鄧慶梅 高 勇 何皖偉 許 慶 劉 毅

原發(fā)性肝癌（PHC）是我國常見惡性腫瘤之一，生存期短，病死率高。研究表明[1]，乙型肝炎病毒（HBV）感染是原發(fā)性肝癌的主要病因。肝癌的發(fā)生、發(fā)展與HBV感染高度相關(guān)，HBV DNA整合的發(fā)現(xiàn)更進一步從分子水平上強化了PHC與HBV感染的關(guān)系[2]。 前瞻性研究認為，HBeAg陽性是肝癌發(fā)生的危險因素[3]。在肝癌患者，往往血清抗HBe陽性[4]。為了進一步了解PHC與HBV感染的關(guān)系，我們對151例PHC患者血清HBV標記物和HBV DNA載量進行了檢測分析，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

資料與方法

一、一般資料 收集阜陽市第二人民醫(yī)院2010年 1月至 2011年 1月首次住院治療的 PHC患者 151例，男131例，女20例，年齡 37～70歲，平均年齡53.7±8.8歲。診斷均符合2001年中國抗癌協(xié)會肝癌專業(yè)委員會修訂的PHC診斷標準[5]。選擇同期住院的慢性乙型肝炎患者132例（男106例，女26例，年齡20～84歲，平均年齡41.2±12.1歲）和乙型肝炎肝硬化患者140例（男102例，女38例，年齡28～73歲，平均年齡50.8±9.3歲）為對照組。后者診斷符合 2000年西安會議修訂的《病毒性肝炎防治方案》的標準[6]。所有病例均未曾進行任何抗病毒治療。

二、檢測方法 采用化學發(fā)光法檢測HBV血清標志物（雅培公司）；采用實時熒光定量PCR法檢測血清HBV DNA載量（杭州艾康生物技術(shù)有限公司）。

三、統(tǒng)計方法 血清HBV DNA以lg拷貝/毫升為單位，用表示。多樣本均數(shù)的比較采用方差分析，各樣本間的兩兩比較采用SNK法，計數(shù)資料多個獨立樣本率的比較用x2檢驗，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義（多個樣本率間的多重比較，其修正檢驗水準為P＜0.0125）。

結(jié)果

一、151例PHC患者HBV血清學模式與HBV DNA水平的關(guān)系 見表1。

表1 不同HBV血清學模式患者HBV DNA水平（）比較

表1 不同HBV血清學模式患者HBV DNA水平（）比較

與 3組比，①P＜0.05

HBV血清學模式 例數(shù)1 HBsAg/HBeAg/抗-HBc陽性 38 2 HBsAg/抗-HBe和抗-HBc陽性 90 3 HBsAg/抗-HBc陽性 6 4 HBsAg/HBeAg/抗-HBe/抗-HBc陽性 1 5 抗-HBs/抗-HBc陽性 3 6 抗-HBs/抗-HBe/抗-HBc陽性 5 7 抗-HBe/抗-HBc陽性 2 8 抗-HBc陽性 2 9 全部陰性 4合計 151陽性（%） HBV DNA（lg拷貝/毫升）38（100.0）① 6.4±0.9①69（76.7） 5.1±0.9 4（66.7） 5.9±0.5 1（100.0） 5.3 1（33.3） 3.9 0（0.0） -0（0.0） -0（0.0） -0（0.0） -

二、不同肝病患者血清HBV標志物分布及其HBV DNA水平比較 見表2。

表2 不同肝病患者血清HBV標志物分布（%）及其HBV DNA水平（）比較

表2 不同肝病患者血清HBV標志物分布（%）及其HBV DNA水平（）比較

/HBcAb陽性 其 他 HBV DNA（lg copies/ml）肝癌 151 38（25.2） 90（59.6） 6（4.0） 16（10.6） 5.6±1.1肝硬化 140 58（41.4） 77（55.0） 4（2.9） 1（0.7） 6.2±1.2乙型肝炎 132 86（65.2） 43（32.6） 3（2.3） 0（0.0） 6.7±1.4例數(shù) HBsAg/HBeAg/HBcAb陽性HBsAg/HBeAb/HBcAb陽性HBsAg

