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一株芒果炭疽病拮抗菌抑菌活性的研究及其鑒定

2012-10-24 09:09:58李春玲王慶國胥麗娜陳慶敏
食品工業(yè)科技 2012年11期
關(guān)鍵詞:炭疽病濾液發(fā)酵液

李春玲,王慶國,*,胥麗娜,陳慶敏

(1.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,山東泰安 271018;2.山東省果蔬食用安全工程技術(shù)研究中心,山東濟南 251400)

一株芒果炭疽病拮抗菌抑菌活性的研究及其鑒定

李春玲1,王慶國1,*,胥麗娜2,陳慶敏2

(1.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,山東泰安 271018;2.山東省果蔬食用安全工程技術(shù)研究中心,山東濟南 251400)

從芒果表皮分離得到29株內(nèi)生細菌,對峙培養(yǎng)法發(fā)現(xiàn)菌株B2-1對芒果炭疽病菌絲的生長具有較強的抑制作用。通過離體實驗和活體實驗對拮抗菌株B2-1抑菌活性進行了研究,離體實驗結(jié)果表明,B2-1的發(fā)酵濾液、揮發(fā)性代謝產(chǎn)物以及非揮發(fā)性代謝產(chǎn)物都對芒果炭疽病菌絲的生長有很強的抑制作用,其中B2-1發(fā)酵液的非揮發(fā)性代謝產(chǎn)物對芒果炭疽病菌絲生長的抑制率達到了99.86%,抑菌效果顯著。活體實驗結(jié)果表明,B2-1的菌懸液和發(fā)酵液與對照相比顯著降低了芒果炭疽病的發(fā)病率,提高了芒果的可食用果率。進一步對菌株B2-1進行鑒定,綜合形態(tài)學(xué)觀察和生理生化特征檢測以及16S rDNA序列分析,B2-1菌株被鑒定為枯草芽孢桿菌。

芒果,拮抗菌株B2-1,炭疽病,抑菌活性,鑒定

芒果是著名的熱帶水果,被譽為“熱帶水果之王”,在熱帶水果中排名第三。芒果果實因具有豐富的營養(yǎng)價值而備受國內(nèi)外特別是東方國家消費者的歡迎[1]。炭疽病由膠孢炭疽菌引起[2],是采后芒果的主要病害[3-4],在世界各芒果產(chǎn)區(qū)廣泛發(fā)生[5],其致病菌為黑盤孢科膠孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides Penz)。該菌以分生孢子侵染植物的葉、梢、花穗、果,導(dǎo)致梢枯、葉斑、落葉和落花、落果。炭疽病菌于采前在田間潛伏侵染芒果,采后很難控制,因而易導(dǎo)致貯運期間果實腐爛,縮短芒果的商品貨架期[6]。目前主要依靠化學(xué)殺菌的方法來抑制芒果炭疽病害,也有利用植物提取物防治芒果炭疽病[7-8]。但采用化學(xué)農(nóng)藥防治芒果炭疽病,引入的不安全因素較多,不僅毒害有益的微生物并導(dǎo)致病原菌產(chǎn)生抗藥性,還會造成嚴(yán)重的環(huán)境污染。植物提取液防治芒果炭疽病的方法成本較高,工作量大。生物制劑具有用量少、無殘留、無公害、不形成抗性等特點,是防治芒果炭疽病的理想選擇,應(yīng)用拮抗微生物防治芒果炭疽病害雖然在國內(nèi)外已有一些報道[9-15],但大多都是在采前進行防治,采后防治研究也大多局限于離體實驗。本研究在離體實驗的基礎(chǔ)上,對芒果活體進行接種和浸蘸實驗,統(tǒng)計其自然炭疽病發(fā)病率,該方法與實際情況相結(jié)合更具有實用評價價值,為進一步把生物防治芒果炭疽病的方法應(yīng)用到實際打下了基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

芒果炭疽菌 由中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心提供;拮抗菌株B2-1 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院果蔬保鮮實驗室分離篩選獲得;PDA培養(yǎng)基 馬鈴薯200g,葡萄糖20g,瓊脂15~20g,蒸餾水1000mL;NB培養(yǎng)基 蛋白胨10g,牛肉粉3g,氯化鈉5g,蒸餾水1000mL。

