小鼠的免疫狀況和腎臟功能。羅氏［19］等通過檢測慢性束縛應(yīng)激大鼠血漿和逍遙散干預(yù)引起的大鼠內(nèi)源性代謝物的變化，確定與之相關(guān)的代謝組學(xué)特征的小分子標(biāo)志化合物，得出慢性束縛應(yīng)激大鼠代謝網(wǎng)路改變涉及糖類、蛋白質(zhì)和脂類等物質(zhì)代謝改變，尤其是脂類的改變明顯，逍遙散能調(diào)節(jié)慢性束縛應(yīng)激大鼠的脂類代謝，使之恢復(fù)到正常水平，從代謝組學(xué)角度對(duì)經(jīng)典方劑防治疾病給出了全新的解釋。

系統(tǒng)生物學(xué)認(rèn)為，生命是由基因、蛋白質(zhì)、細(xì)胞、組織、器官這些組分按照某種方式整合成的一個(gè)系統(tǒng)，生命的體現(xiàn)是基因乃至器官網(wǎng)絡(luò)互動(dòng)聯(lián)系下的綜合外現(xiàn)，并非這些組分的簡單疊加，單個(gè)組分無法解釋生物的所有屬性和行為，因?yàn)樵谝粋€(gè)整體內(nèi)，各種組分間的相互作用會(huì)涌現(xiàn)出組分本身所不具有的新的屬性和功能，出現(xiàn)了整體本身所獨(dú)有的運(yùn)動(dòng)規(guī)律。整體雖然是由各個(gè)組成部分構(gòu)成的，但各個(gè)組成部分只有在作為整體的一部分時(shí)才有意義。因此，對(duì)生命現(xiàn)象的研究必須從系統(tǒng)整體的水平展開［20］。疾病就是受到干擾的各組分在形態(tài)、結(jié)構(gòu)及功能上的紊亂，而這種紊亂又相互影響、相互作用，形成網(wǎng)絡(luò)擾動(dòng)，最終導(dǎo)致整體機(jī)能運(yùn)動(dòng)失衡，這種失衡的結(jié)果，其外表現(xiàn)為癥狀、體征，其內(nèi)即內(nèi)源性的代謝產(chǎn)物，所以代謝應(yīng)該是多種疾病發(fā)生的重要環(huán)節(jié)，中藥復(fù)方的療效原理一定會(huì)涉及到對(duì)代謝網(wǎng)絡(luò)失衡部分的彌補(bǔ)及糾正。成功的疾病治療應(yīng)能使代謝網(wǎng)絡(luò)中的失衡部分正?；瑫r(shí)又不會(huì)干擾其他維持健康所必需代謝途徑的調(diào)控。就特定微觀的藥效指標(biāo)而言，中藥復(fù)方的療效作用通常不如相應(yīng)的化學(xué)對(duì)照藥，雖然我們可以通過多指標(biāo)體系對(duì)中藥復(fù)方的藥效作用進(jìn)行描述，但中藥復(fù)方對(duì)特定病證的整體療效優(yōu)勢(shì)不能通過多個(gè)“弱效應(yīng)”的簡單加和來體現(xiàn)，中藥復(fù)方對(duì)復(fù)雜性疾病可發(fā)揮多因微效的綜合調(diào)節(jié)作用，中藥復(fù)方的療效機(jī)制可能包含了多因微效基礎(chǔ)上的系統(tǒng)涌現(xiàn)。王氏［21］等基于自發(fā)性高血壓大鼠模型(SHR)，針對(duì)人參總皂苷的調(diào)節(jié)血壓作用及對(duì)抗高血壓所致心血管病變的整體藥效作用與潛在作用機(jī)制進(jìn)行了代謝組學(xué)與經(jīng)典藥效學(xué)的結(jié)合性研究。結(jié)果表明經(jīng)典的化學(xué)降壓藥對(duì)SHR大鼠的降壓幅度明顯強(qiáng)于人參總皂苷，人參總皂苷降血壓作用平緩、停藥后血壓上升緩慢，呈現(xiàn)持久的后續(xù)降血壓效果，還能起到一定保護(hù)心臟、腎臟的作用;通過分析人參總皂苷和四種化學(xué)藥調(diào)節(jié)SHR內(nèi)源性小分子化合物的數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)西藥對(duì)整體代謝組學(xué)及內(nèi)源性小分子的調(diào)節(jié)作用均比人參皂苷弱，研究結(jié)果反應(yīng)出血壓指標(biāo)與代謝組學(xué)指標(biāo)之間存在不一致的現(xiàn)象，血壓是個(gè)體所表現(xiàn)出的外在指標(biāo)，而代謝組學(xué)所測定的對(duì)象是內(nèi)源性物質(zhì)，反映了機(jī)體內(nèi)在指標(biāo)，是疾病內(nèi)在本質(zhì)問題的直接表現(xiàn)，因此可能更準(zhǔn)確地反映了疾病的本質(zhì)狀態(tài);代謝組學(xué)研究還發(fā)現(xiàn)多個(gè)與高血壓疾病有關(guān)的生物標(biāo)志物，這些化合物不僅是疾病發(fā)生發(fā)展的內(nèi)在表現(xiàn)，也可能是整體藥效評(píng)價(jià)的關(guān)鍵，說明代謝組學(xué)能從整體和單個(gè)化合物兩個(gè)方面動(dòng)態(tài)地反映疾病發(fā)展引起的內(nèi)源性物質(zhì)變化;研究采用與多個(gè)靶點(diǎn)明確化學(xué)藥物的代謝組學(xué)比較，通過不同靶點(diǎn)干預(yù)后相應(yīng)的生物標(biāo)記物群譜的比較分析，初步揭示了人參總皂苷多靶點(diǎn)作用機(jī)制及相比于經(jīng)典化學(xué)降壓藥物的整體藥效作用優(yōu)勢(shì)。

