殷帥文，劉麗萍，王安萍，毛愷俊，熊 欣

1井岡山大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;2江西省生物多樣性與生態(tài)工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，吉安343009

井岡山區(qū)63種植物不同溶劑萃取物乙酰膽堿酯酶抑制活性的初步研究

殷帥文1，2*，劉麗萍1，王安萍1，毛愷俊1，熊 欣1

1井岡山大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;2江西省生物多樣性與生態(tài)工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，吉安343009

采用乙酰膽堿酯酶(AChE)抑制活性篩選模型，對采自井岡山及周邊地區(qū)的63種植物(67個部位)乙醇提取物的不同溶劑萃取物進(jìn)行AChE抑制活性研究。結(jié)果表明:在乙酸乙酯萃取物中，供試質(zhì)量濃度在1 mg/ mL時，其中剪刀草和戟葉蓼表現(xiàn)出較強(qiáng)的AChE抑制活性，抑制率均大于90%，其余大部分植物均大于40%。供試質(zhì)量濃度在0.025 mg/mL時，蛇莓等6種植物的抑制率大于60%，其余大部分植物小于30%;在正丁醇萃取物中，供試質(zhì)量濃度在1 mg/mL時，紫萼變種、活血丹、菟絲子、剪刀草、冬青葉山茶葉、地念和車前草的抑制率大于80%，其余大部分植物的抑制率均大于40%。供試質(zhì)量濃度在0.025 mg/mL時，秀麗四照花等22種植物抑制率均大于50%;在石油醚萃取物中，供試質(zhì)量濃度在1 mg/mL時，紫萼變種、紫莖前胡、博落回、杠板歸、地念、山橿、藤石松和車前草的抑制率大于90%，供試質(zhì)量濃度在0.025 mg/mL時，紫莖前胡等17種植物抑制率大于70%。另外，有些植物萃取物不僅對AChE沒有抑制活性，反而表現(xiàn)出一定的增強(qiáng)作用。

植物提取物;乙酰膽堿酯酶;抑制劑;活性評價

早老性癡呆癥(又稱阿爾茨海默氏病，Alzhei- mer’s Disease.AD)是發(fā)生于老年和老年前期以進(jìn)行性神經(jīng)退化為特征的大腦退行性病變，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)變行性疾病，其主要臨床表現(xiàn)為進(jìn)行性認(rèn)知功能減退并伴有行為障礙和情緒異常等，嚴(yán)重者直至失去生活自理能力［1，2］。目前的研究認(rèn)為AD是一種多病因疾病，膽堿能假說是目前最為被廣泛接受的病理理論［3-5］。因此，AChE抑制劑(Acetylcholinesterase Inhibitor.AChEI)藥物是目前研究最多、最為活躍的抗早老性癡呆癥藥物［3-7］。其中最具代表性的中樞神經(jīng)性可逆AChEI有第一代的Tacrine (商品名:cognex)，Donepezil(商品名:Acricept).Rivastigmine(商品名:Exelon)，以及第二代的石杉堿甲(HupA)等［3］。

自然界具有豐富的生物資源多樣性，大量研究表明:天然植物藥用成分具有療效好，副作用小，作用面廣，適宜長期服用等優(yōu)點(diǎn)。因而，從藥用植物中尋找具有抗老年性癡呆的乙酰膽堿酯酶抑制劑，已成為當(dāng)今醫(yī)藥研究方面的熱點(diǎn)課題［7，8］。為此，本文對采自江西井岡山地區(qū)的63種植物乙醇提取物的不同溶劑萃取物進(jìn)行了AChE抑制活性研究，旨在為發(fā)現(xiàn)天然AChE抑制劑提供線索。

1 材料與方法

1.1 植物提取物樣品的制備

本實(shí)驗(yàn)所用的植物樣品均采自江西井岡山地區(qū)，由井岡山大學(xué)周兵老師鑒定，模式標(biāo)本保存于井岡山大學(xué)標(biāo)本館。新鮮的植物材料陰干，磨碎，取上述每種磨碎的植物樣品10 g。用95%乙醇100 ml浸泡，超聲波提取30 min，過濾，反復(fù)提取3次，合并提取液，減壓濃縮后得乙醇提取物浸膏，將浸膏用分別加入20 mL蒸餾水，再依次加入約30 mL石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取3次，合并3次萃取液濃縮，分別得石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取物，稱重，使用前用50%乙醇分別配成40和1 mg/mL濃度(最終測試濃度分別為1和0.025 mg/mL)，備用。