1.2 拮抗菌株B2-1的分離篩選

取10g感染芒果炭疽病的芒果果皮病健交界處,用無菌水進行表面沖洗,晾干,切成長度和寬度為5mm×5mm、厚度為1mm左右的小塊組織,依次用75%乙醇(v/v)、5%NaClO(v/v)分別進行30s、5min的表面消毒,再用無菌水中漂洗3次,研碎,然后轉(zhuǎn)入裝有100mL無菌水的200mL三角瓶中,在28℃下180r/min振蕩培養(yǎng)20min,取原液按常規(guī)稀釋法稀釋成10-2、10-3、10-4,然后各取120μL(包括原液)涂板,28℃下培養(yǎng)。根據(jù)平板上長出的菌落形態(tài),挑取形態(tài)有差異的細菌菌落,純化后用對峙培養(yǎng)法作抗性初篩[16]。在PDA平板中央接種6mm芒果炭疽病的菌落的圓柱形瓊脂塊,28℃恒溫培養(yǎng)24h,在芒果炭疽病菌菌落圓片周圍3cm處沿四個方向,對稱點種分離得到的細菌,一周后觀察抑菌帶產(chǎn)生情況[15],選擇抑菌帶最寬的1個菌株作為芒果炭疽病菌的拮抗細菌進行后續(xù)實驗。

1.3 離體抑菌活性的測定

1.3.1 拮抗菌株B2-1發(fā)酵濾液對芒果炭疽菌絲的抑制作用 NB液體培養(yǎng)基100mL,滅菌后接種一環(huán)活化的B2-1菌種,25℃下180r/min振蕩培養(yǎng)72h,將此發(fā)酵液用無菌過濾器過濾,然后用熔化的PDA培養(yǎng)基進行濃度稀釋,分別稀釋為原濃度的20%、10%和5%,然后將其倒入滅菌的培養(yǎng)皿中冷卻凝固成平板,在平板中央接種6mm的芒果炭疽病圓形瓊脂塊,對照用PDA培養(yǎng)基代替稀釋的發(fā)酵濾液。28℃恒溫培養(yǎng),待對照菌落布滿平板時,測量處理菌落的直徑。每個處理三個重復(fù)。計算拮抗細菌培養(yǎng)濾液對芒果炭疽病菌絲的抑制率,抑制率計算公式[17]如下:

抑制率(%)=[(對照菌落凈生長直徑-處理菌落凈生長直徑)/對照菌落凈生長直徑]×100

1.3.2 拮抗菌株B2-1揮發(fā)性代謝產(chǎn)物對芒果炭疽菌絲的抑制作用 采用平板對扣法[18],在NB平板上接種200μL的B2-1發(fā)酵液(另一處理NB平板涂滿拮抗菌株B2-1),PDA平板中央接種6mm的病菌菌餅后,去皿蓋后與接種B2-1發(fā)酵液的NB平板皿底相扣,然后用保鮮膜封好兩皿底相扣處的邊緣,接種拮抗細菌B2-1的平板在上,置于28℃恒溫培養(yǎng)。以只接種病菌菌餅的PDA平板和不做任何處理的NB平板對扣為對照,7d后測量病菌菌落直徑,計算抑制率[17],每個處理三個重復(fù)。

1.3.3 拮抗菌株B2-1非揮發(fā)性代謝產(chǎn)物對病菌菌絲的抑制作用 采用雙平板—濾紙法。先于直徑9cm的培養(yǎng)皿中倒入15mL PDA培養(yǎng)基為底層培養(yǎng)基,待培養(yǎng)基冷凝后,將預(yù)先準(zhǔn)備好的邊緣上折的直徑為12cm的無菌濾紙輕輕貼于PDA平板上,再向濾紙上倒入10mL PDA培養(yǎng)基為上層培養(yǎng)基,待培養(yǎng)基冷卻后,吸取120μL B2-1發(fā)酵濾液均勻涂抹于上層平板,28℃恒溫培養(yǎng)48h后,除去濾紙以及濾紙上所有部分,并在底層培養(yǎng)基中央接入直徑為6mm的芒果炭疽病病菌菌餅,28℃下恒溫培養(yǎng)7d,測量病菌菌落直徑[19],計算抑制率[17],每個處理三個重復(fù)。

