傅彩霞，靳興軍，鄭瑞峰，郭 峰，韓 磊，李 佳，吳惠明，王玉田，張 躍，杜 鵑

（北京市獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)診斷所，北京100101）

牛腹瀉性疾病是由細(xì)菌、病毒、寄生蟲等病原微生物感染或營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境、管理等因素造成的，在諸多因素中病原微生物感染是造成牛腹瀉的重要因素。引起牛腹瀉常見的病原有牛病毒性腹瀉病毒（Bovine viral idiarrhea virus，BVDV）、牛冠狀病毒（Bovine coronavirus，BCV）、牛輪狀病毒（Bovine rotavirus，BRV）等。BVDV主要侵害幼齡牛，表現(xiàn)為腹瀉或黏膜病，成年牛多呈亞臨床感染，但懷孕母牛感染后，可引起死胎、流產(chǎn)、產(chǎn)弱犢、先天性畸形犢等。無論顯性感染或者隱性感染均可引起免疫抑制，導(dǎo)致感染牛的抵抗力下降，進(jìn)而對(duì)其他疫病的易感性增強(qiáng)，BVDV感染在歐美及世界各養(yǎng)牛發(fā)達(dá)國(guó)家非常廣泛。BCV是引起新生犢牛腹瀉和成年牛冬痢最主要的病原之一，臨床上主要表現(xiàn)為新生犢牛出血性腹瀉，成年牛冬季嚴(yán)重水樣腹瀉（有時(shí)伴有血液和黏液）等特征，BCV感染呈世界性分布。BRV感染多發(fā)生在15日齡～45日齡的犢牛，其臨床表現(xiàn)為水樣腹瀉、嚴(yán)重脫水和酸中毒，具有很高的死亡率，成年牛大多呈隱性感染。BRV流行廣、發(fā)病率高且對(duì)動(dòng)物有較大危害，也己成為一種世界性疾?。?］。近年來，隨著奶牛養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大，奶牛特別是犢牛腹瀉的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，多種病原混合感染嚴(yán)重，死亡率較高，嚴(yán)重影響了奶牛早期的生長(zhǎng)發(fā)育和后期生產(chǎn)性能的發(fā)揮。為進(jìn)一步了解目前北京地區(qū)奶牛腹瀉中BVDV、BCV、BRV感染流行情況，為本地區(qū)奶牛腹瀉性疾病的有效防治提供技術(shù)指導(dǎo)，本項(xiàng)目對(duì)2010年－2011年北京部分地區(qū)規(guī)?；膛?chǎng)的BVDV、BCV、BRV感染情況進(jìn)行了血清學(xué)調(diào)查，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 奶牛血清樣品 2010年－2011年從密云、懷柔、昌平等3個(gè)區(qū)縣的31個(gè)規(guī)?；膛?chǎng)，采集1歲～3歲腹瀉奶牛的血液樣品，共計(jì)1 650份，按常規(guī)方法分離血清。所選牛群均未免疫接種各種類型的BVDV、BCV、BRV疫苗。

1.1.2 主要試劑 牛病毒性腹瀉抗體ELISA試劑盒為美國(guó)IDEXX公司產(chǎn)品；牛冠狀病毒抗體ELISA試劑盒（阻斷法）為BIOX公司產(chǎn)品；牛輪狀病毒抗體ELISA試劑盒（阻斷法）為BIOX公司產(chǎn)品。

1.2 方法

按照試劑盒說明書進(jìn)行檢測(cè)。

2 結(jié)果

2.1 牛病毒性腹瀉抗體檢測(cè)結(jié)果

結(jié)果顯示，從1 650份血清中共檢出BVDV抗體陽性血清795份，平均陽性率為48.2%，795份陽性血清分布在3個(gè)區(qū)縣的22個(gè)牛群。其中懷柔區(qū)抗體陽性率為32%，密云縣抗體陽性率為60.3%，昌平區(qū)抗體陽性率為51.7%，BVDV感染己在北京地區(qū)規(guī)?；膛?chǎng)中普遍存在（表1）。

表1 懷柔、密云、昌平3個(gè)區(qū)縣牛群BVDV抗體檢測(cè)結(jié)果Table1 The detection results of antibody against BVDV in herd from Huairou，Miyun and Changping

2.2 牛冠狀病毒抗體檢測(cè)結(jié)果

結(jié)果顯示，從1 650份血清中共檢出BCV抗體陽性血清943份，平均陽性率為57.2%，943份陽性血清分布在3個(gè)區(qū)縣的26個(gè)牛群。其中，懷柔區(qū)抗體陽性率為65.5%，密云縣抗體陽性率為57.1%，昌平區(qū)抗體陽性率為42.8%，3個(gè)區(qū)縣的規(guī)?；膛?chǎng)中BCV感染率較高（表2）。

