胡曉嵐，虞英明，張 蓉

(1.杭州澳醫(yī)保靈藥業(yè)有限公司，浙江杭州310022; 2.寧夏農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所，寧夏銀川750002)

噠螨靈在枸杞中的殘留動(dòng)態(tài)研究

胡曉嵐1，虞英明1，張 蓉2

(1.杭州澳醫(yī)保靈藥業(yè)有限公司，浙江杭州310022; 2.寧夏農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所，寧夏銀川750002)

采用3種施藥方式:推薦劑量(150mg·L－1)一次施藥、加倍劑量(300mg·L－1)一次施藥和推薦劑量(150mg ·L－1)二次施藥，在枸杞田噴施15%噠螨靈乳油，于施藥后不同時(shí)間采集鮮果，采用氣相色譜法對(duì)果實(shí)樣品進(jìn)行分析。結(jié)果表明，在一次施藥的田塊，在推薦劑量和加倍劑量下，噠螨靈的24h降解率分別達(dá)到66.0%和68.5%，7d后分別達(dá)到99.1%和99.4%。經(jīng)計(jì)算，藥劑的降解半衰期分別為0.65、0.63d。在同為推薦劑量的條件下，二次施藥可以明顯提高噠螨靈在枸杞中的殘留量。與現(xiàn)有的最高殘留限量(Maximum residue limit，MRL)值相對(duì)照，在推薦劑量一次施藥和加倍劑量一次施藥的田塊，鮮果的采集可以分別在施藥的24h和3d后進(jìn)行;在推薦劑量二次施藥的田塊，鮮果的采集可以在第二次施藥7d后進(jìn)行。

噠螨靈，枸杞，殘留動(dòng)態(tài)

枸杞屬于茄科(Solanaceae)枸杞屬(Lycium)，是一種多年生落葉灌木。枸杞的籽、花、葉、根、皮都可入藥。其果實(shí)具有滋補(bǔ)肝腎、益精養(yǎng)血、明目消翳、潤(rùn)肺止咳的作用。枸杞在中國各地均有分布，但主要集中在西北地區(qū)，且逐漸成為栽培品種。在栽培條件下，枸杞的各個(gè)生長(zhǎng)時(shí)期都有蟲害發(fā)生，主要害蟲有蚜蟲、癭螨、銹螨、癭蚊，次要害蟲包括木虱、負(fù)泥蟲、跳甲等。枸杞的果實(shí)、葉、花，甚至嫩梢都會(huì)受到危害，因此不可避免地需要使用殺蟲劑。噠螨靈(pyridaben)屬于觸殺性殺螨劑，對(duì)害螨的各個(gè)發(fā)育階段均有防效，并且與傳統(tǒng)殺螨劑無交互抗性。噠螨靈單劑及混劑在果園、棉田以及蔬菜地害螨的防治中有著廣泛應(yīng)用。人們也曾嘗試以噠螨靈作為枸杞害螨的防治藥劑［1－4］。但是相應(yīng)的殘留動(dòng)態(tài)，國內(nèi)外迄今未見公開報(bào)道。本文以15%噠螨靈乳油(EC)作為受試藥劑，以栽培枸杞作為受試植物，采用推薦劑量(150mg·L－1)一次、加倍劑量(300mg·L－1)一次和推薦劑(150mg·L－1)量二次3種不同的方式施藥，于施藥后不同時(shí)間采集鮮果樣品，采用氣相色譜法檢測(cè)樣品中的噠螨靈殘留，為安全用藥提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

噠螨靈標(biāo)準(zhǔn)品 純度99.8%，德國 Dr. Ehrenstorfer GmbH;乙酸乙酯、丙酮、石油醚(60～90℃)、氯化鈉、無水硫酸鈉、弗羅里硅土(60～100目)等試劑 均為分析純;弗羅里硅土 用前在馬福爐中600℃灼燒4h，使其活化;無水硫酸鈉 用前在馬福爐中300℃灼燒2h，使其徹底脫水;噠螨靈乳油西安常隆正華作物保護(hù)有限公司。