1.4 活體抑菌活性測定

1.4.1 芒果活體接種實驗 將健康七成熟的芒果用2%NaClO(v/v)浸泡2min,自來水沖洗干凈,晾干,用消毒的打孔器在果實的腰部打直徑為5mm、深2mm的傷口。三種處理在傷口部位分別接種20μL的1×108cfu/mL B2-1菌懸液、B2-1發(fā)酵液和450mg/kg的咪酰胺,2h后再共同接種20μL的1×104cfu/mL炭疽病病原孢子菌懸液,以無菌水代替炭疽病病原孢子菌懸液做對照,28℃恒溫培養(yǎng),7~8d后統(tǒng)計并計算果實炭疽病發(fā)病率、可食用果率和病情指數(shù)[9],每個處理3個重復(fù),每個重復(fù)30個芒果。發(fā)病率、可食用果率、病情指數(shù)的計算方法參照文獻[13]。

1.4.2 芒果活體浸蘸實驗 將健康七成熟的芒果用自來水沖洗干凈,晾干待處理。實驗分為三個處理,依次用2L、1×108cfu/mL的B2-1菌懸液、B2-1發(fā)酵液、450mg/kg的咪酰胺做浸蘸,清水浸蘸做對照,自然條件下晾干后置于28℃下恒溫培養(yǎng),讓其自然發(fā)病,待對照炭疽病發(fā)病率達到50%后,統(tǒng)計各處理的發(fā)病率,可食用果率和病情指數(shù)[13],每個處理3個重復(fù),每個重復(fù)30個芒果。

1.5 菌株鑒定

1.5.1 形態(tài)觀察及部分理化特性研究 參照《常見細菌系統(tǒng)鑒定手冊》[20]和《伯杰細菌鑒定手冊》[21],進行菌落形態(tài)觀察、革蘭染色以及接觸酶、好氧性等相關(guān)理化參數(shù)的測定。

1.5.2 16S rDNA測序 采用TIANGEN細菌基因組提取試劑盒提取菌株B2-1的基因組DNA,以基因組DNA為模板,用細菌通用引物27F/1492R進行PCR擴增16S rDNA,上游引物27F:5′-GAGAGTTTGATCCT2 GGCTCAG-3′,下游引物1492R:5′-ACGGGCGGTG2 TGTRC-3′。PCR反應(yīng)條件為:94℃預(yù)變性5min;94℃變性1min、58℃退火1min、72℃延伸1.5min,共36個循環(huán);72℃延伸10min;4℃保存。PCR擴增產(chǎn)物用1%瓊脂糖凝膠電泳分離,PCR擴增產(chǎn)物經(jīng)驗證正確后,可以進行序列測定,序列測定由北京華大基因公司完成,然后對測序得到的16S rDNA基因序列進行Blast分析,根據(jù)Blast結(jié)果并利用MEGA4.0軟件構(gòu)建系統(tǒng)進化樹[22]。

2 結(jié)果與分析

2.1 離體抑菌活性的測定

2.1.1 拮抗菌株B2-1發(fā)酵濾液對芒果炭疽菌絲的抑制作用 從表1結(jié)果得出,拮抗菌株B2-1的發(fā)酵濾液與對照相比,對芒果的炭疽菌絲的生長具有顯著的抑制作用,并且發(fā)酵濾液的濃度越高抑制作用越強。當(dāng)B2-1發(fā)酵濾液的濃度達到20%時,B2-1發(fā)酵濾液對芒果炭疽病菌絲的抑制率達到了84.14%,不同濃度的發(fā)酵濾液對芒果炭疽病菌絲的抑制效果差異顯著(p<0.05)。

