楊 玲

（武漢泛華生物技術(shù)有限公司，湖北武漢 430023）

動物體腸道發(fā)育及腸道健康對動物體生長性能的重要性已經(jīng)逐步被人們所認(rèn)識?，F(xiàn)代營養(yǎng)生理學(xué)研究表明，腸黏膜的發(fā)育與成熟狀況是制約幼畜快速生長的關(guān)鍵因素。三丁酸甘油酯能快速為腸黏膜細(xì)胞提供能量，促進(jìn)腸黏膜的發(fā)育與成熟，修復(fù)各種應(yīng)激引起的腸粘膜損傷，進(jìn)而可以改善動物腸道健康、控制腹瀉及提高生產(chǎn)性能。本試驗(yàn)以斷奶仔豬為試驗(yàn)對象，目的為驗(yàn)證三丁酸甘油酯的功效，為合理使用三丁酸甘油酯提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

三丁酸甘油酯由武漢泛華生物技術(shù)有限公司提供，含三丁酸甘油酯≥45%。

1.2 試驗(yàn)動物及飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)選用21 d一次性斷奶、體重相近的杜洛克×長白×大約克三元雜種仔豬144頭，按照體重、性別一致性原則隨機(jī)分為3組，即對照組、試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組，每組4個重復(fù)（欄），每個重復(fù)12頭仔豬。斷奶前進(jìn)行3 d預(yù)試，斷奶后轉(zhuǎn)入保育舍。

試驗(yàn)在武漢市新農(nóng)源畜牧有限公司進(jìn)行，試驗(yàn)管理按豬場常規(guī)管理進(jìn)行，豬舍內(nèi)氣溫20～30℃，欄舍采用漏縫地板，豬只自由采食，自由飲水，每天清洗豬欄一次，豬舍每周噴霧消毒1次，日常觀察試驗(yàn)豬只生長、采食、糞便情況，準(zhǔn)確記錄投料量、舍溫、腹瀉情況。

1.3 試驗(yàn)日糧

對照組為基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組日糧在基礎(chǔ)日糧中分別添加0.08%、0.15%的三丁酸甘油酯。為保證日糧的平衡性，用玉米淀粉填充。對照組日糧配方和營養(yǎng)水平見表1。

表1 日糧組成和營養(yǎng)水平

1.4 測定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長性能

試驗(yàn)期間，觀察每天仔豬健康狀況，統(tǒng)計(jì)每天仔豬的采食量和糞便情況（以糞便不成形，且在肛門處可見明顯的干糞或稀糞黏附為腹瀉）。在試驗(yàn)的第14、28 d晚8點(diǎn)停止喂料，并于次日早上5點(diǎn)斷水，早上8點(diǎn)空腹稱重，計(jì)算平均日增重、平均日采食量、料重比和腹瀉率。

1.4.2 腸道結(jié)構(gòu)

生長試驗(yàn)結(jié)束時，每個處理組各選擇一頭體重接近的豬，剖開腹腔，取出小腸，分離出十二指腸、空腸和回腸，在十二指腸遠(yuǎn)端、空腸中端和回腸中端分別截取5 cm腸段。

腸段經(jīng)冰凍生理鹽水輕輕沖洗后用濾紙吸干水分，浸入到10%的中性福爾馬林溶液中固定，72 h后取出。將固定的樣本經(jīng)沖洗、脫水、透明、浸蠟、包埋等處理后切片，每段縱切各6張，厚度為5 μm，蘇木精-伊紅染色，中性樹膠封固。參照Frankel等的方法觀察測定，每張切片選取10根最長，且走向平直、伸展良好的絨毛，采用HPIAS-1000高清晰度彩色病理圖文分析系統(tǒng)作定量分析，測量其絨毛高度及與之相連的隱窩深度（VH）、絨毛寬度（CD），并計(jì)算絨毛高度與隱窩深度之比值(VH/CD，VCR)。各指標(biāo)取平均數(shù)作為測定數(shù)據(jù)。

1.4.3 血液生化指標(biāo)