1.2 儀器

UV2550紫外可見分光光度計(日本Shimadzu公司)，SC215超級數(shù)控恒溫槽(寧波天恒儀器廠)，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(瑞士BüCHI公司)。

1.3 藥品與試劑

乙酰膽堿酯酶(AChE.Sigma公司)，50 mmol/ L、pH 8.0的磷酸緩沖鹽溶液(PBS)，15 mmol/L二硫二硝基苯甲酸(Dithiobisnitrobenzoic acid.DTNB)溶液(Sigma公司)(用50 mmol/L.pH 8.0 PBS配制)，15 mmol/L硫代乙酰膽堿(Acetylthiocholine.ATch.Sigma公司，用50 mmol/L.pH 8.0 PBS配制)，4%十二烷基硫酸鈉(SDS.Sigma公司).陽性對照tacrine(Sigma公司)，其余化學(xué)試劑均為分析純。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

實(shí)驗(yàn)采用改良的Ellman方法［9］進(jìn)行，簡單的說，2.65 ml PBS(pH 8.0)。50 μLAChE(0.85 U/ ml，buffer pH 8).100 μL 15 mM DTNB和樣品溶液100 μL加入試管，37℃預(yù)熱2 min，然后加入100 μL 15 mM ATch，在37℃保溫20 min后立即加入1 mL 0.4%SDS終止反應(yīng)，將所得溶液立即在412 nm下測量吸光值并根據(jù)下式計算抑制率。

抑制率(%)=［A對照-(A樣品-A樣品空白)］/A對照×100

這里 A對照是指樣品溶液為沒有添加樣品的50%乙醇溶液時的吸光值，A樣品是指添加樣品溶液的吸光值，而A樣品空白則表示添加樣品溶液但沒有添加底物ATch時的吸光值。所有實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次并計算平均值和標(biāo)準(zhǔn)差，陽性對照為他克林。

2 結(jié)果

2.1 乙酸乙酯萃取物的AChE抑制活性的研究

對63種植物乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物AChE抑制活性的研究表明(表1):在供試質(zhì)量濃度在1 mg/mL時，剪刀草和戟葉蓼表現(xiàn)出較強(qiáng)的AChE抑制活性，抑制率均大于90%，其余大部分植物的抑制率均大于40%。在供試質(zhì)量濃度在0.025 mg/mL時，只有少數(shù)植物表現(xiàn)出較高的AChE抑制活性，其中蛇莓、博落回、苦苣苔、鹽膚木、南方紅豆杉和圓錐繡球的抑制率大于60%。其余大部分植物的抑制活性均小于30%，甚至有些植物不僅對AChE沒有抑制活性，反而表現(xiàn)出一定的增強(qiáng)作用?？偟膩碚f，忍冬科、大戟科、燈心草科、海金沙科、龍牛兒苗、苦苣苔科、漆樹科、紅豆杉科和虎耳草科植物在1 mg/mL，0.025 mg/mL濃度下抑制率較高。

表1 63種植物乙酸乙酯萃取物抑制AChE活性Table 1 AChE inhibitory activity of the the ethyl acetate soluble fractions isolated from ethanol extracts of 63 species of plants