表1 拮抗細菌B2-1發(fā)酵濾液對芒果炭疽菌絲的抑制作用Table 1 Effect of antagonistic bacteria fermentation filtrates of B2-1 on mycelia growth of C.gloeosporioides

2.1.2 拮抗菌株B2-1揮發(fā)性及非揮發(fā)性代謝產(chǎn)物對病菌菌絲的抑制作用 從表2可以得出,無論是拮抗細菌B2-1菌株還是其發(fā)酵液的揮發(fā)性代謝產(chǎn)物都不同程度上對芒果炭疽病菌絲的生長具有抑制作用,其中B2-1菌株的揮發(fā)性代謝產(chǎn)物與對照相比對,對芒果炭疽病菌絲抑制效果明顯,B2-1發(fā)酵液的揮發(fā)性代謝產(chǎn)物和B2-1菌株的揮發(fā)性代謝產(chǎn)物對芒果炭疽病菌絲生長的抑制效果差異顯著(p<0.05);B2-1發(fā)酵液的非揮發(fā)性代謝產(chǎn)物與對照相比,對芒果炭疽病菌絲具有明顯的抑制作用,抑制率達到了99.86%,具有較好的應(yīng)用開發(fā)價值。

表2 拮抗細菌B2-1揮發(fā)性及非揮發(fā)性代謝產(chǎn)物對病菌菌絲的抑制作用Table 2 Effect of volatile metabolites or non-volatile metabolites produced by the B2-1 strain on mycelia growth of C.gloeosporioides

2.2 活體抑菌活性的測定

2.2.1 接種實驗 從圖1可以得出,經(jīng)B2-1的發(fā)酵液和菌懸液處理的芒果與對照相比,分別使芒果的可食用果率提高了79.89%和78.31%,控制芒果發(fā)病率在32.8%和45.5%。在可食用果率這個評價指標(biāo)上,B2-1發(fā)酵液處理的芒果與B2-1菌懸液處理的芒果相比,效果無顯著差異。

圖1 不同處理芒果的發(fā)病率、可食用果率、病情指數(shù)Fig.1 Disease incidence,saleable fruit ratio and disease indexof different treatments

2.2.2 浸蘸實驗 不同浸蘸處理的芒果中,發(fā)酵液浸蘸處理的芒果在各個評價指標(biāo)上效果均顯著優(yōu)于其它處理(圖2),與對照相比芒果炭疽病的發(fā)病率降低了50%。B2-1發(fā)酵液、B2-1菌懸液浸蘸處理的芒果與對照相比顯著提高了芒果的可食用果率(p<0.05)。

圖2 不同處理芒果的發(fā)病率、可食用果率、病情指數(shù)Fig.2 Disease incidence,saleable fruit ratio and disease index of different treatments

2.3 菌種鑒定

2.3.1 B2-1菌株的形態(tài)觀察及部分理化特性 B2-1菌株的菌落近似圓形,有褶皺,表面濕潤,不透明。理化性狀測定結(jié)果顯示:B2-1菌株呈革蘭氏陽性,好氧兼性厭氧菌,接觸酶反應(yīng)陽性,淀粉酶水解反應(yīng)陽性。依據(jù)《伯杰細菌鑒定手冊》,將B2-1菌株初步鑒定為芽孢桿菌屬(bacillus spp.)。

2.3.2 分子鑒定 以B2-1菌株的基因組DNA為模板,用細菌通用引物進行PCR擴增,得到一條約1500bp的DNA片段,用DNA回收試劑盒回收該片段進行測序,序列長度為1424bp。序列與GenBank中16S rDNA序列進行比對,菌株B2-1的16S rDNA(1424bp)與芽孢桿菌屬的枯草芽孢桿菌(bacillus subtilis)同源性高達99%。采用MEG A4.0軟件,用N-J法建立系統(tǒng)發(fā)育樹(圖3),結(jié)果顯示菌株B2-1與枯草芽孢桿菌在同一分支上,遺傳進化距離最近。這與形態(tài)學(xué)觀察以及生理特性的測定結(jié)果相一致,可確定菌株B2-1屬于枯草芽孢桿菌(bacillus subtilis),命名為bacillus subtilis B2-1,B2-1的16S rDNA的序列已在Genbank中注冊,序列號為JN256114。

