李寅珊，李冬梅，劉 熙，劉光明

大理學(xué)院藥學(xué)院有機(jī)藥化教研室，大理 671000

漾濞泡核桃又名漾濞核桃、茶核桃、鐵核桃，是胡桃科(Juglandaceae)胡桃屬(Juglans)植物，主要分布于云南、貴州、四川西部及西藏雅魯藏布江下游［1］。青龍衣是漾濞泡核桃(Juglans sigillata D.)同屬植物胡桃(Juglans regia D.)和胡桃楸(Juglans mandshurica M.)未成熟果實(shí)的外皮。據(jù)《中華本草》記載，青龍衣味苦、澀，性平。歸肝、脾、胃經(jīng)。具有止痛、止咳、止瀉、解毒、殺蟲等功效。中醫(yī)主要用其治療脘腹脹痛、痛經(jīng)、久咳、泄瀉久痢、癰腫瘡毒、頑癬、禿瘡、白癜風(fēng)等癥［2］?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究顯示，青龍衣具有消炎鎮(zhèn)痛、抗菌、抗氧化、抗腫瘤、抗植物病毒、殺蟲等生物活性［3-8］?；瘜W(xué)成分研究表明，青龍衣主要含有醌及其苷類、黃酮類、脂肪醇類、鞣質(zhì)類、生物堿類及強(qiáng)心苷類物質(zhì)［9］。云南漾濞是漾濞泡核桃的主要產(chǎn)區(qū)之一，種植面積高達(dá)100萬(wàn)畝，年產(chǎn)3萬(wàn)余噸。每年采收后有數(shù)萬(wàn)噸青皮廢棄于山野田間造成環(huán)境污染，如果可對(duì)其加以利用，不但能防止環(huán)境污染、避免資源浪費(fèi)，還可變廢為寶增加當(dāng)?shù)厥杖搿１緦?shí)驗(yàn)采用GCMS技術(shù)對(duì)漾濞泡核桃青皮脂溶性成分進(jìn)行了研究與分析，以期為漾濞泡核桃青皮的后續(xù)研究和應(yīng)用提供參考。

1 儀器與材料

漾濞泡核桃青皮于2011年10月采集于云南省漾濞縣，由大理學(xué)院生藥教研室周濃副教授鑒定，標(biāo)本(DLXY-LGMZ-2011-10-26)保存在大理學(xué)院藥學(xué)院。分析儀器為美國(guó) Agilent Technologies公司HP6890GC/5973MS氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀。BUCHI Rotavapor R-210型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。甲醇、正己烷等化學(xué)試劑均為天津化學(xué)試劑公司分析純產(chǎn)品。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 樣品制備

稱取干燥的漾濞泡核桃青皮0.6 kg，粉碎后用2000 mL甲醇連續(xù)回流提取1h，回收溶劑得提取物28.0 g。提取物經(jīng)水分散后用正己烷萃取，正己烷萃取物經(jīng)微孔濾膜過(guò)濾，回收溶劑至干得4.0 g樣品，密封備做GC-MS。

2.2 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀分析條件

2.2.1 氣相色譜條件

HP-5MS石英毛細(xì)管柱(30 m ×0.25 mm，0.25 μm);柱溫80℃，程序升溫5℃/min，至260℃;柱流量1.0 mL/min;進(jìn)樣口溫度250℃;柱前壓100 kPa;進(jìn)樣量 0.6 μL;分流比 10∶1;載氣為高純氦氣。

2.2.2 質(zhì)譜條件

電離方式EI，電子能量70 eV，傳輸線溫度250℃，離子源溫度230℃，四級(jí)桿溫度150℃;質(zhì)量范圍35～500;采用wiley7n.L標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)檢索定性，同時(shí)利用面積歸一法從總離子流圖中計(jì)算各成分的相對(duì)百分含量。

3 結(jié)果與分析

通過(guò)GC-MS分析，并利用 wiley7n.L標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)檢索定性，同時(shí)采用面積歸一法從總離子流圖中計(jì)算各成分的相對(duì)百分含量，得到漾濞泡核桃青皮脂溶性成分的總離子流圖，70 min內(nèi)共分離出72個(gè)峰，鑒定出了其中55個(gè)組分的化學(xué)結(jié)構(gòu)。由分析結(jié)果可知 β-谷甾醇 (18.68%)、4-乙基金剛烷酮(12.07%)、二十九烷 (9.04%)、二十七烷(7.43%)、棕櫚酸(7.45%)、十八碳二烯酸(4.60%)、α-生育酚(3.53%)等是漾濞泡核桃青皮脂溶性成分中的主要組分。漾濞泡核桃青皮脂溶性成分的化學(xué)組成及含量如表1所示。

表1 漾濞泡核桃青皮脂溶性成分的組成及百分含量Table 1 The Fat-soluble components detected in the green rind of J.Sigillata