HP6890氣相色譜儀，2FEC－85A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，玻璃層析柱(30×?1.0cm)，高速組織勻漿機(jī)，分液漏斗，容量瓶，國際型振蕩器等。

1.2 田間實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

實(shí)驗(yàn)于2007年夏季在寧夏農(nóng)林科學(xué)院蘆花臺(tái)枸杞研究所實(shí)驗(yàn)基地進(jìn)行。枸杞品種為寧杞1號(hào)，樹齡5年。受試藥劑為15%噠螨靈乳油。實(shí)驗(yàn)共包含3個(gè)施藥區(qū)，施藥區(qū)1:推薦劑量(150mg·L－1)一次施藥，施藥區(qū)2:加倍劑量(300mg·L－1)一次施藥，施藥區(qū)3:推薦劑量(150mg·L－1)二次施藥。每個(gè)施藥區(qū)設(shè)3個(gè)重復(fù)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)包含9個(gè)植株，分別掛牌標(biāo)記。施藥日期為7月3日。對(duì)于施藥區(qū)3，第一次施藥7d后進(jìn)行第二次施藥。

對(duì)于施藥區(qū)1和施藥區(qū)2，施藥后1h，1、3、5、7、14、21、28d采集成熟鮮果。每個(gè)小區(qū)采樣0.5kg。采集的樣品置于－20℃低溫冰柜內(nèi)冷藏待測(cè)。對(duì)于施藥區(qū)3，第二次施藥后7、14、21d采樣。每個(gè)小區(qū)采樣0.5kg。采集的樣品置于－20℃低溫冰柜內(nèi)冷藏待測(cè)。

1.3 樣品前處理

1.3.1 提取 將枸杞樣品用高速組織勻漿機(jī)粉碎，用電子天平稱取20.00g，置于250mL具塞平底燒瓶中，加入60mL丙酮，蓋上塞子，在振蕩器上以150r/min的速度振蕩30min。將混合液轉(zhuǎn)入離心管，在3000r/min轉(zhuǎn)速下離心3.0min。離心后獲得的上清液轉(zhuǎn)入平底燒瓶，沉淀用50mL丙酮懸浮，重復(fù)一次上述操作，合并上清液于平底燒瓶中。將合并后的液體在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上以不高于40℃濃縮至約50mL。轉(zhuǎn)移濃縮液到預(yù)先注入200mL 10%NaCl的500mL分液漏斗中，再加入50mL石油醚，劇烈振蕩3min，靜置分層。收集位于上層的石油醚萃取液，使其經(jīng)過裝有無水Na2SO4的三角漏斗，收集濾液置于250mL平底燒瓶中，位于下層的水相用50mL石油醚再次萃取，合并萃取液，在40℃以下減壓濃縮至約2mL，室溫下用N2吹干，用5mL洗脫液A(乙酸乙酯∶石油醚=5∶95，v/v)溶解殘留物。待下一步凈化。

1.3.2 凈化 柱層析法:取內(nèi)徑1cm的玻璃層析柱，其中依次填入2cm無水Na2SO4、5g活化的弗羅里硅土、2cm無水Na2SO4，用橡皮錘輕輕敲實(shí)，用30mL石油醚預(yù)淋。當(dāng)預(yù)淋液到達(dá)下端的無水Na2SO4時(shí)，提取液上柱。先用20mL洗脫液A淋洗(棄去濾出液);再注入50mL洗脫液B(乙酸乙酯∶石油醚= 15∶85，v/v)，收集濾液于100mL梨形燒瓶中，40℃以下減壓濃縮至約2mL，室溫下用N2吹干，用石油醚定容至2mL，待測(cè)。

1.4 樣品檢測(cè)