生長試驗(yàn)結(jié)束末清晨,空腹稱重后每處理組隨機(jī)選取4頭(每欄1頭),前腔靜脈采血10 ml,靜置15 min,3 000 r/min離心10 min，分離血清，-20℃保存待測。樣品采用日立7020全自動生化分析儀測定下列指標(biāo)：尿素氮(BUN)、總蛋白(TP)、球蛋白(GLO)、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)和堿性磷酸酶(AKP)。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用SPSS13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和統(tǒng)計(jì),先對數(shù)據(jù)作單因素方差分析(ANOVA),若處理間差異顯著,再用Duncan's作多重比較,顯著水平為P＜0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 三丁酸甘油酯對斷奶仔豬生長性能的影響(見表2)

表2 三丁酸甘油酯對斷奶仔豬生長性能的影響

由表2可知，斷奶后1～14 d內(nèi)，添加0.08%三丁酸甘油酯可以提高平均日增重2.81%，對平均日采食量影響不明顯，對料重比影響不明顯，減少腹瀉發(fā)生率16.13%，但是各組數(shù)據(jù)差異不顯著（P＞0.05）；添加0.

15%三丁酸甘油酯可提高平均日增重7.07%，對平均日采食量影響不明顯，降低料重比4.48%，減少腹瀉發(fā)生率 30.28%（P＜0.05）。

由表2可知，在斷奶后第15～28 d，添加0.08%三丁酸甘油酯與對照組相比提高平均日增重7.28%，采食量增加3.26%，料重比降低3.75%，顯著減少腹瀉率46.33%（P＜0.05）；添加0.15%三丁酸甘油酯與對照組相比顯著提高平均日增重11.87%（P＜0.05），平均采食量增加3.48%，料重比顯著降低7.50%（P＜0.05），極顯著降低腹瀉率 74.18%（P＜0.01）。

由表2可知，從整個試驗(yàn)期間的統(tǒng)計(jì)來看，添加0.08%三丁酸甘油酯可以改善日增重5.79%，降低料重比3.31%，顯著減少腹瀉發(fā)生率32.48%（P＜0.05）；添加0.15%三丁酸甘油酯可以顯著提高平均日增重10.24%（P＜0.05），顯著降低料重比 6.62%（P＜0.05），顯著減少仔豬腹瀉發(fā)生率49.36%（P＜0.05）。

2.2 三丁酸甘油酯對斷奶仔豬腸道結(jié)構(gòu)的影響(見表3)

表3 28 d試驗(yàn)結(jié)束時三丁酸甘油酯對斷奶仔豬腸道結(jié)構(gòu)的影響

由表3可知，十二指腸段，與對照組相比，添加0.08%三丁酸甘油酯各組數(shù)據(jù)差異不顯著；與對照組相比，添加0.15%三丁酸甘油酯可顯著提高絨毛高度(VH)16.20%(P＜0.05)，絨毛高度/隱窩深度比值(VCR)顯著提高 23.36%（P＜0.05）。

空腸段，與對照組相比，添加0.08%、0.15%三丁酸甘油酯絨毛高度分別提高9.84%(P＜0.05)和18.89%(P＜0.05)，隱窩深度分別降低 7.96%(P＜0.05)和 8.49%(P＜0.05)，絨毛高度/隱窩深度比值分別提高19.85%(P＜0.05)和 30.15%(P＜0.05)。與添加 0.08%三丁酸甘油酯相比，添加0.15%三丁酸甘油酯絨毛高度顯著增加8.24%(P＜0.05)。

回腸段，與對照組相比，添加0.08%、0.15%三丁酸甘油酯絨毛高度分別顯著增加11.68%（P＜0.05）和20.63%（P＜0.05），隱窩深度分別顯著降低10.16%（P＜0.05）和 9.96%（P＜0.05），絨毛高度/隱窩深度比值分別顯著提高 23.88%（P＜0.05）和 33.58%（P＜0.05）。與添加0.08%三丁酸甘油酯相比，添加0.15%三丁酸甘油酯絨毛高度顯著增加 8.02%（P＜0.05）。

