劉 濤，徐玉玲，李 娟，詹永成

（1.成都大學(xué)生物產(chǎn)業(yè)學(xué)院，四川 成都 610106；2.成都大學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)中心，四川 成都 610106；3.南京海陵中藥制藥工藝技術(shù)研究有限公司，江蘇 南京 210049；4.淮海工學(xué)院，江蘇 連云港 222001）

中藥有七情之說(shuō)，即“單行、相須、相使、相反、相畏、相殺、相惡”。研究藥物君臣佐使的差異性，說(shuō)明藥物之間相須、相使、相乘、相惡等或協(xié)同、或制約、或拮抗關(guān)系的客觀存在，以及不同藥味在復(fù)方中地位的主次有重要意義［1］。

按病情需要和藥物性能，選擇兩種以上藥物組合運(yùn)用，以達(dá)到增強(qiáng)藥物的療效，增強(qiáng)治療的作用，這種配伍關(guān)系中醫(yī)謂之相須相使［2］?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)稱之為協(xié)同作用。具有這種協(xié)同作用的中藥組合很多。協(xié)同作用表示兩者相加，可以在控制藥物副作用的同時(shí)，增強(qiáng)藥物的療效，或減少藥物用量而不改變藥物療效［3］。藥性、功能相同或相似的藥物一起使用，其原有功效得以顯著加強(qiáng)，稱相須。 “須”與“需”通，“資用”也。說(shuō)明相須的藥物，關(guān)系非常密切，以至“同類(lèi)不可離也”［4］。

油菜花粉性涼，味甘；入肝、脾、肺經(jīng)，臨床上主要用于腎氣不固，腰膝酸軟，尿后余瀝。普樂(lè)安片 (前列康)主要成分就是油菜花花粉直接打粉壓制成片，是臨床上治療前列腺的首選藥物［5］。野菊花［6］為菊科植物野菊Chrysanthemum indicum L.的干燥頭狀花序。本品性辛，微寒，味苦，歸肝、心經(jīng)。具有抗菌消炎、增強(qiáng)吞噬細(xì)胞吞噬等作用，對(duì)前列腺疾病有較好的療效，如臨床上常用的野菊花栓具有抗菌消炎的功效，用于前列腺炎的治療［7］。

按照中藥配伍理論，相須配伍的藥物性味 (指藥物的即寒、熱、溫、涼性及辛、甘、酸、苦、咸味)應(yīng)一致，如果性味不一致，其配伍后功效是否能達(dá)到協(xié)同作用呢?本實(shí)驗(yàn)以油菜花粉 (性涼，味甘；入肝、脾、肺經(jīng))與野菊花 (性辛，微寒，味苦，歸肝、心經(jīng))配伍，考察此兩類(lèi)藥聯(lián)合應(yīng)用的效果。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 雄性SD大鼠100只，體質(zhì)量190～210 g，清潔級(jí)，由南京江寧區(qū)青龍山動(dòng)物繁殖場(chǎng)提供，許可證:SCXK(蘇)2007-0008。