黃牛奶葉(Symplocos laurina) 山礬科 葉 48.30±2.78 11.58±1.33辣椒(Capsicum annuum) 茄科 葉，莖 80.36±3.30 27.41±0.25龍牙草(Agrimonia pilosa) 薔薇科 葉，莖 79.46±0.96 －23.94±0.16蛇莓(Duchesnea indica) 薔薇科 葉，莖 52.12±8.89 69.81±0.94水楊梅(Geum aleppicum) 薔薇科 葉，莖 45.24±2.67 30.96±0.35紫萼變種(Teucrium porphyreum) 唇形科 葉，莖 72.12±4.48 6.84±1.51薄荷(Mentha haplocalyx) 唇形科 葉，莖 58.41±4.55 －2.31±1.99活血丹(Glechoma longituba) 唇形科 葉，莖 47.74±2.91 25.05±7.09菟絲子(Cuscuta chinensis) 旋花科 葉，莖 56.47±1.73 －3.57±1.17牛耳楓(Daphniphyllum calycinum) 交讓木科 葉，莖 86.93±0.52 46.36±9.64野胡蘿卜(Daucus carota) 傘形科 葉，莖 44.69±0.64 43.72±6.42紫莖前胡(Peucedanum violaceum) 傘形科 葉，莖 75.14±0.68 19.03±6.85葎草(Humulus scanden) 桑科 葉，莖 65.31±1.08 －29.44±1.18忍冬(Lonicera japonica) 忍冬科 葉，莖 51.18±1.33 45.82±6.58烏蘞莓(Cayratia japonica). 葡萄科 葉 64.35±1.64 －21.67±1.72烏蘞莓(Cayratia japonica) 葡萄科 莖 57.96±0.83 －42.96±7.66剪刀草(Sagittaria trifolia) 澤瀉科 葉，莖 98.40±2.76 23.77±1.98柿樹(Diospyros kaki) 柿樹科 葉 41.08±5.86 10.99±3.70柿樹(Diospyros kaki) 柿樹科 莖 84.65±2.84 4.59±5.44冬青葉山茶(Camellia ilicifolia) 山茶科 莖 71.60±3.26 24.73±6.10冬青葉山茶(Camellia ilicifolia) 山茶科 葉 45.11±1.19 －14.96±1.46楓楊(Pterocarya stenoptera) 胡桃科 葉，莖 59.20±1.05 3.91±0.99廬山樓梯草(Elatostema stewardii) 蕁麻科 葉，莖 53.77±1.27 －13.93±4.04葉下珠(Phyllanthus urinaria) 大戟科 葉，莖 55.91±0.43 48.53±0.36高山肺形草(Tripterospermum cordifolium) 龍膽科 葉，莖 60.02±0.72 7.79±2.01博落回(Macleaya cordata.) 罌粟科 葉，莖 54.97±0.72 61.99±2.65血水草(Eomecon chionantha) 罌粟科 葉 54.53±0.76 －15.27±6.52小燈心草(Juncus bufonius) 燈心草科 全草 60.54±0.95 56.09±8.75尼泊爾蓼(Polygonum nepalense) 蓼科 全草 63.41±3.13 －54.05±1.72戟葉蓼(Polygonum thunbergii.) 蓼科 全草 99.50±2.21 30.62±1.24杠板歸(Polygonum perfoliatum.) 蓼科 葉，莖 31.72±2.51 12.64±4.69毛茛(原變種)(Ranunculus japonicus) 毛茛科 全草 51.84±1.36 －29.29±5.65柏拉木(Blastus cochinchinensis) 野牡丹科 葉，莖 86.93±1.16 5.70±1.22肥肉草(Fordiophyton fordii) 野牡丹科 花，葉，莖 69.36±0.05 4.72±4.00地念(Melastoma dodecandrum) 野牡丹科 全草 50.45±7.32 46.11±1.030中國茜草(原變種)(Rubia chinensis) 茜草科 全草 73.01±7.01 26.29±3.02四葉葎(Galium bungei.) 茜草科 葉，莖 40.11±1.06 19.36±1.10短柄怉櫟(Quercus serrata) 殼斗科 葉 36.82±2.65 11.03±3.27短柄怉櫟(Quercus serrata) 殼斗科 莖 71.08±4.82 35.77±1.04過路驚(Bredia quadrangularis) 殼斗科 葉，莖 49.41±2.17 38.33±0.17星毛鴨腳木(Schefflera minutistellata) 五加科 葉，莖 16.14±0.97 －0.67±0.95棘莖楤木(Aralia echinocaulis) 五加科 葉，莖 56.64±4.55 28.55±2.45

注:數(shù)值表示為±s(n=3);陽性對照濃度為0.1 μg/mL。Note:Values were expressed as mean±SD;tacrine concentration is 0.1 μg/ml.