2.3 三丁酸甘油酯對斷奶仔豬血液生化指標(biāo)的影響（見表4）

表4 三丁酸甘油酯對斷奶仔豬血液生化指標(biāo)的影響

由表4可知，與對照組相比，添加0.08%、0.15%三丁酸甘油酯，堿性磷酸酶分別降低了10.44%和14.55%，但均未達(dá)到顯著水平；與對照組相比，兩試驗(yàn)組尿素氮、總蛋白、球蛋白均有所提高，丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶有所降低，但均未達(dá)到顯著性水平。

3 討論

3.1 三丁酸甘油酯對斷奶仔豬生長性能的影響

大量研究表明，仔豬斷奶后會出現(xiàn)一系列應(yīng)激反應(yīng)，如絨毛萎縮、隱窩深度增加、生長遲緩、腹瀉率劇增等（Hornich 等，1973；Gay 等，1976;Kenworthy，1976；Hampson,1986；Miller等，1986;Cera 等,1988；Kelly 等,1990）。本試驗(yàn)研究表明，添加0.08%和0.15%三丁酸甘油酯，具有提高斷奶仔豬平均日增重、平均日采食量、降低料重比的效果，尤其添加0.15%三丁酸甘油酯降低腹瀉率效果更為明顯，這與王建民等（2009）報(bào)道的結(jié)果類似。其原因可能是三丁酸甘油酯具有提高營養(yǎng)物質(zhì)消化率的作用（Hou等，2006；劉統(tǒng)等，2011）。

3.2 三丁酸甘油酯對斷奶仔豬腸道結(jié)構(gòu)的影響

韓正康(1993)指出，小腸是消化道內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)的主要部位，吸收是小腸絨毛的主要功能，腸腺則具有分泌能力，所以動物小腸黏膜結(jié)構(gòu)的良好狀態(tài)是養(yǎng)分消化吸收和動物正常生長的生理學(xué)基礎(chǔ)。絨毛高度與隱窩深度反映了腸道的功能狀況。絨毛高度與絨毛上皮成熟細(xì)胞數(shù)量呈顯著相關(guān)，只有成熟的絨毛上皮細(xì)胞才具有養(yǎng)分吸收功能。Hampson（1986）認(rèn)為，隱窩深度增加表明絨毛上皮成熟細(xì)胞減少。絨毛高度/隱窩深度的比值常常可以說明小腸上皮細(xì)胞更新代謝程度，可綜合反映小腸的功能狀態(tài)。比值下降，表示消化吸收功能下降，常伴隨腹瀉的發(fā)生。比值上升，消化吸收功能增強(qiáng)，腹瀉率下降。

本試驗(yàn)通過觀察斷奶仔豬腸道結(jié)構(gòu)，結(jié)果表明添加0.08%和0.15%三丁酸甘油酯，空腸和回腸段，絨毛高度、隱窩深度、絨毛高度與隱窩深度比值均變化顯著。這進(jìn)一步說明添加三丁酸甘油酯可以在一定程度上促進(jìn)小腸黏膜的發(fā)育，增強(qiáng)小腸的消化吸收功能，降低斷奶仔豬腹瀉率。這與三丁酸甘油酯的作用機(jī)理有關(guān)，三丁酸甘油酯是由丁酸和甘油酯化而成，在胰脂肪酶的作用下，三丁酸甘油酯分解為兩分子丁酸和一分子丁酸甘油一酯，丁酸能快速為腸黏膜細(xì)胞提供能量，修復(fù)各種應(yīng)激引起的腸黏膜損傷；而丁酸甘油一酯能夠直達(dá)后腸，在后腸微生物的作用下發(fā)揮功效，三丁酸甘油酯從而可以貫穿整個腸道，全面防護(hù)腸道健康（Piva，2002）。

3.3 三丁酸甘油酯對斷奶仔豬血液生化指標(biāo)的影響

尿素是仔豬含氮物質(zhì)代謝的主要終產(chǎn)物。許多以健康仔豬進(jìn)行營養(yǎng)代謝的研究均把血清尿素氮作為反映動物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和日糧氨基酸平衡狀況的較為準(zhǔn)確的指標(biāo)（Borg等,1987）。從本試驗(yàn)的結(jié)果看，對照組尿素氮略有降低，這可能是由于斷奶應(yīng)激，平均采食量下降，攝入總氮降低引起的。