1.2 藥物與試劑

水提物干膏，每1 g相當(dāng)于原生藥1.88 g(由野菊花與油菜花粉和油菜花粉按照1∶1的配伍比例經(jīng)水提、濃縮干燥而成)。

醇提物干膏 (由野菊花與油菜花粉和油菜花粉按照1∶1的配伍比例經(jīng)醇提、濃縮及乙酸乙酯萃取)，每1 g相當(dāng)于原生藥13.54 g。

角叉菜膠，25 g/瓶，美國(guó)Sigma公司，批號(hào):070912。

前列康 (普樂(lè)安片)，浙江康恩貝藥業(yè)有限公司提供，規(guī)格:0.5 g×60片/瓶，批號(hào):080205。

2 試驗(yàn)方法

參照文獻(xiàn)［8］方法，取大鼠100只，適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，隨機(jī)選擇89只大鼠10%水合氯醛 (350 mg/kg)腹腔麻醉，剪去腹部毛，碘酒、酒精常規(guī)消毒，無(wú)菌條件下切開(kāi)皮膚創(chuàng)口1.5 cm左右，沿腹正中線剖開(kāi)下腹壁，用鑷子輕輕提起膀胱及兩側(cè)精囊，暴露附于精囊內(nèi)側(cè)的前列腺背葉，于兩側(cè)分別注入0.1%角叉菜膠0.1 mL，縫合腹壁肌肉皮膚；其余11只大鼠作為正常組，只剖開(kāi)腹壁，暴露出精囊和前列腺背葉后即回納臟器，縫合肌肉皮膚。所有手術(shù)大鼠放回鼠籠，自由飲食。術(shù)后觀察飼養(yǎng)1周，隨機(jī)分為5組，即:①模型對(duì)照組 (14只)，每天灌胃純凈水2 mL/100 g。②陽(yáng)性藥物組，每天普樂(lè)安片1 g/kg灌胃 (15只)。③水提物中劑量組 (15只):每天水提物溶液2.97 g/kg灌胃。④水提物高劑量組 (15只):每天水提物溶液5.94 g/kg灌胃。⑤乙醇提取物組 (15只):每天乙醇提取物溶液1.06 g/kg灌胃。灌胃容積1 mL/100 g。末次給藥后24 h處死動(dòng)物，開(kāi)腹，觀察前列腺大體形態(tài)。取雙背側(cè)前列腺稱質(zhì)量，計(jì)算前列腺指數(shù)。左側(cè)背葉前列腺置于10%甲醛溶液送病理學(xué)檢查。右側(cè)前列腺稱質(zhì)量，每100 mg加生理鹽水1 mL，放入勻漿器中，于冰水浴中制成勻漿，離心取上清液，進(jìn)行前列腺勻漿液Zn量測(cè)定。統(tǒng)計(jì)各指標(biāo)組間差異。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

4 結(jié)果

4.1 造模結(jié)果 和正常組比較，模型組前列腺指數(shù) (前列腺質(zhì)量/體質(zhì)量×100)明顯增高，具有顯著性差異 (P＜0.05)說(shuō)明造模成功。

4.2 試驗(yàn)結(jié)果 和模型組比較，陽(yáng)性藥物組前列腺指數(shù)有所降低 (P=0.078)，水提物中劑量組和醇提物組前列腺組織含鋅量明顯升高 (P＜0.05或P＜0.01)，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 試驗(yàn)藥物對(duì)前列腺炎大鼠模型前列腺指數(shù)和組織含鋅量的影響

4.3 病理檢驗(yàn)

4.3.1 病理檢驗(yàn)結(jié)果

4.3.1.1 正常組病理檢驗(yàn)結(jié)果 正常組 (隨機(jī)選取10只):前列腺腔大小不一，腺上皮為單層立方或單層柱狀上皮，細(xì)胞排列整齊，腺腔內(nèi)有多量伊紅染的分泌物，并見(jiàn)上皮折疊形成的皺壁。本組未查見(jiàn)明顯病變。

4.3.1.2 模型組病理檢驗(yàn)結(jié)果 模型組 (隨機(jī)選取10只):受檢前列腺組織病變范圍不等，半數(shù)受檢組織病變范圍為4級(jí)。間質(zhì)血管輕度擴(kuò)張、充血，水腫，并出現(xiàn)以淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞為主的炎細(xì)胞浸潤(rùn)，炎細(xì)胞浸潤(rùn)程度多為3級(jí)。間質(zhì)纖維組織增生，散在分布、部分區(qū)域呈束狀分布，少數(shù)可見(jiàn)玻璃樣變。

4.3.1.3 陽(yáng)性藥物組病理檢驗(yàn)結(jié)果 陽(yáng)性藥物組 (隨機(jī)選取9只):本組半數(shù)前列腺炎癥病變范圍為1級(jí)或2級(jí)，僅累及部分前列腺組織。半數(shù)病例淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞散在分布，為1級(jí)。半數(shù)間質(zhì)可見(jiàn)散在分布的纖維組織，半數(shù)不明顯。

4.3.1.4 水提物高劑量組病理檢驗(yàn)結(jié)果 水提物高劑量組(隨機(jī)選取10只):本組病變程度較模型組略輕。多數(shù)病例病變范圍為1～3級(jí)，炎細(xì)胞浸潤(rùn)多數(shù)為1～2級(jí)，間質(zhì)散在纖維組織增生。

4.3.1.5 水提物中劑量組病理檢驗(yàn)結(jié)果 水提物中劑量組(隨機(jī)選取10只):本組病變程度較模型組略輕，與水提物高劑量組相似。多數(shù)病例病變范圍為1～3級(jí)，炎細(xì)胞浸潤(rùn)多數(shù)為2級(jí)，間質(zhì)散在纖維組織增生，少數(shù)區(qū)域?yàn)槭鵂罘植肌?/p>

