崔麗麗，于詠蘭，劉 帥，王貝貝，張兆霞，汪 明

（中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院 農(nóng)業(yè)部動(dòng)物流行病學(xué)與人畜共患病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 農(nóng)業(yè)部國(guó)家動(dòng)物原蟲實(shí)驗(yàn)室，北京 海淀100193）

龔地弓形蟲（Toxoplasmagondii）是一種呈世界范圍分布的能夠感染多種動(dòng)物的寄生性原蟲。目前研究表明，孕婦感染弓形蟲后可導(dǎo)致早產(chǎn)、流產(chǎn)、胎兒發(fā)育畸形。此外，弓形蟲感染與艾滋病（AIDS）有密切的關(guān)系［1］。在我國(guó)，1978年崔君兆首次在國(guó)內(nèi)進(jìn)行流行病學(xué)研究，采用統(tǒng)一的IHA方法檢測(cè)全國(guó)81 963人血清平均感染率為5.17%［2］。2005年公布的全國(guó)人體重要寄生蟲病現(xiàn)狀調(diào)查報(bào)告顯示，國(guó)人弓形蟲病平均感染率為7.88%［3］。趙樹馨等1984～1986年期間檢測(cè)了1 297例早孕婦女血清抗弓形蟲抗體，其感染率為12.5%［4］。與人類關(guān)系密切的犬、貓弓形蟲感染率也非常普遍。據(jù)統(tǒng)計(jì)，1985～2006年期間，我國(guó)犬弓形蟲感染率在0.66%～62.3%之間不等，貓弓形蟲感染率在14.06%～78%之間［5］。此外，有調(diào)查顯示，對(duì)接觸動(dòng)物、生肉制品等暴露機(jī)會(huì)較多從業(yè)者，其弓形蟲感染率亦較其他人員高得多［6］。隨著寵物品種和數(shù)量的急劇增加，人類與動(dòng)物接觸的日益頻繁，通過(guò)動(dòng)物將寵物源人畜共患病傳播給人類的風(fēng)險(xiǎn)日益加大，給人類健康和正常生活帶來(lái)了威脅［7］。因此，無(wú)論是就動(dòng)物本身的健康而言，還是考慮到公眾健康，充分了解犬貓的弓形蟲發(fā)病及感染情況都具有重要現(xiàn)實(shí)意義。為此，筆者運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）方法對(duì)北京地區(qū)2 541只家養(yǎng)犬貓及201只流浪貓的弓形蟲感染情況進(jìn)行了調(diào)查，并對(duì)部分陽(yáng)性病例進(jìn)行了回訪調(diào)查。

1 材料與方法

1.1 主要試劑 動(dòng)物弓形蟲IgG抗體酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒，珠海海泰生物制藥有限公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號(hào)：20100614；20100803；20110501。

1.2 主要儀器及器材 酶標(biāo)儀iMark，購(gòu)自BIORAD公司；Centrifuge5810R臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)，購(gòu)自德國(guó)Eppendorf公司。

1.3 樣本采集及處理 采集家養(yǎng)犬2 100只、家養(yǎng)貓588只、流浪貓201份血樣。每只動(dòng)物采取1.5 mL～2mL靜脈血，3 000r／min離心5min，分離血清置－20℃保存?zhèn)錂z。

1.4 檢測(cè)方法 ELISA檢測(cè)方法按照珠海海泰生物制藥有限公司生產(chǎn)說(shuō)明書進(jìn)行操作。應(yīng)用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 家養(yǎng)犬、貓弓形蟲感染情況 2010年5月至2011年4月份期間，共采集到2 541份家養(yǎng)犬、貓血清樣本（家養(yǎng)犬1 876份，家養(yǎng)貓561份）。采用ELISA檢測(cè)方法對(duì)其進(jìn)行了血清弓形蟲IgG抗體的檢測(cè)，共檢測(cè)出犬貓弓形蟲IgG抗體陽(yáng)性樣本615份（24.2%），其中犬陽(yáng)性樣本467份（24.9%），貓陽(yáng)性樣本119份（21.2%）。用配對(duì)資料卡方檢驗(yàn)分析顯示，家養(yǎng)犬、貓檢測(cè)結(jié)果差異不顯著（P＞0.05）（表1）。

表1 北京市家養(yǎng)犬貓弓形蟲IgG抗體檢測(cè)結(jié)果

2.1.1 家養(yǎng)犬弓形蟲感染情況調(diào)查

2.1.1.1 不同季節(jié)家養(yǎng)犬弓形蟲血清抗體陽(yáng)性率

在1 876份犬血清中，不同季節(jié)采集的犬血清弓形蟲抗體陽(yáng)性率變化較大（表2），其中夏季弓形蟲陽(yáng)性率最高為30.0%，與陽(yáng)性率最低的春季20.4%差異顯著（P＜0.05）。

