王淑芳 任吉芳

上海市松江區(qū)中心醫(yī)院口腔科，上海 201620

幽門螺桿菌（Helicobacter pylori，Hp）是一種重要的胃腸道致病菌，近年來，陸續(xù)有學(xué)者報道從口腔中發(fā)現(xiàn)幽門螺桿菌，經(jīng)分離培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)與胃Hp類似[1-5]。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，幽門螺桿菌可能與多種口腔疾病的發(fā)生有關(guān)聯(lián)[2]，Hp可能是一種條件致病菌，廣泛地存在人類口腔環(huán)境中。許多學(xué)者認(rèn)為牙周袋內(nèi)環(huán)境利于幽門螺桿菌生存[5]，可能成為其儲存池，并再次對胃部進(jìn)行感染[3-4]。在對感染胃Hp的患者進(jìn)行藥物感染控制后，經(jīng)過一段時間又會復(fù)發(fā)感染，提示口腔內(nèi)的Hp與胃Hp感染存在一定的關(guān)系[6]，本文欲通過對特定人群的研究，探討牙周炎與口腔Hp、胃Hp的相互關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2012年1月～5月上海市松江區(qū)中心醫(yī)院14C-尿素呼氣實驗陽性并有上腹部不適癥狀的患者102例，其中男50例，女 52例；年齡 30～46 歲，平均（38±8）歲；排除妊娠及哺乳期婦女。所有患者均行胃鏡下活檢術(shù)及病理檢查，以明確胃Hp感染情況。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

①全口牙不少于20 顆；②一年內(nèi)未接受牙周治療及其他口腔護(hù)理者；③無全身性疾病和其他系統(tǒng)性疾??；④3個

月內(nèi)未服用質(zhì)子泵抑制劑、膠體鉍復(fù)合制劑、H2受體阻斷劑、抗生素；⑤女性需排除妊娠及哺乳期。

1.3 牙周炎診斷標(biāo)準(zhǔn)

牙周炎診斷標(biāo)準(zhǔn)依照《牙周病學(xué)》第三版診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷[7]。

1.4 口腔檢查與分組

1.4.1 口腔檢查 由同一位口腔臨床醫(yī)師檢查全部患者口腔健康情況。記錄患者探診深度（probing depth，PD）、出血指數(shù)（bleeding index，BI）、菌斑指數(shù)（plaque index，PLI）和松動度，如有必要行X線檢查，進(jìn)行診斷與鑒別診斷。

1.4.2 分組 ①牙周炎組（n=60）：至少4 顆牙牙周平均探診深度≥3 mm，牙周有探診出血，附著喪失≥ 1 mm，牙齦質(zhì)軟、暗紅、水腫；②牙周健康組（n=42）：要求牙周探診深度＜2.5mm，每個牙的牙周無探診出血，無附著喪失，附著齦堅韌，成粉紅色。

1.5 牙菌斑與含漱液取樣及檢測方法

口腔所有標(biāo)本均在行胃內(nèi)鏡檢查前提取，以防撤鏡時導(dǎo)致口腔內(nèi)污染。要求所有患者至少12 h以上未作任何口腔清潔及護(hù)理工作。每例取4個象限的第一磨牙頰側(cè)近中位點（第一磨牙缺失記錄第二磨牙）的齦溝內(nèi)菌斑及含漱液。所有患者的臨床檢查與標(biāo)本的取樣均由同一位口腔臨床醫(yī)師操作。

1.5.1 牙菌斑的采集 消毒棉卷隔濕、消毒三用槍吹干后，用消毒牙簽取齦上牙菌斑混合放置于1.5mL的無菌EP管（內(nèi)事先放有30 μL生理鹽水）中，做標(biāo)記與記錄，-80℃保存。

1.5.2 含漱液的收集 讓患者含漱生理鹽水20 s，用5mL EP管收集4 mL含漱液，做標(biāo)記與記錄，-80℃保存，當(dāng)日送實驗室提取DNA。

1.5.3 實驗室檢測 以尿素酶C基因與CagA基因為引物做PCR實驗[7]，行凝膠電泳。對每個樣品各行3次PCR檢測口腔Hp，以其中至少兩次結(jié)果陽性者為Hp陽性者。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 13.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，計數(shù)資料以率表示，采用 χ2檢驗，采用直線相關(guān)分析并計算OR值，以P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 口腔Hp檢測結(jié)果