圖3 基于16S rDNA序列構(gòu)建的B2-1菌株的系統(tǒng)進化樹狀圖Fig.3 Phylogenetic tree of B2-1 based on sequences

3 結(jié)論與討論

研究表明,菌株B2-1和其發(fā)酵液的揮發(fā)性代謝產(chǎn)物對芒果炭疽病菌菌絲有很強的抑制作用。考慮到商業(yè)應(yīng)用價值,由于熏蒸操作簡單,成本低,造成交叉感染的風(fēng)險小,并且不會造成果實表面的物理性傷害,因此采用熏蒸的方法對采后果蔬進行保鮮處理深受歡迎,尤其在缺少浸蘸設(shè)備的發(fā)展中國家。可見,B2-1菌株的揮發(fā)性代謝產(chǎn)物對芒果炭疽菌菌絲的抑制作用值得進一步進行大規(guī)模的實驗,確定其商業(yè)應(yīng)用價值。

離體抗菌活性的測定結(jié)果表明,拮抗菌株B2-1的發(fā)酵液及其發(fā)酵液的揮發(fā)性及非揮發(fā)性代謝產(chǎn)物對芒果炭疽菌絲均具有明顯的抑制作用,B2-1菌株發(fā)酵濾液的濃度越高抑制作用越強,發(fā)酵濾液的濃度與其對芒果炭疽菌的抑制效果在一定程度上成正相關(guān)。

拮抗菌株B2-1通過在芒果活體接種實驗測試表明,經(jīng)B2-1菌懸液及發(fā)酵液處理的芒果發(fā)病率明顯低于對照,提高了采后芒果的可食用果率,并且B2-1發(fā)酵液浸蘸處理芒果的品質(zhì)明顯優(yōu)于其它處理,且超過了化學(xué)試劑450mg/kg的咪酰胺的效果,這為進一步把生物防治芒果炭疽病的方法應(yīng)用到實際打下了基礎(chǔ)。

綜合形態(tài)學(xué)觀察和生理生化特征檢測以及16S rDNA序列分析,B2-1菌株被鑒定為枯草芽孢桿菌,命名為bacillus subtilis B2-1。

本實驗表明,芒果內(nèi)生枯草芽孢桿菌B2-1對芒果炭疽病菌具有較強的拮抗作用,這為生物防治芒果炭疽病提供了新的資源與途徑。為了保證B2-1菌株在芒果生物保鮮的過程中對人類健康不會造成危害,后續(xù)研究將進一步測定bacillus subtilis B2-1安全性,并分離純化其抑菌組分,對其作用機制進行深入的研究和探討。

[1]Masibo M,He Q.Major mango polyphenols and their potential significance to human health[J].Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety,2008,7(4):309-319.

[2]Sanders GM,Korsten L,Wehner FC.Survey of fungicide sensitivity in colletotrichum gloeosporioides from different avocado and mango production areas in south africa[J].European Journal of Plant Pathology,2000,106(8):745-752.

[3]Prusky D.Mango diseases:An overview[C].1989:279-287.

[4]Sangchote S.Postharvest diseases of mango fruits and their losses[J].Kasetsart Journal(Natural Sciences),1987(21):81-85.

[5]鄧衛(wèi)利,楊勝遠,熊德元,等.廣西芒果炭疽病菌的生物學(xué)鑒定[J].廣西大學(xué)學(xué)報:自然科學(xué)版,1999,2(6):145-147.

[6]黃思良,霍秀娟,韋剛.芒果炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides的生物學(xué)特性[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報,1999,12(2):83-89.

[7]張娜,關(guān)文強,閻瑞香.芥末精油對芒果采后病原真菌抑制效果和保鮮效應(yīng)的研究[J].食品工業(yè)科技,2011,32(3):349-353.

[8]弓德強,何衍彪,谷會,等.20種植物提取物對芒果炭疽病菌的抑制作用研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2010(10):5149-5151.