2.2 代謝組學(xué)與中藥復(fù)方配伍規(guī)律研究 中藥復(fù)方配伍規(guī)律研究是中藥現(xiàn)代化研究的重大關(guān)鍵科學(xué)問題之一。以配伍為特色的中藥復(fù)方具有數(shù)千年的經(jīng)驗(yàn)積累，“君臣佐使”、“升降浮沉”等配伍理論凝聚著歷史的智慧，但卻不能用現(xiàn)代科學(xué)的語言詮釋清楚［22］。必須承認(rèn)和堅(jiān)信，配伍必有規(guī)律存在，配伍必有其客觀的物質(zhì)基礎(chǔ)，而這種規(guī)律的物質(zhì)基礎(chǔ)一定能通過建立一定的方法學(xué)研究揭示出來。中藥復(fù)方通過多種單味中藥合理配伍取得了各單味藥無法取得的效果，取決于復(fù)方藥物質(zhì)與量的關(guān)系，不同質(zhì)與量藥物的組合，就會(huì)形成不同復(fù)方，從而產(chǎn)生不同的治療效果。因此，中藥復(fù)方配伍規(guī)律研究主要涉及中藥物質(zhì)組合變化與藥效活性之間的關(guān)聯(lián)性(即“組效關(guān)系”)和中藥劑量變化與藥效活性之間的關(guān)聯(lián)性(即“量效關(guān)系”)兩個(gè)方面。中藥復(fù)方的物質(zhì)可以劃分為有效藥材(飲片)、有效部位、有效組分(群)、有效成分(群)4個(gè)層次。中藥復(fù)方配伍規(guī)律研究不僅要從飲片層次研究藥物質(zhì)與量變化與藥物活性之間的關(guān)聯(lián)性(即表觀配伍)，更應(yīng)關(guān)注藥物成分吸收的影響，注重體內(nèi)直接作用物質(zhì)的變化，及與之相應(yīng)的效應(yīng)變化規(guī)律(即內(nèi)在配伍)［23］。

