畢瑋 余優(yōu)成 龔逸明 王慶 周康

（復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院口腔科，＊中心實(shí)驗(yàn)室，上海 200032）

隨著生活水平的提高，人們對(duì)牙齒美觀的要求也日益增高。多方面因素造成的著色牙不僅影響美觀，也對(duì)患者造成一定的心理障礙?；钚遭}離子液是一種有機(jī)生物溶液，研究［1］顯示，將其應(yīng)用于口腔時(shí)對(duì)牙齒硬組織及口腔黏膜均無(wú)損傷。離體牙經(jīng)鈣離子液浸泡后，牙齒變白。本研究用色度學(xué)的方法評(píng)價(jià)活性鈣離子液對(duì)著色牙的去漬效果。

1 資料與方法

1.1 材料與試劑 （1）活性鈣離子液（上海力昂生物離子鈣技術(shù)應(yīng)用有限公司）是將水生有機(jī)物（貝殼）經(jīng)溶液萃取而生成的一種無(wú)色透明的生物活性溶液，已申請(qǐng)中國(guó)發(fā)明專利（生物技術(shù)濕法萃取“生物活性鈣離子”工藝，專利申請(qǐng)?zhí)枺?00910196334X）；（2）離體牙（復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院口腔科）；（3）含三聚磷酸鈉（sodium tripolyphosphate，STP）美白牙膏；（4）人工唾液。

1.2 離體牙選取 選取完整無(wú)齲、因正畸治療拔除的第1、第2前磨牙30顆。牙離體后立即刮除牙石、污垢及附著的牙周組織，封閉根尖孔，置于0.9%氯化鈉液與克林霉素混合液中，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 制備染色液 以祁門(mén)紅茶＋唾液＋洗必泰制備染色液。稱取4 g紅茶放入盛有100 mL水的燒杯中，封閉，水浴加熱至95℃，10 min后濾去茶葉備用。

1.4 制備人工唾液 稱取分析純級(jí)別KCl 1.3 g，NaCl 0.1 g，MgCl20.05 g，CaCl20.1 g，NaF25μg，KH2PO40.035 g，ZnSO40.162 g，蛋白胨0.5 g，加蒸餾水至1000 mL（pH6.7～6.8）。

1.5 染色前色彩資料的采集 將每顆牙編號(hào)并以相同條件拍攝數(shù)碼照片。拍攝條件為暗室，人工光源1000勒，45°照射。樣本位置恒定，用數(shù)碼相機(jī)（SONY DSC－H9，分辨率810萬(wàn)像素）拍照，鏡頭與牙面垂直，焦距2.8倍，物距12.0cm，自動(dòng)曝光。

1.6 染色 將牙齒交替浸泡于紅茶＋唾液＋洗必泰液進(jìn)行染色，具體方法為：將已處理的實(shí)驗(yàn)牙放入人工唾液中浸泡2 min后，移到蒸餾水中浸泡30 s；再放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.02的洗必泰溶液中浸泡2 min，移到蒸餾水中30 s；最后放入紅茶浸泡液中浸泡30 min；取出自然干燥，以上為1個(gè)循環(huán)。早晚各1個(gè)循環(huán)，連續(xù)3 d。

1.7 刷牙 將牙齒分成2組并標(biāo)號(hào)，研究組（鈣離子液刷牙組）用鈣離子液刷牙，對(duì)照組（美白牙膏刷牙組）用美白牙膏刷牙。每天2次，每次牙冠頰、舌、近中、遠(yuǎn)中面各刷10次。

1.8 實(shí)驗(yàn)牙顏色的定量分析 分別在刷牙前及刷牙后的1、4、7 d對(duì)實(shí)驗(yàn)牙的牙面顏色定量分析。運(yùn)行Adobe Photoshop CS2軟件，打開(kāi)相應(yīng)的數(shù)碼照片，將牙面分為4個(gè)象限，讀取各象限中點(diǎn)的L、a、b值，根據(jù)公式 W（Lab）＝100－［（100－L）2＋a2＋b2］×1／2，計(jì)算其白色度值。

1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。組內(nèi)前后比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)；組間比較采用協(xié)方差分析，染色后數(shù)據(jù)作為協(xié)變量，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 研究組和對(duì)照組實(shí)驗(yàn)牙的白色度值比較 刷牙后1、4、7 d，研究組和對(duì)照組白色度值均高于刷牙前；研究組刷牙前后的白色度差值高于對(duì)照組，見(jiàn)表1～2。

表1 2組刷牙前后白色度值比較

表2 2組刷牙前后白色度的差值

3 討 論

牙齒著色因病因?qū)W、牙齒外觀、牙齒部位和嚴(yán)重程度而有所差異。本研究主要觀察鈣離子液對(duì)著色牙的去漬效果，并用色度學(xué)的方法加以評(píng)價(jià)。選取完整無(wú)齲、因正畸治療拔除的第1、第2前磨牙，這些牙均為正常的年輕恒牙，牙齒顏色正常，建立牙齒外源性著色模型。