噠螨靈在柑桔、蘋果、蔬菜、茶葉等農(nóng)作物中的殘留分析方法已有報(bào)道。所用的分析手段包括氣相色譜(GC)、高效液相色譜(HPLC)、氣質(zhì)聯(lián)用(GCMS)、液質(zhì)聯(lián)用(LC－MS)等［5－11］。根據(jù)樣品特點(diǎn)和實(shí)驗(yàn)室的條件，本文采用劉冬梅等［5］的分析方法并稍做調(diào)整。具體如下。

1.4.1 色譜條件 檢測(cè)器:電子捕獲檢測(cè)器(ECD);色譜柱:HP－5石英毛細(xì)管柱(30m×?0.32mm，0.25μm);柱溫:起始溫度80℃，以50℃/min的速度上升到230℃，停留1min，再以20℃/min的速度上升到260℃，停留7min;進(jìn)樣口溫度:260℃;檢測(cè)器溫度:260℃;衡壓模式進(jìn)樣(壓強(qiáng):10.04psi);進(jìn)樣量: 1μL;定量方法:外標(biāo)法(峰面積)。

1.4.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線 取噠螨靈標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液，用丙酮稀釋配制成2.0、1.0、0.5、0.2、0.1μg·mL－1的工作液，按照“1.4.1”規(guī)定的色譜條件進(jìn)行檢測(cè)，記錄不同進(jìn)樣量對(duì)應(yīng)的峰面積。以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為自變量(X)，以峰面積為應(yīng)變量(Y)，采用DPS建立線性回歸方程。

1.4.3 添加回收 稱取20g空白樣品置于平底燒瓶中，分別加入濃度為0.100、1.00、10.0mg·L－1的噠螨靈標(biāo)準(zhǔn)溶液，制成藥劑含量分別為0.0050、0.0500、0.5000mg·kg－1的加標(biāo)樣品，按“1.3”規(guī)定的方法進(jìn)行樣品前處理，再按“1.4.1”所設(shè)定的條件進(jìn)行殘留分析。

2 結(jié)果與討論

2.1 方法靈敏度及線性范圍

在本文設(shè)定的色譜條件下，樣品的LOD(3倍S/N)和LOQ(10倍S/N)分別為4.0×10－4mg·kg－1和1.3×10－3mg·kg－1，樣品的最小檢出量為4×10－12g。符合國家農(nóng)業(yè)部對(duì)于農(nóng)藥殘留最小檢出量的要求(1.0×10－9g)［5］。標(biāo)準(zhǔn)品的氣相色譜圖見圖1。

圖1 標(biāo)準(zhǔn)品氣相色譜圖Fig.1 GC chromatogram of a standard

測(cè)定結(jié)果表明，噠螨靈色譜峰的峰面積(Y)與進(jìn)樣量(X)在所測(cè)范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，線性方程為Y=30483.2X+2550.7，r=0.9979。

2.2 添加回收率

在0.005～0.500mg a.i.·kg－1的加標(biāo)范圍內(nèi)，噠螨靈的添加回收率介于84.4%～96.5%之間，RSD介于5.7%～7.5%之間(見表1)。檢測(cè)方法符合農(nóng)藥殘留分析要求。

表2 噠螨靈在施藥區(qū)的殘留動(dòng)態(tài)Table 2 Residue trend of pyridaben in field

表3 噠螨靈的降解方程Table 3 Equation for degradation of pyridaben

表1 噠螨靈在枸杞中的添加回收率Table 1 Fortified recovery of pyridaben in fruit of Lycium barbayum L.