近年來，中藥復(fù)方配伍規(guī)律的研究有了較大的進(jìn)展，主要從藥理、化學(xué)成分和藥代動(dòng)力學(xué)角度進(jìn)行全方、藥隊(duì)及拆方研究，已經(jīng)完成了桂枝湯、補(bǔ)中益氣湯、補(bǔ)陽還五湯、六味地黃湯等大量經(jīng)典復(fù)方的拆方研究，研究水平也從整體器官組織水平延伸到細(xì)胞分子水平。在研究復(fù)方化學(xué)成分藥理作用的基礎(chǔ)上，進(jìn)行復(fù)方藥效和作用機(jī)制研究，進(jìn)而確定君臣佐使藥的有效部位和有效成分［24］。如復(fù)方黃黛片治療粒細(xì)胞性白血病，該方主要成分是四硫化四砷、靛玉紅和丹參酮ⅡA，研究發(fā)現(xiàn)三藥聯(lián)合運(yùn)用，可明顯增強(qiáng)由四硫化四砷引起的癌蛋白的降解，具有祛邪作用，四硫化四砷呈君藥作用;丹參酮ⅡA具有促進(jìn)細(xì)胞分化作用，符合臣藥特征;靛玉紅抑制細(xì)胞周期的作用略弱，符合佐藥的特性;丹參酮ⅡA和靛玉紅都能增加負(fù)責(zé)運(yùn)輸四硫化四砷的蛋白的基因表達(dá)，促使四硫化四砷更多的進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，因而起到使藥的作用［25］，用現(xiàn)代科學(xué)的語言闡釋了中藥復(fù)方君臣佐使組方原則的合理性。嚴(yán)氏等［26］基于中藥化學(xué)及藥理活性的研究結(jié)果，采用代謝組學(xué)技術(shù)，篩選出中藥復(fù)方麝香保心丸13個(gè)入血成分并進(jìn)行了組分配伍研究，使中藥復(fù)方配伍研究從飲片層次上升到組分層次。

中藥復(fù)方組效關(guān)系的研究多是基于特定動(dòng)物模型結(jié)合其相關(guān)的特定效應(yīng)指標(biāo)，分析不同配伍對(duì)效應(yīng)的影響，而指標(biāo)的選擇多具有片面性和或然性，難以真實(shí)反映出復(fù)方配伍對(duì)證侯效應(yīng)的整體改變規(guī)律。代謝組學(xué)著眼于機(jī)體內(nèi)源性小分子代謝輪廓及代謝產(chǎn)物的軌跡變化，從整體上去衡量和定義機(jī)體的功能狀態(tài)，其方法客觀、無歧視地反應(yīng)生物機(jī)體的整體功能狀態(tài)，是目前研究中藥復(fù)方組效關(guān)系的最有效途徑。王氏等［21］基于代謝輪廓評(píng)價(jià)茵陳蒿湯配伍與整體效應(yīng)變化關(guān)系，以茵陳蒿湯及其3個(gè)效應(yīng)動(dòng)力學(xué)標(biāo)記物6，7－二甲氧基香豆素、梔子苷和大黃酸進(jìn)行配伍，利用代謝組學(xué)方法研究全方配伍及體內(nèi)直接作用物質(zhì)配伍對(duì)大鼠肝損傷模型代謝輪廓的影響，以及茵陳蒿湯與其體內(nèi)直接作用物質(zhì)間的對(duì)應(yīng)關(guān)系。結(jié)果表明通過藥物代謝選擇的標(biāo)記成分及其配伍能夠反映飲片的配伍意義，通過相關(guān)性研究，從深層次揭示體內(nèi)成分對(duì)配伍后的貢獻(xiàn)及途徑，從體內(nèi)成分及其代謝產(chǎn)物的變化規(guī)律層面闡明了茵陳蒿湯配伍規(guī)律，同時(shí)利用代謝組學(xué)對(duì)整體代謝輪廓的描述，評(píng)價(jià)復(fù)雜性多元(復(fù)方成分及代謝產(chǎn)物)輸入的調(diào)整帶來整體效應(yīng)的變化，最大限度從對(duì)證侯的整體效應(yīng)變化層面揭示了配伍意義。許氏等［27］采用代謝組學(xué)的新方法和思路研究中藥“組效關(guān)系”，提出了基于藥物代謝物組學(xué)的有效成分辨識(shí)，基于代謝組學(xué)的有效成分組合的藥效活性評(píng)價(jià)，基于系統(tǒng)建模的有效成分組合與藥效活性之間關(guān)聯(lián)性分析的中藥“組效關(guān)系”研究的基本策略，通過分析中藥復(fù)方不同層次物質(zhì)組合與藥效活性的關(guān)聯(lián)規(guī)律，將宏觀的傳統(tǒng)配伍理論在化學(xué)成分這一微觀的層次上得以闡釋。中藥復(fù)方的功效、主證不僅依賴于藥味組成，而且依賴于方中特定的藥量構(gòu)成，因此，中藥復(fù)方量效關(guān)系是中國古代醫(yī)家和現(xiàn)代中醫(yī)藥研究者們都非常重視的問題。目前中藥復(fù)方量效關(guān)系研究中，復(fù)方的療效評(píng)價(jià)只能定性不能定量，導(dǎo)致量效關(guān)系不明，同時(shí)中藥復(fù)方的量效關(guān)系難以用統(tǒng)一的數(shù)學(xué)公式來表述。鄧氏等［28］提出以代謝組學(xué)技術(shù)作為中藥復(fù)方的整體療效評(píng)價(jià)方法，通過追蹤代謝組在病理發(fā)展過程中以及藥物干預(yù)下的變化開展中藥復(fù)方量效關(guān)系研究的新思路。代謝組學(xué)能夠準(zhǔn)確、靈敏地反映生物體系的整體功能狀態(tài)，同時(shí)克服了傳統(tǒng)中醫(yī)依賴醫(yī)生個(gè)人經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行診療的不確定性，中藥復(fù)方劑量的變化對(duì)其療效乃至功用的改變都將在代謝組圖譜的不同變化趨勢(shì)中得到體現(xiàn)，從而能夠?qū)?fù)方的量效關(guān)系給出全新的解釋。