24 27.92 十七烷酸 n-Heptadecanoic acid C17H34O2 0.42% 96%25 28.47 十八碳二烯酸甲酯(亞油酸甲酯)(Z，Z)-9，12-Octadecadienoic acid methyl ester C19H34O2 0.67% 99%26 28.94 植醇 Phytol C20H40O 1.05% 90%27 29.27 十八碳二烯酸(亞油酸)Linoleic acid C18H32O2 4.60% 98%28 29.75 十八烷酸(硬脂酸)Octadecanoic acid C18H36O2 1.46% 99%29 30.21 二十二烷 n-Docosane C22H46 0.90% 93%30 32.04 二十三烷 n-Tricosane C23H48 0.67% 93%31 32.36 2，6，10-三甲基-2，9-十一烷二烯-4-酮 2，6，10-Trimethylundecan-2，9-dien-4-oneC14H24O 0.89% 30%32 32.75 三十一碳烯醇 18-Nonadecen-1-ol C31H62O 0.26% 87%33 33.03 4，8，12，16-四甲基十七-4-內(nèi)酯 4，8，12，16-Tetramethylheptadecan-4-olide C21H40O2 0.59% 70%34 33.68 二十四烷 Tetracosane C24H50 0.74% 99%35 34.20 二十二烷醛 Octadecanal C22H44O 0.60% 74%36 35.28 二十五烷 n-Pentacosane C25H52 1.85% 99%37 35.80 二十三烷醛 Octadecanal C23H46O 0.50% 86%38 36.11 二十六碳烯 1-Hexacosene C26H52 0.44% 86%39 36.84 二十六烷 Hexacosane C26H54 1.51% 94%40 37.47 二十四烷醛 1，21-Docosadiene C24H48O 0.49% 98%41 38.70 二十七烷 Heptacosane C27H56 7.43% 99%42 39.46 蘿芙堿 Ajmaline C20H26N2O2 0.52% 87%43 39.89 環(huán)二十八烷 Cyclooctacosane C28H56 0.61% 83%44 40.88 二十八烷 Octacosane C28H58 2.18% 93%45 41.22 角鯊烯 Squalene C30H50 1.13% 93%46 41.89 二十六烷醛 Octadecanal C26H52O 0.77% 91%47 42.93 2-(＇2-苯并呋喃)-3-苯基-1H-吲哚 2-(＇2-benzofuryl)-3-phenyl-1H-Indole C22H17NO 0.57% 47%48 43.23(E，3aR，5S，6aR，11bS)-5-［1-(羥甲基)丙烯基］-7-(甲酰氧基-2，3，3a，4，5，6，6a，7-八氫-1H-吡咯［2，3-d］咔唑(E，3aR，5S，6aR，11bS)-5-［1-(Hydroxymethyl)propenyl］-7-(methoxycarbonyl)-2，3，3a，4，5，6，6a，7-octahydro-1H-pyrrolo［2，3-d］carbazole C20H26N2O3 0.15% 72%49 43.76 二十九烷 n-Nonacosane C29H60 9.04% 95%50 45.35 3，4-二氫-2，8-二甲基-2-(4，8，12-三甲基十三烷基)-2H-1-苯并呋喃-6-醇 C27H46O2 2.01% 99%51 47.04 三十烷 n-Triacontane C30H62 0.62% 95%52 48.73 β-生育酚 β-Tocopherol C28H48O2 0.93% 97%53 51.37 三十一烷 Hentriacontane C31H64 1.11% 94%54 53.14 α-生育酚 Vitamin E C29H50O2 3.53% 99%55 63.70 β-谷甾醇 β-stigmasterol C29H50O 18.68% 99%

4 討論

通過(guò)GC-MS和wiley7n.L標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)檢索，漾濞泡核桃青皮脂溶性成分主要含有脂肪烴(26.66%)、甾體(18.68%)、脂肪酸(10.67%)、不飽和脂肪酸(5.03%)、脂肪醛(2.75%)、不飽和脂肪烴(1.72%)及脂肪酸酯(1.34%)等類物質(zhì)。其中，含量較高的β-谷甾醇、棕櫚酸、亞油酸等物質(zhì)研究應(yīng)用較為廣泛。β-谷甾醇不僅具有抗癌、抗炎、鎮(zhèn)痛、降脂、降血糖、抗氧化等藥理活性［10-13］，亦是合成一些降脂藥、口服避孕藥的原料［12，14］。作為一種從植物中分離的到得天然成分，β-谷甾醇不僅對(duì)害蟲殺滅能力強(qiáng)，且毒副作用較小，是制造農(nóng)藥比較理想的原料［15］。棕櫚酸廣泛存在于自然界中，幾乎所有油脂中都含有數(shù)量不等的棕櫚酸。其不僅是人體重要的產(chǎn)能脂肪酸，在人體脂肪代謝中起著重要的作用［16］，也是第一種從脂肪生成中產(chǎn)生的脂肪酸，可以由它產(chǎn)生更長(zhǎng)的脂肪酸及其他工業(yè)原料。因此，棕櫚酸在化工、建材、化妝品、制藥、食品等多個(gè)行業(yè)皆有應(yīng)用。隨著生活水平的提高，人們逐漸意識(shí)到在日常食用的油脂中添加一些不飽和脂肪酸更有利于健康。研究表明，共軛亞油酸不但能防止動(dòng)脈粥樣硬化、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫、抗氧化、降血脂、改善骨組織代謝，而且許多共軛亞油酸具有較好的抗腫瘤活性。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)其抗腫瘤活性的研究報(bào)道也較多［17-19］。由此證明，漾濞泡核桃青皮具有一定的開發(fā)利用價(jià)值。

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