2.3 樣品殘留動(dòng)態(tài)

對(duì)采自施藥區(qū)1～3的樣品做殘留分析，其結(jié)果見表2。圖2和圖3分別顯示空白樣品和實(shí)驗(yàn)樣品的氣相色譜圖。從表2可以看出，噠螨靈在施藥區(qū)1和施藥區(qū)2的初始?xì)埩?即施藥后1h的殘留)分別為0.528mg·kg－1和1.770mg·kg－1。施藥24h后，降解率分別為達(dá)到66.0%和68.5%，7d后分別為達(dá)到99.1%和99.4%。藥劑殘留水平之所以下降較快，一方面由于噠螨靈的揮發(fā)和光解作用，另外果實(shí)的生長(zhǎng)稀釋效應(yīng)也是一個(gè)重要原因。從表2還可以看出，同屬一次施藥的田塊，施藥區(qū)2的殘留量總是明顯高于施藥區(qū)1。這與前者的施藥量(300mg·L－1)高于后者(150mg·L－1)有關(guān)。值得注意的是，藥劑殘留量的差異顯著性在施藥區(qū)1和2之間比較，與3個(gè)施藥區(qū)一起比較，其結(jié)果有所不同。后一種比較顯示施藥區(qū)1和施藥區(qū)2的殘留量差異不顯著，但它們均明顯低于施藥區(qū)3。這說明增加施藥次數(shù)比提高用藥量對(duì)殘留水平的影響更大。

從表3可以看出，在一次施藥的條件下，噠螨靈的降解動(dòng)態(tài)能夠較好地吻合一次動(dòng)力學(xué)方程，降解半衰期在推薦劑量下為0.65d，加倍劑量下為0.63d。兩者差別不大。

2.4 安全間隔期

圖2 空白樣品氣相色譜圖Fig.2 GC chromatogram of a blank sample

圖3 實(shí)驗(yàn)樣品氣相色譜圖Fig.3 GC chromatogram of a test sample

我國目前尚未制定噠螨靈在枸杞中的最高殘留限量(MRL);英國和歐盟給出的MRL值均為0.3mg/kg［12－14］。按照上述 MRL標(biāo)準(zhǔn)，在推薦劑量(150mg·L－1)一次施藥的田塊，鮮果的采集可以在施藥24h后進(jìn)行;在加倍劑量(300mg·L－1)一次施藥的田塊，鮮果的采集可以在3d后進(jìn)行;在推薦劑量(150mg·L－1)二次施藥的田塊，第二次施藥7d后采集的果實(shí)是安全的。如果藥農(nóng)采集果實(shí)的時(shí)間點(diǎn)在上述安全間隔期以內(nèi)，所采果實(shí)中的噠螨靈殘留量有可能高于MRL，即殘留超標(biāo)。需要注意的是，安全間隔期與施藥量和施藥次數(shù)相對(duì)應(yīng)。改變施藥方式，安全間隔期也相應(yīng)發(fā)生改變。另外，本實(shí)驗(yàn)在西北地區(qū)干旱長(zhǎng)日照的氣候條件下進(jìn)行，依據(jù)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提出的安全間隔期對(duì)該地區(qū)的藥農(nóng)有較強(qiáng)的指導(dǎo)意義。在其他氣候區(qū)帶，噠螨靈的降解速率或快或慢，本文提出的安全間隔期僅可供相關(guān)地區(qū)藥農(nóng)作為參考。

3 結(jié)論

噠螨靈屬于田間降解速率較快的農(nóng)藥。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，在推薦劑量(150mg·L－1)和加倍劑量(300mg·L－1)下，其降解半衰期分別為0.65d和0.63d。在推薦劑量一次施藥、加倍劑量一次施藥和推薦劑量二次施藥的田塊，采集鮮果的安全間隔期分別為24h、3d和7d。

［1］瞿唯鋼，林榮華，沈瑞清，等.14種殺螨劑防治枸杞銹螨的室內(nèi)活性實(shí)驗(yàn)［J］.農(nóng)藥科學(xué)與管理，2010(5):53－55.

［2］張怡，張宗山，王芳，等.6種農(nóng)藥對(duì)枸杞癭螨幼蟲的室內(nèi)毒力實(shí)驗(yàn)［J］.陜西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006(2):30，59.

［3］張怡，張宗山，王芳，等.枸杞癭螨防治農(nóng)藥室內(nèi)篩選及大田防治技術(shù)［J］.林業(yè)科技，2007(1):37－39.

