亢 瑋，王文義，王友國

(魯南制藥集團股份有限公司，山東臨沂276006)

阿昔莫司(acipimox)抑制游離脂肪酸自脂肪組織釋放，降低血中極低密度(VLDL)和低密度(LDL)脂蛋白濃度，降低甘油三酯和總膽固醇水平。可用于高甘油三酯血癥(IV型高脂蛋白血癥);高膽固醇血癥(Ⅱa型高脂蛋白血癥);高甘油三酯和高膽固醇血癥(Ⅱb型，Ⅲ型及Ⅴ型高脂蛋白血癥)。在阿昔莫司分散片的質(zhì)量研究過程中，本實驗采用反相高效液相色譜法，建立其含量測定方法。本法簡便，準確，專屬性強，可用于阿昔莫司分散片的含量測定。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent 1200高效液相色譜儀;VWD檢測器。

1.2 試藥 阿昔莫司對照品(純度為100.0%);阿昔莫司分散片(規(guī)格:0.25 g 批號:090601，090602，090603)(魯南貝特制藥有限公司);乙腈為色譜純，硫酸氫四丁基銨溶液為分析純。

2 色譜條件與色譜圖

色譜柱:Agilent C18(150 mm ×4.6 mm)，流動相:0.005 mol·L－1的硫酸氫四丁基銨溶液(用氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值至6.0)－乙腈(90∶10)，檢測波長為 269 nm，流速為 1.0 mL·min－1。進樣量為20 μL。在上述條件下，按阿昔莫司峰計算理論板數(shù)不低于2 000。樣品溶液色譜圖見圖1。

圖1 樣品溶液色譜圖

3 方法學驗證

3.1 輔料干擾實驗 取處方量輔料適量，按“3.6”項下操作。另取阿昔莫司對照品適量，用流動相溶解并定量配制成10 μg· mL－1的溶液，進樣測定。實驗結(jié)果表明輔料不干擾阿昔莫司的測定。

3.2 線性范圍 取阿昔莫司對照品適量，精密稱定，加流動相溶解并稀釋成每1 mL含0.1 mg的溶液作為貯備液。精密量取貯備液0.1，0.5，1.0，2.0，5.0 mL 置10 mL 容量瓶中，用流動相定容至刻度，搖勻。在上述色譜條件下，進樣20 μL記錄色譜圖。以阿昔莫司濃度C(μg· mL－1)為橫坐標，峰面積A為縱坐標，進行線性回歸，得回歸方程:A=－22.808+81.063C，r=0.999 9。

實驗結(jié)果表明，阿昔莫司在1～50 μg· mL－1濃度范圍內(nèi)，峰面積與濃度線性關系良好。

3.3 精密度實驗 取“3.6”項下的對照溶液連續(xù)進樣5次，以峰面積計算，RSD為0.3%。

3.4 回收率實驗 按處方量取高(120%)、中(100%)、低(80%)3種濃度的阿昔莫司對照品，每個濃度分別稱3份均加入處方量輔料，制成溶液，按“3.6”項下操作，計算回收率，結(jié)果見表1。

3.5 穩(wěn)定性實驗 按含量測定方法，取“3.6”項下的樣品，分別在 0，1，2，4，6，8 h 進行測定，記錄峰面積，RSD 為0.5%，說明樣品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

3.6 含量測定 取本品10片，精密稱定，研細，混合均勻;精密稱取適量(約相當于阿昔莫司10 mg)置于100 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液1 mL置于10 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，作為供試品溶液。另取阿昔莫司對照品適量，用流動相溶解并定量稀釋制成每1 mL含10 μg的溶液，作為對照溶液。分別取對照品溶液和供試品溶液各20 μL注入高效液相色譜儀，記錄峰面積，按外標法計算供試品中阿昔莫司的含量，3批樣品(090601，090602，090603)標示量的百分含量分別為99.8%，99.7%，99.5%。

表1 阿昔莫司分散片回收率實驗

4 討論

有關文獻［1］中流動相采用甲醇－水－冰醋酸(60∶40∶1)為流動相，本方法同時結(jié)合阿昔莫司分散片局頒標準中有關物質(zhì)檢測方法，最終采用0.005 mol·L－1的硫酸氫四丁基銨溶液(用氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值至6.0)－乙腈(90∶10)為流動相，阿昔莫司的理論板數(shù)為7 231，保留時間為3.2 min左右.

［1］公方美，劉加中，孫聚香.HPLC法測定阿昔莫司原料的含量［J］.齊魯藥事，2004，23(7):27－28.