[9]何秀娟.篩選芒果采后炭疽病和蒂腐病的生防菌研究[D].武漢:華中農(nóng)業(yè)大學(xué),2006.

[10]楊勝遠,陳桂光,肖功年,等.芒果主要病原菌拮抗微生物的分離篩選[J].植物保護,2004,30(3):55-58.

[11]任建國,黃思良,晏衛(wèi)紅,等.拮抗微生物防治芒果炭疽病研究[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報,2002,15(4):82-85.

[12]Patino-Vera M,Jimenez B,Balderas K,et al.Pi-lot-scale production and liquid formulation of Rhodotorula minuta,a potential biocontrol agent of mango anthracnose[J].Applied Microbiology,2005,99(3):540-550.

[13]張詒仙.芒果炭疽病生物防治研究瓦克青霉(T-141株)的防治效果[J].世界熱帶農(nóng)業(yè)信息,2006(4):24-25.

[14]張魯斌,常金梅,詹儒林.芒果炭疽病拮抗菌的篩選及防治效果研究[J].熱帶農(nóng)學(xué),2010,30(5):12-14.

[15]張榮意,譚志瓊,簡日明.芒果炭疽病菌生防細菌的篩選鑒定及生防潛能的初步研究[J].熱帶作物學(xué)報,1998(3):21-27.

[16]胡雪芹,張洪斌,蘇曉飛.西瓜枯萎病土壤拮抗茵的篩選[J].農(nóng)業(yè)科學(xué)與技術(shù),2008,9(6):132-135.

[17]黃昌華,夏文勝,郭崇明,等.B-HCH菌株的培養(yǎng)及代謝物的初步研究[J].中國生物防治,1996,12(1):11-14.

[18]程麗云.木霉菌(Trichoderma spp.)的種類鑒定及生防菌株的篩選[D].福州:福建農(nóng)林大學(xué),2007.

[19]何紅,蔡學(xué)清,洪永聰,等.辣椒內(nèi)生細菌的分離及拮抗菌的篩選[J].中國生物防治,2002,18(4):171-175.

[20]東秀珠,蔡妙英.常見細菌系統(tǒng)鑒定手冊[M].北京:科學(xué)出版社,2001:62-65.

[21]布坎南RE,吉本斯RE.伯杰細菌鑒定手冊[M].第8版.北京:科學(xué)出版社,1984:729-731.

[22]謝潔,夏天,林立鵬,等.一株桑樹內(nèi)生拮抗菌的分離鑒定[J].蠶業(yè)科學(xué),2009,35(1):121-125.

Study on antibacterial activity and identification of
an antagonistic bacterium for controlling anthracnose diseases of mango

LI Chun-ling1,WANG Qing-guo1,*,XU Li-na2,CHEN Qing-min2
(1.College of Food Science and Engineering,Shandong Agricultural University,Taian 271018,China;
2.Shandong Research Centre for Safety Engineering and Technology of Fruits and Vegetables,Jinan 251400,China)

Five antagonistic bacteria were obtained from 29 endosymbiotic bacteria.B2-1 strain was found to have the strongest antagonism to C.gloeosporioides.In vitro evaluation of antagonistic activity,whether the fermentation filtrate,volatile metabolites and non-volatile metabolites of B2-1 strain,showed a strong inhibition on the mycelia growth of C.gloeosporioides,the non-volatile metabolites of fermentation broth were able to inhibit the mycelial growth of the C.gloeosporioides by 99.86%.For further study,in vivo tests indicated that cell suspension and fermentation broth of bacteria B2-1 also significantly reduced the incidence of mango anthrax,thus showing a good potential for bio-controlling of anthracnose diseases.B2-1 was identified as bacillus subtilis by its morphological features,physiological-biochemical properties and 16S rDNA sequencing analysis.

mango;antagonisticbacteriumB2-1;Colletotrichumgloeosporioides;antibacterialactivity;identification

TS255.1

A

1002-0306(2012)11-0147-04

2011-11-21 * 通訊聯(lián)系人

李春玲(1987-),女,碩士研究生,主要從事果蔬貯藏與保鮮技術(shù)。

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