［4］張麗榮，康萍芝.幾種殺螨劑防治枸杞銹螨藥效實(shí)驗(yàn)［J］.現(xiàn)代農(nóng)藥，2005，4(2):44－45.

［5］劉冬梅，胡德禹，宋寶安，等.氣相色譜法測(cè)定柑橘中噠螨靈的農(nóng)藥殘留［J］.農(nóng)藥，2009，48(3):202－203.

［6］陳麗萍，李順芳，林薌華.噠螨靈在蔬菜上殘留的氣相色譜法測(cè)定［J］.農(nóng)藥科學(xué)與管理，2008，29(7):7－10.

［7］鄔元娟，陳子雷，岳輝，等.氣相色譜法測(cè)定黃瓜中噠螨靈殘留量［J］.農(nóng)藥，2008，47(5):363－364.

［8］鄔元娟，陳子雷，李明立，等.噠螨靈在蘋果上的殘留量檢測(cè)與消解動(dòng)態(tài)［J］.農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)，2007，9(4):41－42.

［9］李蓓，楊仁斌，佘佳榮.噠螨靈的殘留分析方法研究進(jìn)展［J］.農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào)，2007，26(增刊):662－667.

［10］馬輝，張少軍，張東海，等.噠螨靈在蘋果和土壤中的殘留動(dòng)態(tài)研究［J］.河北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，11(1):108－110.

［11］李二虎，胡敏，吳兵兵，等.氣相色譜法測(cè)定茶葉中三氯殺螨醇和噠螨靈的農(nóng)藥殘留［J］.現(xiàn)代農(nóng)藥，2006，5(1): 20－21.

［12］食品安全網(wǎng).農(nóng)藥殘留限量查詢［EB/OL］.http://www.tbt－sps.gov.cn/foodsafe/xlbz/Pages/pesticide.aspx.

［13］Eu Pesticides database－Pesticides Resuidues［EB/OL］. http://ec.europa.eu/sanco_pesticides/public/index.cfm?event =substance.selection.

［14］Security and Health Excutive－Chemicals Regulation Directorate－ MRL database［EB/OL］ .https://secure. pesticides.gov.uk/MRLs/search.asp.

Research of residue level of pyridaben in fruit of cultivated wolfberry Lycium barbayum

HU Xiao－lan1，YU Ying－ming1，ZHANG Rong2
(1.Hangzhou Aoyipollen Pharmaceutical Co.，Ltd.，Hangzhou 310022，China; 2.Institute of Plant Protection，Ningxia Academy of Agriculture and Forestry Sciences，Yinchuan 750002，China)

Field experiments were conducted to study residual trend of pyridaben in fruit of Lycium barbayum L. Emulsifier concentration(EC)of pyridaben of 15%was applied in field of cultivated wolfberry Lycium barbayum in three patterns，one application at recommended rate(150mg·L－1)，one application at double rate(300mg·L－1)，and two applications at recommended rate(150mg·L－1).The fruit was collected several times after the applications，and the residues of pyridaben were analyzed by GC.Result of the study indicated that 24h degradation of the insecticide in field of one application at recommended rate and double rate were detected to be 66.0%and 68.5%，respectively，and the degradation rate 7d after the applications rose up to 99.1%and 99.4% respectively.The half－lives were calculated to be 0.65 and 0.63d，respectively.The second application significantly increased the residue level of pyridaben in case the insecticide was applied in recommended rate.It was reasonable say based on the current value of maximal residual limit(MRL)that in the field of one application at recommended rate and that of one application at double rate the fruit could be collected after 24h and 3d，respectively，and that in field of two application at recommended rate，the fruit could be collected 7d after the second application.

pyridaben;Lycium barbayum L.;residue

TS207.5+3

A

1002－0306(2012)10－0055－04

2011－09－26

胡曉嵐(1966－)，女，工程師，研究方向:食品藥品分析。

國家科技支撐計(jì)劃(2006BAI09B04－11)。