表2 家養(yǎng)犬血清弓形蟲IgG抗體檢測(cè)結(jié)果季節(jié)分布

2.1.1.2 不同性別家養(yǎng)犬弓形蟲血清抗體陽(yáng)性率

對(duì)已知性別的1 368只犬的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析（表3），發(fā)現(xiàn)雌性犬血清弓形蟲抗體陽(yáng)性率為25%，雄性犬血清弓形蟲抗體陽(yáng)性率為24.0%。用配對(duì)資料卡方檢驗(yàn)分析顯示，二者差異不顯著（P＞0.05）。

表3 不同性別家養(yǎng)犬弓形蟲血清抗體陽(yáng)性率

2.1.1.3 不同年齡段家養(yǎng)犬弓形蟲血清抗體陽(yáng)性率 對(duì)已知年齡的1 474只犬的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析（表4），我們的檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著犬年齡增長(zhǎng)，弓形蟲血清抗體陽(yáng)性率呈逐漸上升趨勢(shì)。9月齡以內(nèi)犬弓形蟲血清抗體陽(yáng)性率僅為15.1%，而大于6歲的犬弓形蟲血清抗體陽(yáng)性率達(dá)到了27.2%。用配對(duì)資料卡方檢驗(yàn)分析顯示，兩個(gè)年齡段之間，犬弓形蟲血清抗體陽(yáng)性率差異顯著（P＜0.05）。

表4 各個(gè)年齡階段家養(yǎng)犬弓形蟲血清抗體陽(yáng)檢測(cè)結(jié)果

2.1.2 家養(yǎng)貓弓形蟲感染情況調(diào)查

2.1.2.1 不同季節(jié)家養(yǎng)貓弓形蟲血清抗體陽(yáng)性率

對(duì)561只貓的血清弓形蟲抗體檢測(cè)結(jié)果，根據(jù)季節(jié)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析顯示（表5），隨著季節(jié)變化，貓弓形蟲抗體陽(yáng)性率也有不同，其中春季陽(yáng)性率最高為25.8%，秋季陽(yáng)性率最低為15.3%，用配對(duì)資料卡方檢驗(yàn)分析，結(jié)果表明，不同季節(jié)家養(yǎng)貓血清弓形蟲抗體陽(yáng)性率差異顯著（P＜0.05）。

表5 家養(yǎng)貓血清弓形蟲IgG抗體檢測(cè)結(jié)果季節(jié)分布

2.1.2.2 不同性別家養(yǎng)貓弓形蟲血清抗體陽(yáng)性率

對(duì)312份已知性別的家養(yǎng)貓血清抗體檢測(cè)結(jié)果按性別分類統(tǒng)計(jì)（表6），結(jié)果顯示，雄性家養(yǎng)貓弓形蟲陽(yáng)性率較雌性家養(yǎng)貓弓形蟲陽(yáng)性率高，但是用配對(duì)資料卡方檢驗(yàn)分析顯示，二者沒(méi)有顯著差異（P＞0.05）。

表6 不同性別家養(yǎng)貓弓形蟲血清抗體陽(yáng)性率

2.1.2.3 不同年齡段家養(yǎng)貓弓形蟲血清抗體陽(yáng)性率 對(duì)398份已知年齡的家養(yǎng)貓血清抗體檢測(cè)結(jié)果，按年齡分類統(tǒng)計(jì)（表7）顯示，隨著年齡增長(zhǎng)家養(yǎng)貓弓形蟲血清抗體陽(yáng)性率有明顯升高。其中大于6歲的家養(yǎng)貓弓形蟲血清抗體陽(yáng)性率顯著高于3月齡～9月齡（P＜0.05）和3歲～6歲之間的家養(yǎng)貓（P＜0.05）。

表7 各個(gè)年齡階段家養(yǎng)貓弓形蟲血清抗體陽(yáng)檢測(cè)結(jié)果

2.2 流浪貓弓形蟲感染情況 收集流浪貓血清201份，經(jīng)檢測(cè)陽(yáng)性樣本61份，弓形蟲抗體陽(yáng)性率為30.3%，明顯高于家養(yǎng)貓的弓形蟲抗體陽(yáng)性率21.2%。用配對(duì)資料卡方檢驗(yàn)分析顯示，二者檢測(cè)結(jié)果差異顯著（P＜0.05）。