2.3 代謝組學(xué)與中藥復(fù)方安全性研究 中藥復(fù)方安全性問題是中藥復(fù)方國際化的主要障礙之一。由于中藥的來源具有多樣性，各種來源的原料藥導(dǎo)致中藥中化學(xué)成分多種多樣，化合物的多樣性又繼而導(dǎo)致中藥表現(xiàn)出有多個(gè)效應(yīng)器官、多種作用和多個(gè)作用靶點(diǎn)，復(fù)方中多味藥的配伍應(yīng)用使得中藥復(fù)方安全性的研究既需要研究各單味中藥，又需要研究各單味中藥之間的配伍及其協(xié)同作用等，因此，中藥復(fù)方藥物安全性的研究更為復(fù)雜和困難，這也正是中藥復(fù)方到今天還難以走向世界的主要原因之一。因此，亟待開發(fā)客觀、全面的毒性評(píng)價(jià)體系和手段，用于保證中藥復(fù)方的安全性和科學(xué)性。

代謝組學(xué)具有高通量、高靈敏度和高特異性的優(yōu)勢(shì)，是目前闡明藥物毒性及安全性的最有效方法和途徑之一［29］。代謝組學(xué)研究的初衷之一就是進(jìn)行藥物毒理研究，藥物毒理就是藥物進(jìn)入機(jī)體之后，會(huì)對(duì)機(jī)體內(nèi)分泌和代謝產(chǎn)生一定的影響，代謝組學(xué)描述的是生物體內(nèi)代謝的內(nèi)源性小分子隨時(shí)間為參數(shù)的變化，在不同的時(shí)間，代謝物的種類、濃度及比例是變化的，以代謝組學(xué)方法檢測這些外源性刺激引起機(jī)體內(nèi)分泌和代謝網(wǎng)絡(luò)的改變，可監(jiān)測藥物本身在體內(nèi)的代謝變化過程，同時(shí)還可以觀察到藥物所引起的內(nèi)源性代謝物的變化，利用代謝物的終端性信息發(fā)現(xiàn)與藥物毒性相關(guān)的生物標(biāo)志物，以此作為藥物安全性評(píng)價(jià)的方法，并進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)毒性的規(guī)律。將代謝組學(xué)用于藥物毒性和安全性評(píng)價(jià)已成為目前新藥開發(fā)過程中一項(xiàng)倍受關(guān)注的研究課題，國外不少政府部門和單位已經(jīng)組建了相關(guān)機(jī)構(gòu)和組織專門從事此項(xiàng)工作。21世紀(jì)初，國外6大醫(yī)藥公司(Brist ol2 Meyers-Squibb，Eli lilly，Hoffmann-La Roche，NovoNordisk，Pfizer，Phar macia)和倫敦大學(xué)的皇家科學(xué)院實(shí)驗(yàn)室聯(lián)合成立了一個(gè)研究組織COMET，COMET主要研究目標(biāo)是建立“有毒藥物”作用后代謝產(chǎn)物的NMR譜圖數(shù)據(jù)庫，開發(fā)毒性預(yù)測專家系統(tǒng)［30］。如今，該組織已分析了多種對(duì)肝臟和腎臟具有毒性的模型毒物，測定了它們?cè)谀蛞汉脱?包括生物組織)中的代謝數(shù)據(jù)，并已計(jì)劃據(jù)此建立一個(gè)含有大量模型毒物信息的數(shù)據(jù)庫，進(jìn)而開發(fā)能對(duì)更多模型藥物進(jìn)行分析的專家系統(tǒng)，以對(duì)候選藥物的肝腎毒性進(jìn)行毒理學(xué)篩選，達(dá)到降低新藥的創(chuàng)新成本，縮短新藥研發(fā)周期的目的。