表2 懷柔、密云、昌平3個(gè)區(qū)縣牛群BCV抗體檢測(cè)結(jié)果Table2 The detection results of antibody against BCV in herd from Huairou，Miyun and Changping

2.3 牛輪狀病毒抗體檢測(cè)結(jié)果

結(jié)果顯示，從1 650份血清中共檢出BRV抗體陽性血清861份，平均陽性率為52.2%，這861份陽性血清分布在3個(gè)區(qū)縣的20個(gè)牛群。其中，懷柔區(qū)抗體陽性率為54.0%，密云縣抗體陽性率為54.1%，昌平區(qū)抗體陽性率為45.1%（表3）。

表3 懷柔、密云、昌平3個(gè)區(qū)縣牛群BRV抗體檢測(cè)結(jié)果Table3 The detection results of antibody against BRV in herd from Huairou，Miyun and Changping

2.4 混合感染情況

本次調(diào)查中，同時(shí)有2種或3種病原混合感染率為35.1%（579／1650），其中，BVDV 和BCV 混合感染率為3.8%（62／1650），BVDV 和 BRV 混合感染率為3.2%（52／1650），BCV 和BRV 混合感染率為10.2%（169／1650），BVDV、BCV 和 BRV 3種病原混合感染率為17.9%（296／1650）。由此可見，在密云、懷柔和昌平3個(gè)區(qū)縣的牛群中，BVDV、BCV和BRV2種或3種病原混合感染嚴(yán)重。

3 討論

近年，奶牛特別是犢牛腹瀉普遍發(fā)生于世界各地，常引起大批犢牛生長(zhǎng)不良或死亡，已成為現(xiàn)代養(yǎng)牛業(yè)的一大障礙。在引起牛腹瀉的諸多因素中，BVDV、BCV、BRV感染是造成牛腹瀉的主要因素。國(guó)外資料表明，BVDV呈世界性分布，在養(yǎng)牛業(yè)發(fā)達(dá)的國(guó)家?guī)缀醵加蠦VDV的存在與流行，有的血清抗體檢出率高達(dá)90%以上。在我國(guó)，流行病學(xué)調(diào)查顯示，牛群中BVDV的感染率為30%～95%，根據(jù)病毒感染時(shí)期的不同，可以造成胚胎死亡、流產(chǎn)、木乃伊胎以及胎兒免疫耐受進(jìn)而發(fā)展為持續(xù)性感染畜，嚴(yán)重時(shí)可能發(fā)展成為致死性黏膜病。多數(shù)持續(xù)性感染動(dòng)物外觀健康，但生產(chǎn)性能下降，在疫病傳播中具有重要作用。同時(shí)，BVDV還是牛源生物制品（血清、凍精、疫苗等）的常在污染源［2－3］，給畜牧業(yè)生產(chǎn)和相關(guān)商業(yè)領(lǐng)域造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。BCV引起的腹瀉在冬季多發(fā)，約一周齡以內(nèi)的犢牛發(fā)病最為常見，病死率較高，而成年牛發(fā)病率較高、死亡率低。1972年美國(guó)Stair等［4］在犢牛和成年牛的腹瀉病料中檢出BCV，以后在世界許多國(guó)家和地區(qū)都相繼報(bào)道了該病的發(fā)生。1985年宋廣林等［5］首次報(bào)道了BCV在我國(guó)的存在，隨后各地均有報(bào)道［6］。BRV可感染各年齡段的牛，多發(fā)生于1月齡以內(nèi)的犢牛，犢牛感染后表現(xiàn)為水樣腹瀉、嚴(yán)重脫水，甚至死亡，而成年牛大多為隱性感染，其血清中抗體檢出率高達(dá)40%～100%，BRV在體外有很強(qiáng)的抵抗力，成年動(dòng)物隱性感染并不斷排出病毒，若畜群中一旦感染發(fā)病，則每年都會(huì)發(fā)生。RBV感染若繼發(fā)其他疫病，死亡率會(huì)大大增加，給養(yǎng)牛業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。近年來，由于我國(guó)各牛場(chǎng)對(duì)此類疾病重視程度不夠，缺乏有效的防控措施，導(dǎo)致我國(guó)牛群BVDV、BCV、BRV感染呈上升趨勢(shì)，因此，如何采取有效的措施預(yù)防和控制牛腹瀉，提高疫病的整體防控水平己成為目前養(yǎng)牛業(yè)生產(chǎn)的一項(xiàng)重要任務(wù)。