4.3.1.6 乙醇提取物組病理檢驗(yàn)結(jié)果 乙醇提取物組 (隨機(jī)選取10只):本組病變程度較模型組及水提物中、高組略輕。多數(shù)病例病變范圍為1～3級(jí)，炎細(xì)胞浸潤(rùn)多數(shù)為1～2級(jí)，間質(zhì)纖維組織增生不明顯或散在纖維組織增生。見(jiàn)表2，圖1。

4.3.2 病理檢驗(yàn)結(jié)論

4.3.2.1 本試驗(yàn)病理模型檢驗(yàn)結(jié)論 本法復(fù)制的大鼠前列腺炎病變累及范圍廣，病理表現(xiàn)為間質(zhì)血管擴(kuò)張、充血，水腫，并出現(xiàn)以淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞為主的炎細(xì)胞浸潤(rùn)。間質(zhì)纖維組織增生。

表2 各組前列腺炎病變比較

4.3.2.2 本實(shí)驗(yàn)各組炎癥病理結(jié)論 各組炎癥輕重程度相比較，以乙醇提取物組病變程度較輕。

5 結(jié)論

5.1 藥效試驗(yàn)結(jié)果表明油菜花粉和野菊花配伍后對(duì)角叉菜膠性前列腺炎大鼠模型具有一定的治療作用，但作用不明顯，與陽(yáng)性藥物組相比，亦無(wú)明顯效果。

5.2 病理檢驗(yàn)結(jié)果表明以乙醇提取物組病變程度較輕，炎細(xì)胞浸潤(rùn)程度及間質(zhì)纖維組織增生與模型組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但與對(duì)照組亦無(wú)顯著性差異。

6 討論

6.1 目前有關(guān)前列腺模型主要?dú)w納起來(lái)分兩大類(lèi):一類(lèi)為細(xì)菌性前列腺炎模型，另一類(lèi)為非細(xì)菌性前列腺炎模型。本實(shí)驗(yàn)采用非細(xì)菌性前列腺炎模型，即角叉菜膠致大鼠實(shí)驗(yàn)性模型［9］，兩藥配伍后對(duì)大鼠細(xì)菌性前列腺炎模型是否有協(xié)同作用有待進(jìn)一步研究。

圖1 病理照片 (切片厚度約3～4 μm，HE染色，于LEICA DMLB光學(xué)顯微鏡下觀察)

6.2 微量元素Zn是促進(jìn)性腺發(fā)育和維持性功能不可缺少的元素。它能增加血中睪酮水平，促進(jìn)前列腺的正常分泌。Zn亦能激活機(jī)體的活性酶，增強(qiáng)機(jī)體的免疫力和白細(xì)胞的趨化功能，對(duì)前列腺炎的癥狀和性功能的改善均有利。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道慢性前列腺炎綜合征 (CPS)患者前列腺液中Zn離子明顯較正常為低，治愈后前列腺液中含Zn離子量恢復(fù)正常。提示Zn元素的缺乏也是CPS的致病因素之一［10］。但Blacklock等研究發(fā)現(xiàn)慢性細(xì)菌性前列腺炎與非細(xì)菌性前列腺炎患者前列腺液中含鋅量無(wú)顯著差異，前列腺炎患者雖然前列腺含鋅量降低，但其血漿含鋅量正常，說(shuō)明前列腺液含鋅量降低并非由于體內(nèi)缺鋅造成的，而是由于前列腺的組織細(xì)胞攝取和排泌鋅的功能受損造成的［11］。本研究中模型組與空白組中含鋅量無(wú)顯著性差異，對(duì)此我們作進(jìn)一步研究討論。

6.3 中藥配伍是中藥臨床應(yīng)用的主要形式，歷代醫(yī)家積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)，受到中醫(yī)藥界的廣泛重視。中藥配伍理論是中藥理論中的重要組成部分，對(duì)中藥的臨床配伍應(yīng)用具有重要的指導(dǎo)意義，對(duì)于相須理論，李時(shí)珍解釋為“同類(lèi)不可離也”，即同類(lèi)藥物 (指性味相同)關(guān)系密切的配伍。本研究的結(jié)果表明，不是任何功效性能相同或相似的藥物都能產(chǎn)生滿意的相須效果，這其中存在特異性選擇問(wèn)題。功效相同 (似)的藥物之間，既有一定的共同性，又有其一定的特殊性［12-14］。油菜花粉和野菊花配伍后，對(duì)于前列腺炎大鼠模型并未達(dá)到相須配伍的目的，其原因很有可能是這兩味的藥物性味不一致，油菜花粉的性味為性涼，味甘；入肝、脾、肺經(jīng)，野菊花的性味為味苦、辛，微寒。歸肝、心經(jīng)。

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