2.3 家養(yǎng)犬貓弓形蟲抗體陽(yáng)性病例回訪調(diào)查 對(duì)25例弓形蟲抗體陽(yáng)性家養(yǎng)犬病例和37例弓形蟲抗體陽(yáng)性家養(yǎng)貓病例進(jìn)行了回訪調(diào)查，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該62個(gè)動(dòng)物主人弓形蟲檢測(cè)結(jié)果均為陰性。同時(shí)筆者發(fā)現(xiàn)，家養(yǎng)犬都有天天外出遛的習(xí)慣，而家養(yǎng)貓大都很少外出。大多數(shù)動(dòng)物主人對(duì)動(dòng)物的飲食也都比較注意，考慮到動(dòng)物的身體健康，堅(jiān)持選擇喂給狗糧、貓糧，也有少數(shù)的主人會(huì)喂給動(dòng)物生魚生肉。其中此次調(diào)查回訪的37例弓形蟲抗體陽(yáng)性家養(yǎng)貓中有4只是主人收養(yǎng)的流浪貓。

3 討論

從1908年Nicolle及其同事發(fā)現(xiàn)弓形蟲至今已有百年的歷史，許多國(guó)家都有關(guān)于弓形蟲的血清流行病學(xué)的調(diào)查報(bào)道。不同國(guó)家和地區(qū)的弓形蟲陽(yáng)性率有很大差異，我國(guó)人口標(biāo)準(zhǔn)化感染率為6.02%，國(guó)際人口標(biāo)準(zhǔn)化感染率為5.52%［2］?，F(xiàn)已報(bào)道的各國(guó)人口弓形蟲陽(yáng)性率最低的為韓國(guó)4%，最高的為巴西92%［8］。Dubey等人發(fā)現(xiàn)不同年齡、性別和品種的貓對(duì)弓形蟲都易感［8］。世界各地也有犬的相關(guān)報(bào)道，1998年Lin發(fā)現(xiàn)犬的弓形蟲陽(yáng)性率隨著年齡增長(zhǎng)而升高［9］。目前研究表明，人類可以通過(guò)感染弓形蟲的貓，食生肉或未完全煮熟的肉，或者通過(guò)胎盤由母體垂直傳播而感染弓形蟲，還可以通過(guò)接觸被弓形蟲陽(yáng)性貓糞便污染的寵物狗而感染［8］。因此，與人類關(guān)系密切的犬貓，在弓形蟲的傳播過(guò)程中起著非常重要的作用，充分了解犬貓的弓形蟲發(fā)病及感染情況都具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

本次試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，弓形蟲感染對(duì)于家養(yǎng)犬、家養(yǎng)貓、流浪貓都比較普遍。但不同動(dòng)物弓形蟲血清抗體陽(yáng)性率不同，流浪貓陽(yáng)性率最高為30.3%，其次是家養(yǎng)犬24.9%，家養(yǎng)貓21.2%。通過(guò)對(duì)62例弓形蟲陽(yáng)性病例的調(diào)查回訪發(fā)現(xiàn)，弓形蟲的感染可能與犬、貓的飲食有關(guān)，流浪貓接觸感染源的機(jī)會(huì)較多，而作為寵物的家養(yǎng)犬貓，有些是長(zhǎng)期生活在室內(nèi)，飼喂商品犬、貓糧，不接觸生肉，所以比例較低。另外，家養(yǎng)犬一般都有外出遛的習(xí)慣，而家養(yǎng)貓很少外出，這就大大增加了家養(yǎng)犬感染弓形蟲的機(jī)會(huì)。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，北京家養(yǎng)犬、貓血清弓形蟲陽(yáng)性率略高于上海市家養(yǎng)犬、貓的陽(yáng)性率［10］，相對(duì)于2006年于詠蘭［11］的檢測(cè)結(jié)果也較高。不同季節(jié)弓形蟲陽(yáng)性率也有差別，家養(yǎng)犬夏季陽(yáng)性率最高30.0%，家養(yǎng)貓春季陽(yáng)性率最高25.8%。不同性別家養(yǎng)犬貓弓形蟲血清陽(yáng)性率沒(méi)有顯著差異，這與于詠蘭［11］報(bào)道的結(jié)果一致。

Dubey［12］和 Omata［13］等認(rèn)為犬貓不僅可以通過(guò)后天感染弓形蟲而產(chǎn)生相應(yīng)抗體，幼齡的犬、貓也可以從母體獲得較低滴度的母源抗體。事實(shí)上，我們的檢測(cè)結(jié)果也發(fā)現(xiàn)，9月齡以下家養(yǎng)犬、貓也存在一定的弓形蟲感染。同時(shí)，我們也發(fā)現(xiàn)隨著年齡增長(zhǎng)，家養(yǎng)犬、貓弓形蟲陽(yáng)性率均有明顯增高。6歲以上家養(yǎng)犬、貓弓形蟲陽(yáng)性率分別達(dá)到了27.2%和26.9%。這些結(jié)果提示隨著年齡的增長(zhǎng)，犬貓感染弓形蟲的機(jī)會(huì)增多。

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