2.2 正丁醇萃取物的AChE抑制活性的研究

對63種植物乙醇提取物的正丁醇萃取物AChE抑制活性的研究表明(表2):供試質(zhì)量濃度在1 mg/mL時，水楊梅、紫萼變種、活血丹、菟絲子、剪刀草、冬青葉山茶葉、地念和車前草的AChE抑制率均大于80%，其余大部分植物的抑制率均大于40%。供試質(zhì)量濃度在0.025 mg/mL時，仍有部分植物表現(xiàn)出較高的AChE抑制活性，其中秀麗四照花、龍牙草、黃牛奶葉、蛇莓、牛耳楓、野胡蘿卜、葎草、忍冬、烏蘞莓、柿樹莖、冬青葉山茶葉、楓楊、廬山樓梯草、博落回、血水草、小燈心草、戟葉蓼、毛茛(原變種)、柏拉木、地念、柿樹莖和過路驚抑制率均大于50%。一些植物如活血丹、棘莖楤木、鹽膚木、南方紅豆杉、圓錐繡球和車前草提取物不僅對AChE沒有抑制活性，反而表現(xiàn)出一定的增強(qiáng)作用?？偟膩碚f，山茱萸科、薔薇科、旋花科、交讓木科、?？?、忍冬科、胡桃科、蕁麻科、大戟科、罌粟科、鱗始蕨科和殼斗科植物在1，0.025 mg/mL濃度下抑制率較高。

表2 63種植物正丁醇萃取物抑制AChE活性Table 2 AChE inhibitory activity of the the n-butyl alcohol soluble fractions isolated from ethanol extracts of 63 species of plants

龍牙草(Agrimonia pilosa) 薔薇科 葉，莖 49.28±0.93 81.53±0.55蛇莓(Duchesnea indica) 薔薇科 葉，莖 68.37±7.84 56.90±14.25水楊梅(Geum aleppicum) 薔薇科 葉，莖 89.40±0.99 23.82±0.66紫萼變種(Teucrium porphyreum) 唇形科 葉，莖 83.43±1.95 42.07±0.69薄荷(Mentha haplocalyx) 唇形科 葉，莖 74.81±2.19 4.01±3.67活血丹(Glechoma longituba) 唇形科 葉，莖 86.74±1.81 －27.01±6.43菟絲子(Cuscuta chinensis) 旋花科 葉，莖 82.33±0.02 48.37±0.76牛耳楓(Daphniphyllum calycinum) 交讓木科 葉，莖 53.03±1.16 64.55±3.09野胡蘿卜(Daucus carota) 傘形科 葉，莖 22.00±1.45 52.21±1.12紫莖前胡(Peucedanum violaceum) 傘形科 葉，莖 59.38±3.10 16.69±1.27葎草(Humulus scanden) ?？?葉，莖 69.62±1.51 56.11±2.92忍冬(Lonicera japonica) 忍冬科 葉，莖 57.60±2.34 64.33±2.37烏蘞莓(Cayratia japonica). 葡萄科 葉 53.39±3.97 36.46±4.11烏蘞莓(Cayratia japonica) 葡萄科 莖 52.84±2.63 53.01±0.75剪刀草(Sagittaria trifolia) 澤瀉科 葉，莖 83.86±0.73 41.343±0.19柿樹(Diospyros kaki) 柿樹科 葉 49.07±1.51 30.39±4.87柿樹(Diospyros kaki) 柿樹科 莖 63.51±0.77 85.089±0.70冬青葉山茶(Camellia ilicifolia) 山茶科 莖 71.80±7.20 39.70±0.29冬青葉山茶(Camellia ilicifolia) 山茶科 葉 86.20±0.87 69.81±9.37楓楊(Pterocarya stenoptera) 胡桃科 葉，莖 74.36±1.76 68.71±5.24廬山樓梯草(Elatostema stewardii) 蕁麻科 葉，莖 71.57±5.27 50.24±1.86葉下珠(Phyllanthus urinaria) 大戟科 葉，莖 53.28±1.29 70.69±2.84高山肺形草(Tripterospermum cordifolium) 龍膽科 葉，莖 68.18±7.77 24.08±0.99博落回(Macleaya cordata.) 罌粟科 葉，莖 61.81±1.58 67.64±2.93血水草(Eomecon chionantha) 罌粟科 葉 59.39±1.27 78.59±1.60小燈心草(Juncus bufonius) 燈心草科 全草 61.82±2.23 50.72±1.42尼泊爾蓼(Polygonum nepalense) 蓼科 全草 57.15±1.42 48.47±1.08戟葉蓼(Polygonum thunbergii.) 蓼科 全草 47.31±1.79 70.37±1.20杠板歸(Polygonum perfoliatum.) 蓼科 葉，莖 47.07±2.37 30.95±2.08毛茛(原變種)(Ranunculus japonicus) 毛茛科 全草 55.02±0.84 54.89±1.63柏拉木(Blastus cochinchinensis) 野牡丹科 葉，莖 59.39±0.62 53.28±0.37肥肉草(Fordiophyton fordii) 野牡丹科 花，葉，莖 56.92±2.81 5.08±5.37地念(Melastoma dodecandrum) 野牡丹科 全草 80.22±0.83 53.01±0.60中國茜草(原變種)(Rubia chinensis) 茜草科 全草 54.82±5.75 19.33±3.74四葉葎(Galium bungei.) 茜草科 葉，莖 57.54±1.98 43.68±3.97短柄怉櫟(Quercus serrata) 殼斗科 葉 71.83±3.26 50.54±3.87短柄怉櫟(Quercus serrata) 殼斗科 莖 68.94±0.75 31.47±3.27過路驚(Bredia quadrangularis) 殼斗科 葉，莖 57.14±4.74 52.24±0.30星毛鴨腳木(Schefflera minutistellata) 五加科 葉，莖 22.84±2.01 8.21±6.32棘莖楤木(Aralia echinocaulis) 五加科 葉，莖 70.34±0.86 －47.20±5.83水金鳳(Impatiens noli－tangere) 鳳仙花科 花，葉，莖 33.05±6.45 21.43±0.50山橿(Lindera reflexa). 樟科 葉，莖 66.14±1.15 48.30±3.91