仔豬的血清蛋白（TP）是機(jī)體蛋白質(zhì)的一個來源，用于修補(bǔ)組織和提供能量。球蛋白（GLO）來源于漿細(xì)胞的分泌，能反映仔豬的抵抗力。本試驗(yàn)兩試驗(yàn)組總蛋白與球蛋白均有所提高，說明添加三丁酸甘油酯能提高斷奶仔豬免疫力。

仔豬斷奶引起的實(shí)質(zhì)性器官組織細(xì)胞膜損傷、膜內(nèi)功能膜的釋放會導(dǎo)致相應(yīng)酶活性升高。從本試驗(yàn)的結(jié)果來看，兩試驗(yàn)組丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶的活性均有所降低，這說明添加三丁酸甘油酯有利于保護(hù)腸道健康，減輕斷奶應(yīng)激引起的腸黏膜損傷。

4 結(jié)論

添加三丁酸甘油酯可以提高斷奶仔豬生長性能、改善腸道結(jié)構(gòu)和降低腹瀉發(fā)生率。其中，添加0.15%三丁酸甘油酯效果更為顯著。

[1]韓正康.家畜營養(yǎng)生理學(xué)[M].北京：農(nóng)業(yè)出版社.1993.

[2]Cera K R.,D.C.Mahan,R.F.Cross,et al.Effect of age,weaning and postweaning diet on small intestinal growth and jejunal morphology in young swine[J].J Anim.Sci.,1988,66:574-584.

[3]Gay C C,I.K.Barker,P.Moore.Changes in piglet intestinal villous structure and intestinal enzyme activity associated with weaning[J].In:Proceedings of the IVth IPVS Congress (Ed.W.E.Brandt,R.D.Glock,D.L.Harris,N.E.Hutton and A.D.Lennon).College of Veterinary Medicine.Iowa State University.Ames.IA.USA.1976.

[4]Gunnar Borg,Peter Hassmén,Monica Lagerstr.Perceived exertion related to heart rate and blood lactate during arm and leg exercise[J].European journal of applied physiology and occupational physiology,1987,6:679-685.

[5]Hampson D J.Attempts to modify changes in the piglet small intestine after weaning[J].Res.Vet.Sci.,1986,40:313-317.

[6]Hornich M,E.Salajka,L.Ulmann,et al.Enteric Escherichia coli infections.Morphologicalfindingsin the intestinalmucosa of healthy and diseased piglets[J].Vet.Pathol.,1973,10:484-500.

[7]Kelly D,J.A.Smyth,K.J.McCracken.Effect of creep feeding on structural and functional changes of the gut of early weaned pigs[J].Res.Vet.Sci.,1990,48:350-356.

[8]Kenworthy R.Observations on the effects of weaning in the young pig.Clinical and histopathological studies of intestinal function and morphology[J].Res.Vet.Sci.,1976,21:69-75.

[9]Miller B G,P.S.James,M.W.Smith et al.Effect of weaning on the capacity of pig intestinal villi to digest and absorb nutrient[J].Agric.Sci.,Cambridge,1986,107:579-589.

[10]Piva A,Prandini A,Fiorentini L,Morlacchini M,Galvano F,Luchansky J B.Tributyrin and lactitol synergistically enhanced the trophic status of the intestinal mucosa and reduced histamine levels in the gut of nursery pigs[J].J.Anim.Sci.,2002,80:670-680.

[11]王建民,付紅營,耿勛.短鏈脂肪酸在仔豬日糧中的應(yīng)用研究[J].飼料廣角,2009(6):24-25,29.

[12]Y.Q.Hou,Y.L.Liu,J.Hu,et al.Effects of Lactitol and Tributyrin on Growth Performance,Small Intestinal Morphology and Enzyme Activity in Weaned Pigs[J].Asian-Aust.J.Anim.Sci.,2006,19(10):1470-1477.

[13]劉統(tǒng)，黃興國，朱廣寧.丁酸甘油酯對斷奶仔豬生長性能影響的研究[J].飼料工業(yè),2011,32(22):39-41.