牙著色的機(jī)制主要是洗必泰溶液中的陽(yáng)性離子沉淀到牙面的獲得性膜上，然后與含陰離子的食物色素反應(yīng)，其產(chǎn)物慢慢地使整個(gè)唾液薄膜著色。獲得性膜對(duì)牙著色的具體機(jī)制尚不清楚，可能與不同個(gè)體所形成的牙面獲得性膜的物理和化學(xué)性質(zhì)不同有關(guān)。在容易著色的人群中，唾液獲得性膜對(duì)鐵的結(jié)合力強(qiáng)，有更多的結(jié)合位點(diǎn)。此外，不同牙面的物理化學(xué)性質(zhì)不同，也影響獲得性膜形成的能力，如牙面越粗糙越易著色。本研究采用洗必泰＋唾液＋紅茶的外源性著色模型進(jìn)行染色。其中洗必泰是口腔常用的廣譜抗菌抑菌制劑，廣泛存在于各類漱口水中。有研究顯示，洗必泰的主要活性基團(tuán)是含6個(gè)碳原子的己烷所構(gòu)成的亞甲基，其終末分支基團(tuán)能增強(qiáng)黏附力。推測(cè)在此模型中，唾液的主要作用是形成獲得性膜，洗必泰附著于獲得性膜上，通過(guò)其陽(yáng)離子與紅茶色素陰性離子相結(jié)合，促進(jìn)紅茶色素的沉積［2］。

STP是線性縮合磷酸鹽，是美白牙膏中的一種成分。Shellis等［3］用羥磷灰石作為牙礦物質(zhì)的代用品，用紅茶作為著色劑進(jìn)行STP抑制色素沉積和清除著色的體外研究，該研究把羥磷灰石置于同一個(gè)人的動(dòng)態(tài)全唾液內(nèi)處理2 min，凍干后按質(zhì)量隨機(jī)分組，STP處理組可使樣本對(duì)蛋白質(zhì)和色素吸收減少50%。Lanford等［4］使用石英晶體微天平技術(shù)的回聲傳感器對(duì)著色的形成、抑制和清除進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控，也證實(shí)STP具有抑制和清除茶著色的作用。此外，Busscher等［5］從電泳數(shù)據(jù)判斷，含有多聚磷酸鹽的牙膏能使牙本質(zhì)表面的獲得性膜有更開(kāi)放的結(jié)構(gòu)，這種結(jié)構(gòu)會(huì)使著色劑易于被清除。

傳統(tǒng)的測(cè)定牙齒顏色的方法有視覺(jué)比色法和分光測(cè)定法。視覺(jué)比色法是通過(guò)將牙齒與標(biāo)準(zhǔn)色卡相比較，測(cè)定和評(píng)價(jià)其色度，其結(jié)果主觀性高、精確度低。分光測(cè)色法是應(yīng)用多個(gè)傳感器測(cè)定牙齒表面反射光線各個(gè)波長(zhǎng)段的反射率，其測(cè)定顏色的標(biāo)準(zhǔn)條件、測(cè)定顏色的數(shù)值具有可重復(fù)性，并且可以定量測(cè)定2種顏色的差異；但是由于儀器的光導(dǎo)纖維探頭設(shè)計(jì)的限制和牙面解剖形態(tài)的制約，研究者只能測(cè)量牙冠中部，而無(wú)法詳細(xì)測(cè)定整個(gè)牙冠表面的顏色。這使得對(duì)牙齒增白效果的評(píng)價(jià)有失全面，結(jié)果也不準(zhǔn)確。為了更加全面、客觀、準(zhǔn)確和科學(xué)地對(duì)去色方法的去色效果作出評(píng)價(jià)，我們采用1976年國(guó)際照明委員會(huì)推薦的評(píng)價(jià)方法［6］。

本研究所用的數(shù)碼照相計(jì)算機(jī)色度分析系統(tǒng)是一種全新的牙齒顏色測(cè)定方法。它吸收了傳統(tǒng)的視覺(jué)比色法和分光測(cè)色法在采集數(shù)據(jù)方面的優(yōu)點(diǎn)，故測(cè)定顏色的數(shù)值具有可重復(fù)性；將采集的顏色數(shù)據(jù)以數(shù)碼形式儲(chǔ)存在計(jì)算機(jī)中，通過(guò)計(jì)算機(jī)軟件分析處理物體的顏色數(shù)據(jù)，因此，對(duì)牙冠顏色的測(cè)量更全面，且數(shù)碼照相計(jì)算機(jī)分析系統(tǒng)能夠定量地分析牙面顏色的變化。比較鈣離子液刷牙組和美白牙膏刷牙組在刷牙1、4、7 d與染色后牙面白色度值的差值。刷牙1d后，2組白色度值無(wú)顯著差異；刷牙4、7d后，2組白色度值有顯著差異（P＜0.05）。這說(shuō)明鈣離子液去漬作用顯著優(yōu)于美白牙膏。

綜上所述，鈣離子液作為一種生物溶液，有可能成為新型的牙齒去漬美白產(chǎn)品。

［1］ 畢瑋，余優(yōu)成，龔逸明，等.活性鈣離子液對(duì)離體牙超微形態(tài)的影響和其細(xì)胞毒性評(píng)價(jià)［J］.上?？谇会t(yī)學(xué)，2012（4）：402－406.

［2］ 許麗霞，李繼遙.牙漂白體外源性著色模型的研究進(jìn)展［J］.國(guó)際口腔醫(yī)學(xué)雜志，2008，35（4）：166－168.

［3］ Shellis RP，Addy M，Rees GD.In vitro studies on the effect of sodium tripolyphosphate on the interactions of stain and salivary protein with hydroxyapatite［J］.J Dent，2005，33（4）：313－324.

［4］ Langford J，Pavey KD，Olliff CJ，et al.Real－time monitoring of stain formation and removal on calcium hydroxyapatite surfaces using quartz crystal sensor technology［J］.Analyst，2002，127（3）：360－367.

［5］ Busscher HJ，White DJ，Kamminga－Rasker HJ，et al.Influence of oral detergents and chlorhexidine on soft－layer electrokinetic parameters of the acquired enamel pellicle［J］.Caries Res，2003，37（6）：431－436.

［6］ 王瑩，莊欣宇，徐軍，等.Nd－YAG激光漂白四環(huán)素牙效果觀察［J］.實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志，2001，17（3）：203－205.