注:數(shù)值表示為±s(n=3);陽性對照濃度為0.1μg/mL。Note:Values were expressed as mean±SD;tacrine concentration is 0.1μg/mL.

2.3 石油醚萃取物的AChE抑制活性的研究

對63種植物乙醇提取物的石油醚萃取物AChE抑制活性的研究表明(表3):在供試質(zhì)量濃度在1 mg/mL時，紫萼變種、紫莖前胡、博落回、杠板歸、地念、山橿、藤石松和車前草的AChE抑制率均大于90%。供試質(zhì)量濃度在0.025 mg/mL時，仍有部分植物表現(xiàn)出較高的AChE抑制活性，其中抑制率大于70%的分別有紫莖前胡、柿樹葉、冬青葉山茶葉、肥肉草、中國茜草(原變種)、短柄怉櫟葉、短柄怉櫟莖、過路驚、星毛鴨腳木、水金鳳、山橿、藤石松、東亞老鸛草、一把傘南星、大葉冷水花、金線吊烏龜、花葉山姜和半楓荷等17種植物?？偟膩碚f，柿樹科、大戟科、罌粟科、茜草科、殼斗科、五加科、鳳仙花科、樟科、石松科、天南星科、防己科和姜科的抑制率在1、0.025 mg/mL濃度下抑制率較高。

表3 63種植物石油醚萃取物抑制AChE活性Table 3 AChE inhibitory activity of the the petroleum ether soluble fractions isolated from ethanol extracts of 63 species of plants