討論

HBV攜帶者可發(fā)展為肝硬化，其中1%～5%可演變?yōu)楦渭毎7]。在本組151例肝癌患者中，有147例（97.5%）乙型肝炎病毒標記物陽性。HBV感染已成為肝癌發(fā)生的主要致癌因素，與陳帆等[8，9]報道結(jié)果相近。隨著HBeAg陽性率的降低以及抗-HBe陽性率的逐漸升高，即從HBeAg至抗-HBe的自發(fā)血清轉(zhuǎn)換，肝臟的病變沒有靜止，反而逐漸加重，而且癌變的發(fā)生率也逐漸增加。有學者認為，HBeAg是一個免疫耐受因子[4]，它的缺失將導(dǎo)致免疫耐受被破壞，從而誘導(dǎo)炎癥活動;HBeAg又是細胞毒性T細胞的靶抗原，在肝細胞膜上HBeAg的缺失，會使變異株逃避宿主免疫的清除，使感染得以繼續(xù)存在。在組織再生時，這部分肝細胞膜上HBeAg缺失的肝細胞可大量增生，使肝臟的纖維化程度逐漸加重，并且發(fā)生癌變的危險性增加。

慢性乙型肝炎發(fā)生HBeAg自發(fā)血清學轉(zhuǎn)換的確切機制目前仍不清楚，乙型肝炎病毒前C區(qū)變異可發(fā)生在HBeAg自發(fā)血清學轉(zhuǎn)換之前、之中或之后，但前C區(qū)的變異不是 HBeAg自發(fā)血清學轉(zhuǎn)換的必須條件[10]。這與使用干擾素等抗病毒藥物治療后出現(xiàn)的HBeAg血清學轉(zhuǎn)換有著本質(zhì)的不同，前者可能與長期受到機體的免疫壓力，HBV相繼發(fā)生HBV前C區(qū)或基本核心區(qū)啟動子雙變異有關(guān)，而后者是基于藥物的抗病毒效應(yīng)，使病毒載量下降，抗原陰轉(zhuǎn)。

本研究顯示絕大多數(shù)肝癌的發(fā)生不僅與HBV感染高度相關(guān)，尤其與乙型肝炎病毒復(fù)制密切相關(guān)，與梁麗[7]等報道原發(fā)性肝癌患者HBV DNA檢出率為76.4%相近。PHC患者血清HBV DNA水平不是很高的原因有：（1）在慢性肝炎發(fā)展到肝硬化和肝細胞癌過程中，HBV復(fù)制有一個從高到低的過程，免疫清除過程使病毒載量減少，同時可使肝細胞受損；（2）血清HBV DNA反映的是血清游離的HBV DNA，不能反映肝細胞中HBV的整合狀態(tài)。另外，肝細胞癌大部分在肝硬化的基礎(chǔ)上發(fā)生，肝纖維化的發(fā)生使病毒載量也不高[12]。國內(nèi)有學者用分子雜交方法檢測HBV DNA，發(fā)現(xiàn)持續(xù)抗-HBe陽性者更易發(fā)生HBV DNA基因整合現(xiàn)象。有資料證實，原發(fā)性肝癌患者HBV DNA整合率可達 90.5%，而整合的HBV DNA更易誘發(fā)原發(fā)性肝癌[13]。HBV導(dǎo)致肝細胞癌的發(fā)生機制可能有：（1）HBV的活動性復(fù)制能直接使致癌機制啟動和惡性轉(zhuǎn)化，增加病毒DNA插入原癌基因中或其附近、插入腫瘤抑制基因中或其附近或插入細胞DNA調(diào)節(jié)成分中或其附近；（2）病毒DNA整合可增加反式激活因子蛋白的產(chǎn)生，該蛋白能誘導(dǎo)肝細胞的惡性轉(zhuǎn)化，它還能與p53腫瘤抑制基因結(jié)合并干擾其功能；（3）HBV還可通過引起慢性壞死性肝病間接誘發(fā)肝細胞癌變，使慢性壞死性炎癥過程中產(chǎn)生的致突變活性氧族誘導(dǎo)細胞惡性轉(zhuǎn)化[14～16]。

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