近年來，北京地區(qū)奶業(yè)生產(chǎn)發(fā)展速度較快，奶牛養(yǎng)殖業(yè)已成為京郊農(nóng)民致富的重要產(chǎn)業(yè)之一，然而由于當(dāng)前奶牛腹瀉性疾病的臨床發(fā)病率、死亡率逐年升高，治療費(fèi)用劇增，嚴(yán)重影響了奶牛養(yǎng)殖業(yè)的健康持續(xù)發(fā)展，因此，本研究選擇了奶牛養(yǎng)殖規(guī)模較大的懷柔、密云、昌平3個(gè)區(qū)縣作為代表進(jìn)行BVDV、BCV、BRV感染的血清學(xué)調(diào)查。調(diào)查結(jié)果顯示，BVDV抗體平均陽性率為48.2%，BCV抗體平均陽性率為57.2%，BRV抗體平均陽性率為52.2%。本次調(diào)查結(jié)果與國(guó)內(nèi)其他地區(qū)的報(bào)道結(jié)果基本一致。金愛華等［7］對(duì)上海奉賢區(qū)14家奶牛場(chǎng)奶牛血清進(jìn)行了BVDV抗體檢測(cè)，陽性率為34.06%。楊得勝等［8］對(duì)福建省9個(gè)地區(qū)大型牛場(chǎng)和散養(yǎng)戶牛進(jìn)行BVDV抗體血清學(xué)調(diào)查，總陽性率高達(dá)92.5%。魏偉等［9］對(duì)黑龍江省內(nèi)不同地區(qū)的2006年－2008年的1 388份血清樣本進(jìn)行了BVDV抗體檢測(cè)，3年的平均BVDV血清陽性率分別為54.66%、57.68%和62.90%。姚火春等［10］對(duì)我國(guó)不同地區(qū)的奶牛、黃牛及人血清進(jìn)行了BCV抗體檢測(cè)，陽性率分別為80.6%、67%、19.3%。劉合義等［11］對(duì)黑龍江一些地區(qū)采集到的256份牛血清樣品進(jìn)行BCV抗體檢測(cè)，結(jié)果陽性率為65.23%。李鑫等［12］對(duì)2005年－2006年期間在我國(guó)12個(gè)不同地區(qū)收集的1 760份牛血清進(jìn)行了BRV抗體檢測(cè)，其強(qiáng)陽性率12.8%、中等陽性率70.4%、弱陽性率15.9%，總抗體陽性率高達(dá)99%。不同地區(qū)的流行病學(xué)調(diào)查資料均顯示出，目前在我國(guó)牛群中BVDV、BCV、BRV感染已相當(dāng)嚴(yán)重。本次調(diào)查所采集的血清均為1歲～3歲的奶牛，檢測(cè)到的BVDV、BCV及BRV抗體水平均較高，可判斷為經(jīng)歷過BVDV、BCV及BRV的自然感染，血清抗體的陽性率一定程度上反映了BVDV、BCV及BRV的感染情況。本次調(diào)查的部分牛場(chǎng)兩種或三種病原混合感染率為35.1%，混合感染嚴(yán)重，BVDV、BCV及BRV感染在密云、懷柔和昌平3個(gè)區(qū)縣的牛群中普遍存在，感染率較高，存在有地區(qū)差異，應(yīng)引起高度重視，進(jìn)一步加強(qiáng)牛群中BVDV、BCV及BRV的流行病學(xué)調(diào)查、監(jiān)測(cè)及防控力度。

對(duì)于BVDV、BCV及BRV的防制，目前由于我國(guó)對(duì)此類疫病重視程度不夠等諸多因素的存在，使得在疫病防制上存在很大難度。國(guó)外防制BVDV主要采用疫苗接種、加強(qiáng)監(jiān)測(cè)、淘汰持續(xù)感染和免疫耐受的動(dòng)物。而我國(guó)BVDV具有特征性臨床癥狀的病例并不多見，多半是持續(xù)感染和免疫耐受等隱性感染，疫苗防控效果不理想。國(guó)內(nèi)目前也尚無預(yù)防BCV、BRV的有效疫苗。為了更好地預(yù)防和控制牛腹瀉性疾病，必須建立應(yīng)用行之有效的練合性防制措施，從免疫、檢測(cè)、環(huán)境及飼養(yǎng)管理等多方面綜合入手。定期進(jìn)行血清學(xué)、病原學(xué)檢測(cè)，尤其是對(duì)畜群持續(xù)性感染動(dòng)物的定期檢測(cè)，嚴(yán)格牛群及牛源生物制品的檢測(cè)；淘汰撲殺持續(xù)性感染的陽性牛；建立嚴(yán)格的衛(wèi)生消毒制度，加強(qiáng)環(huán)境控制；嚴(yán)格引種檢疫，做好隔離飼養(yǎng)管理工作。

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