代謝組學(xué)技術(shù)為中藥復(fù)方安全性研究提供了新的思路與方法，目前我國已基本具備應(yīng)用代謝組學(xué)開展中藥相關(guān)問題研究的基本條件。近年來，國內(nèi)已開展了一些對(duì)單味中藥安全性評(píng)價(jià)的代謝組學(xué)研究工作。梁氏等［31］基于NMR研究了廣防己的腎毒性，收集大鼠尿液，研究發(fā)現(xiàn)馬尿酸鹽、肌酐、TMAO在尿液中的含量有上升，表明腎臟損傷能增加腎臟的濾過作用;同時(shí)發(fā)現(xiàn)大鼠尿液中的?；撬岬暮可仙瑱幟仕岬暮肯陆?，2－酮戊二酸的含量下降，證明廣防己還能引起肝臟毒性。將能反映整體觀的代謝組學(xué)用于對(duì)中藥復(fù)方安全性研究，系統(tǒng)地研究復(fù)方配伍對(duì)人體的影響及毒性作用的靶器官和標(biāo)志物，建立中藥復(fù)方毒性評(píng)價(jià)體系，為復(fù)方的使用提供科學(xué)、合理和安全使用的依據(jù)，也為中藥復(fù)方進(jìn)一步“減毒增效”機(jī)制研究打下基礎(chǔ)。

3 展望

中醫(yī)藥是中華民族在與疾病長期斗爭過程中積累的寶貴財(cái)富，是我國最具有原始創(chuàng)新潛力的學(xué)科領(lǐng)域［32］。中藥復(fù)方是中醫(yī)藥優(yōu)勢(shì)和特色最集中的體現(xiàn)。生物學(xué)正進(jìn)入一個(gè)可以科學(xué)地解釋或預(yù)測某些事件的時(shí)代［33］。代謝組學(xué)的引入與發(fā)展，為中藥復(fù)方的現(xiàn)代研究提供了全新的技術(shù)手段，但由于其正處于初步發(fā)展階段，數(shù)據(jù)分析手段、各種分析技術(shù)仍需進(jìn)一步完善，但相信隨著技術(shù)的進(jìn)一步革新，其在中藥復(fù)方研究領(lǐng)域必有廣闊的應(yīng)用前景。應(yīng)用代謝組學(xué)技術(shù)研究中藥復(fù)方，將對(duì)中藥復(fù)方多靶點(diǎn)、整體性作用機(jī)制、復(fù)方配伍規(guī)律及安全性評(píng)價(jià)等多方面給予科學(xué)闡釋，這些必將有力地推動(dòng)中藥復(fù)方現(xiàn)代化研究的步伐，更好地傳承和發(fā)展中醫(yī)藥“君臣佐使”、“升降浮沉”等理論，真正的將中藥復(fù)方推向世界。

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