根據(jù)牙菌斑、含漱液樣本中口腔Hp陽性的判定標(biāo)準(zhǔn)，102例研究對象中，牙菌斑Hp陽性者58例，總陽性率為56.86%（58/102）；含漱液Hp陽性者 53例，總陽性率為51.96%（53/102）。所有患者口腔牙菌斑或含漱液中至少一項Hp陽性則定為口腔Hp陽性，故本研究中口腔Hp陽性者為64例，口腔Hp總陽性率為62.75%（64/102）。PCR法檢測牙菌斑、含漱液中尿素酶C和CagA基因表達(dá)結(jié)果見圖1。

2.2 胃Hp病理活檢檢查結(jié)果

胃Hp陽性者為72例， 陽性率為70.59%（72/102），PCR法檢測胃黏膜中尿素酶C和CagA基因表達(dá)結(jié)果見圖1。

2.3 口腔Hp陽性與胃Hp陽性的關(guān)系

口腔和胃中Hp均陽性者52例，占口腔Hp陽性的81.25%（52/64），胃 Hp 陽性的 72.22%（52/72）。口腔 Hp 陽性與胃 Hp陽性為正關(guān)聯(lián)（χ2=9.406，OR=3.90，P=0.002）。見表1。

表1 口腔Hp檢出與胃Hp檢出比較（例）

2.4 口腔Hp在兩組間分布

牙周炎組中，牙菌斑、含漱液檢測口腔Hp陽性者49例，占牙周炎組患者的81.67%（42/60）；牙周健康組中，牙菌斑、含漱液檢測口腔Hp陽性15例，占牙周健康組患者的35.71%（15/42）。兩組口腔Hp陽性率比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），說明牙周炎組口腔Hp陽性率高于牙周健康組口腔Hp陽性率，且口腔Hp檢出與牙周炎為正關(guān)聯(lián) （χ2=5.571，OR=4.53，P=0.003），見表2。

表2 兩組口腔Hp陽性率比較

3 討論

1989年Krajden等首次從胃炎患者的牙菌斑中分離培養(yǎng)出Hp，并推測口腔可能是Hp在人體的另一個聚集地[8]。從此，口腔內(nèi)Hp的研究也逐漸成為熱點問題。國內(nèi)胡文杰等[9]通過多聚酶鏈反應(yīng)檢測13例胃病患者口腔含漱液和6個牙位的齦上及齦下菌斑，結(jié)果發(fā)現(xiàn)6例患者（46.2%）的含漱液和11例患者（84.6%）的至少一份菌斑樣品中檢測出Hp，齦下菌斑中Hp的檢出率（38.5%）顯著高于齦上菌斑（19.2%），據(jù)此推測齦溝或牙周袋可能是口腔Hp聚集的適宜環(huán)境。

Souto等[10]對69例慢性牙周炎患者和56例牙周組織健康的對照者進(jìn)行了研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有24%的受試者被檢測到有Hp感染，并且患病組在唾液和齦下檢測到的Hp感染情況顯著高于正常對照組，證實了牙周炎患者口腔中存在Hp，并推測這類Hp可能更易于定植于牙周袋中[11]。胡文杰等[9]發(fā)現(xiàn)隨著牙周炎癥狀程度加重，牙菌斑Hp檢出陽性率升高，提示從受檢者的多個存在炎癥、中等深度的牙周袋中取樣可能提高Hp的檢出率。陳駿等[12]通過唾液樣本分別檢測牙齦出血組、牙結(jié)石組及牙周袋組Hp的檢出率，發(fā)現(xiàn)其差異有統(tǒng)計學(xué)意義，表明Hp在口腔中生存與牙周病變程度有關(guān)。

本研究表明口腔內(nèi)Hp的存在與胃Hp感染呈正相關(guān)關(guān)系（P=0.002）?？谇粌?nèi)Hp與牙周病變有明顯正相關(guān)關(guān)系（P=0.003）。支持口腔可能為Hp一個重要寄居地（尤其牙周炎者）的觀點。鑒于口腔中Hp感染與胃Hp關(guān)系密切，或二者互相感染，提示在臨床治療時，需口腔與胃Hp同時治療，避免Hp復(fù)染；同時，也提示口腔內(nèi)的幽門螺桿菌與牙周病有密切關(guān)系，在牙周炎臨床治療時，除考慮口腔局部因素外，需要考慮患者的全身情況，除目前已知的糖尿病等疾病外，還尤其要注意胃Hp感染情況，多學(xué)科聯(lián)合治療將更利于患者疾病的控制。

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