紫萼變種(Teucrium porphyreum) 唇形科 葉，莖 90.44±2.43 40.89±3.43薄荷(Mentha haplocalyx) 唇形科 葉，莖 86.22±0.23 11.03±7.75活血丹(Glechoma longituba) 唇形科 葉，莖 53.39±7.13 41.57±1.98菟絲子(Cuscuta chinensis) 旋花科 葉，莖 58.70±1.45 35.13±0.36牛耳楓(Daphniphyllum calycinum) 交讓木科 葉，莖 39.63±0.16 33.39±1.29野胡蘿卜(Daucus carota) 傘形科 葉，莖 55.06±2.44 26.52±2.50紫莖前胡(Peucedanum violaceum) 傘形科 葉，莖 92.49±3.07 76.60±2.18葎草(Humulus scanden) 桑科 葉，莖 37.39±4.83 30.42±0.92忍冬(Lonicera japonica) 忍冬科 葉，莖 17.78±0.32 46.52±7.68烏蘞莓(Cayratia japonica). 葡萄科 葉 60.52±3.20 59.66±0.65烏蘞莓(Cayratia japonica) 葡萄科 莖 47.02±0.80 32.92±1.76剪刀草(Sagittaria trifolia) 澤瀉科 葉，莖 29.70±2.54 26.96±3.62柿樹(Diospyros kaki) 柿樹科 葉 79.31±3.73 72.94±3.98柿樹(Diospyros kaki) 柿樹科 莖 55.56±3.87 61.25±1.61冬青葉山茶(Camellia ilicifolia) 山茶科 莖 86.82±7.19 23.84±2.20冬青葉山茶(Camellia ilicifolia) 山茶科 葉 44.16±5.82 96.52±1.78楓楊(Pterocarya stenoptera) 胡桃科 葉，莖 87.14±6.65 36.55±2.80廬山樓梯草(Elatostema stewardii) 蕁麻科 葉，莖 62.42±1.06 38.20±1.56葉下珠(Phyllanthus urinaria) 大戟科 葉，莖 100.00±0.00 55.17±1.64高山肺形草(Tripterospermum cordifolium) 龍膽科 葉，莖 54.80±1.23 34.16±0.55博落回(Macleaya cordata.) 罌粟科 葉，莖 95.33±5.14 63.93±1.11血水草(Eomecon chionantha) 罌粟科 葉 －83.92±6.57 46.85±1.14小燈心草(Juncus bufonius) 燈心草科 全草 65.29±0.57 37.19±3.97尼泊爾蓼(Polygonum nepalense) 蓼科 全草 87.79±5.96 30.90±1.05戟葉蓼(Polygonum thunbergii.) 蓼科 全草 5.69±0.43 49.50±2.50杠板歸(Polygonum perfoliatum.) 蓼科 葉，莖 97.66±0.38 18.30±1.92毛茛(原變種)(Ranunculus japonicus) 毛茛科 全草 35.49±7.99 29.55±2.34柏拉木(Blastus cochinchinensis) 野牡丹科 葉，莖 88.05±4.18 44.94±4.56肥肉草(Fordiophyton fordii) 野牡丹科 花，葉，莖 39.10±1.11 76.03±2.00地念(Melastoma dodecandrum) 野牡丹科 全草 95.44±5.26 32.28±3.33中國茜草(原變種)(Rubia chinensis) 茜草科 全草 62.68±2.83 73.34±0.96四葉葎(Galium bungei.) 茜草科 葉，莖 66.57±3.89 56.36±2.53短柄怉櫟(Quercus serrata) 殼斗科 葉 74.03±0.39 74.91±2.60短柄怉櫟(Quercus serrata) 殼斗科 莖 25.92±0.39 86.78±1.53過路驚(Bredia quadrangularis) 殼斗科 葉，莖 61.68±2.04 76.11±1.34星毛鴨腳木(Schefflera minutistellata) 五加科 葉，莖 79.95±3.40 74.55±0.35棘莖楤木(Aralia echinocaulis) 五加科 葉，莖 55.46±2.80 40.02±2.21水金鳳(Impatiens noli－tangere) 鳳仙花科 花，葉，莖 68.58±0.63 74.93±0.51山橿(Lindera reflexa). 樟科 葉，莖 97.83±1.57 76.49±1.20藤石松(Lycopodiastrun Lycopodiastrum) 石松科 全草 95.72±4.79 75.65±1.66東亞老鸛草(Geranium nepalense) 龍牛兒苗 全草 39.04±7.50 75.23±3.59一把傘南星(Arisaema erubescens) 天南星科 葉，莖 62.68±2.83 73.95±2.33

注:數(shù)值表示為±s(n=3);陽性對照濃度為0.1 μg/mL。Note:Values were expressed as mean±SD;tacrine concentration is 0.1 μg/mL.

3 討論

隨著社會人口的老化，老齡人口不斷增加，老年性癡呆癥發(fā)病率相對上升，目前，全世界約有1700～2500萬的人患有此?。?0］，癡呆癥與心血管疾病、惡性腫瘤一起已成為老年人致殘、致死的三大疾?。?1］。然而，從植物中篩選并開發(fā)出的抗老年性癡呆癥的藥物并不多，系統(tǒng)的進(jìn)行植物AChE抑制活性研究的報道也很少［3］，本實(shí)驗(yàn)對采集到的63種植物乙醇提取物的三種溶劑萃取物進(jìn)行了AChE抑制活性研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示部分溶解萃取物提取物具有較高的的抑制AChE活性。例如在石油醚萃取物中，在供試質(zhì)量濃度在1 mg/mL時，紫萼變種、紫莖前胡、博落回、杠板歸、地念、山橿、藤石松和車前草的抑制率均大于90%。供試質(zhì)量濃度在0.025 mg/mL時，仍有部分植物表現(xiàn)出較高的AChE抑制活性，其中紫莖前胡等18種植物抑制率大于70%。另外，在對不同溶劑萃取物的比較中，由正丁醇相和石油醚相抑制率比乙酸乙酯相要高，顯示抑制AChE活性成分或許更多的在這兩相溶劑中，極性偏小或偏大，而在中等極性溶劑中則較少。在不同科植物的對比中，乙酸乙酯相中忍冬科、大戟科、燈心草科、海金沙科、龍牛兒苗、苦苣苔科、漆樹科、紅豆杉科和虎耳草科植物抑制率較高;正丁醇相中山茱萸科、薔薇科、旋花科、交讓木科、?？?、忍冬科、胡桃科、蕁麻科、大戟科、罌粟科、鱗始蕨科和殼斗科植物抑制率較高;石油醚相中柿樹科、大戟科、罌粟科、茜草科、殼斗科、五加科、鳳仙花科、樟科、石松科、天南星科、防己科和姜科的抑制率較高。表明這些科植物極有可能含有強(qiáng)抑制AChE活性的成分，對這些植物進(jìn)行系統(tǒng)深入的化學(xué)成分研究，很有可能從中發(fā)現(xiàn)活性更強(qiáng)的有效成分，從而為防治早老性癡呆癥的藥物研究提供有價值的活性先導(dǎo)結(jié)構(gòu)。這些植物的進(jìn)一步的活性追蹤、化學(xué)成分分離與結(jié)構(gòu)鑒定工作仍在進(jìn)行中。另外，在AChE抑制活性的研究中，我們發(fā)現(xiàn)，部分低濃度提取物對AChE活性不但沒有抑制作用，反而有一定的增強(qiáng)作用，這種現(xiàn)象在海藻組分［12］和蕨類植物［13］中亦被觀察到，本文的研究進(jìn)一步證明了這種現(xiàn)象的存在。

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Primary study on the acetylcholinesterase inhibitory activity of different Plant Extracts

YIN Shuai-wen1，2*，LIU Li-ping1，WANG An-ping1，MAO Kai-jun1，XIONG Xin11School of Life Sciences.Jinggangshan University.Ji’an 343009，China;2Key Laboratory JZfor Biodiversity Science and Ecological Engineering.Ji’an 343009，China

To research of acetylcholinesterase(AChE)inhibitory activity of 63 plant extracts which collected from Jinggangshan.Jiangxi Province.model of AChE inhibitory activity were used.The results showed that under the concentration of 1 mg/mL the ethyl acetate soluble fractions of Sagittaria trifolia and Polygonum thunbergii had more than 90%inhibiting rates to AChE.However.under the concentration of 0.025 mg/mL.most of plants had low inhibition rate less than 30%.except 6 plants such as Duchesnea indica and Macleaya cordata et al.had more than 60%inhibiting rates to AChE.Under the concentration of 1 mg/mL the n-butyl alcohol soluble fractions isolated from ethanol extracts of 7 kinds of plants such as Glechoma longituba.Cuscuta chinensis and Sagittaria trifolia et al.had more than 80%inhibiting rates to AChE.Under the concentration of 0.025 mg/mL more than 22 kinds of plants Dendrobenthamia elegans etc.had more than 50%inhibiting rates to AChE.Under the concentration of 1 mg/mL the petroleum ether soluble fractions isolated from ethanol extracts of 8 kinds of plants such as Peucedanum violaceum.Macleaya cordata and Polygonum perfoliatum et al.had more than 90%inhibiting rates to AChE.Under the concentration of 0.025 mg/mL.More than 17 kinds of plants Peucedanum violaceum etc.had more than 50%inhibiting rates to AChE.On the contrary.some plant extracts even enhanced this enzyme.

Plants extracts;Acetylcholinesterase(AChE);Inhibitor;Activity evaluation

1001-6880(2012)10-1429-09

2012-02-22 接受日期:2012-04-19

國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(30760031);江西省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(20114BAB204025);江西省生物學(xué)高水平學(xué)科項(xiàng)目

*通訊作者 E-mail:shwyin@126.com

R931.77

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