李 鋒,王賢波
(浙江省杭州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院 實(shí)驗(yàn)中心,浙江 杭州 310024)
茶葉中兒茶素是茶葉中重要的一類(lèi)天然活性物質(zhì),是天然的抗氧化劑和自由基清除劑,被廣泛應(yīng)用于食品加工、醫(yī)藥保健等領(lǐng)域[1-3]。兒茶素占茶葉中茶多酚總量的60%~80%,主要有表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG)、表兒茶素沒(méi)食子酸酯(ECG)、表沒(méi)食子兒茶素(EGC)及表兒茶素(EC)等[3-4]。大量研究已證明兒茶素具有抗腫瘤、降血壓、降血脂、清除自由基、壓制黑色素合成等作用[2-5]。在降血脂方面,主要是以茶多酚為材料進(jìn)行的研究[6-7],單純的以 EGC為材料進(jìn)行的研究鮮有報(bào)道。作者以高脂飼料喂養(yǎng)大鼠,建立高脂大鼠模型,給予相應(yīng)劑量的 EGC,探討EGC對(duì)高脂大鼠血清中脂質(zhì)代謝相關(guān)指標(biāo)的影響,為相關(guān)應(yīng)用研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
實(shí)驗(yàn)用EGC,為茶葉中提取物,含量>80%,本實(shí)驗(yàn)室提取。
實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物為清潔級(jí)SD雄性大鼠32只,體重200~250 g,由浙江省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供(生產(chǎn)許可證號(hào):SCXK(浙)2008-0033;使用許可證號(hào):SYXK(浙)2008-0113)。
飼喂大鼠高脂飼料:80.5%普通飼料,2%膽固醇,10%蛋黃粉,7%豬油,0.5%膽鹽。
主要儀器:TGL-16G低溫高速臺(tái)式離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠),電子天平(METTLER公司),HITACHI7180全自動(dòng)生化分析儀(日立公司)。
大鼠在溫度(23±2)℃、相對(duì)濕度50% ~70%的SPF屏障系統(tǒng)內(nèi)飼養(yǎng)。在實(shí)驗(yàn)環(huán)境下大鼠用基礎(chǔ)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后稱(chēng)重,空腹16 h后眼眶采血,測(cè)定血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平,根據(jù)血清總膽固醇水平,隨機(jī)分為4組:正常對(duì)照組(Ⅰ組),喂基礎(chǔ)飼料;模型對(duì)照組(Ⅱ組),喂高脂飼料;實(shí)驗(yàn)組(Ⅲ組),喂高脂飼料,并每日灌喂0.5 g·kg-1的EGC;和實(shí)驗(yàn)組(Ⅳ組),喂高脂飼料,并每日灌喂1.0 g·kg-1的 EGC)。每組8只大鼠。
大鼠連續(xù)飼喂30 d,每周稱(chēng)量體重,實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),禁食16 h后麻醉,腹主動(dòng)脈采血,室溫靜置3 h后,1 500 r·min-1離心 10 min,取上清液,測(cè)定血清 TC、TG、HDL-C、LDL-C,并計(jì)算動(dòng)脈硬化指數(shù)(AI)值。
數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析,采用One Way ANVOA分析,所有數(shù)據(jù)以x±SD表示。
大鼠以基礎(chǔ)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后稱(chēng)重,空腹16 h后眼眶采血,測(cè)定血清 TC、TG、HDL-C、LDL-C水平,隨機(jī)分為4組。實(shí)驗(yàn)結(jié)果(表1)顯示,各組血清中 TC、TG、HDL-C、LDL-C含量沒(méi)有顯著性差異。
表1 各組別EGC喂飼前大鼠的血脂水平
表2 各組別EGC實(shí)驗(yàn)前后大鼠的體重
連續(xù)喂高脂飼料30 d后,體重測(cè)定結(jié)果(表2)顯示,大鼠體重增加,喂高脂飼料組比基礎(chǔ)飼料組大鼠生長(zhǎng)稍快,各組之間無(wú)顯著性差異。
對(duì)大鼠的血清測(cè)定結(jié)果(表3)顯示:Ⅲ、Ⅳ實(shí)驗(yàn)組 TC、HDL-C、LDL-C含量與模型對(duì)照組(Ⅱ組)比較均無(wú)顯著性差異。Ⅲ、Ⅳ實(shí)驗(yàn)組 TG含量與模型對(duì)照組比較,有極顯著性差異,說(shuō)明EGC能調(diào)節(jié)甘油三酯的代謝。Ⅲ、Ⅳ實(shí)驗(yàn)組在降低LDL-C含量上雖然在統(tǒng)計(jì)學(xué)上與模型對(duì)照組比較沒(méi)有顯著性差異,但從均值上觀察有降低趨勢(shì)。
表3 各組別EGC喂飼后大鼠的血脂水平
(TC-HDL-C)/HDL-C,稱(chēng)為動(dòng)脈硬化指數(shù)(atherosclerosis index,AI),AI值能反映動(dòng)脈粥樣硬化程度。數(shù)值越小動(dòng)脈硬化的程度就越輕,引發(fā)心腦血管病的危險(xiǎn)性就越低;數(shù)值越大動(dòng)脈硬化的程度就越重,發(fā)生心腦血管病的危險(xiǎn)性就越高。結(jié)果(表4)顯示:Ⅲ、Ⅳ實(shí)驗(yàn)組AI值與模型對(duì)照組比較,Ⅲ實(shí)驗(yàn)組略有升高,Ⅳ實(shí)驗(yàn)組略有降低,但均無(wú)顯著性差異。
表4 實(shí)驗(yàn)后各組別大鼠的AI值
高脂血癥是誘發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化和心血管病的重要因素之一。當(dāng)血清LDL-C濃度升高時(shí),動(dòng)脈壁內(nèi)脂質(zhì),特別是膽固醇酯沉積增多,可引起中膜平滑肌組織大量增殖,促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展[6]。而HDL-C被稱(chēng)為血管清道夫,能將外圍組織和血液中的膽固醇運(yùn)送至肝臟進(jìn)行代謝,具有抗動(dòng)脈粥樣硬化作用[8]。EGC降血脂的機(jī)制可能是調(diào)節(jié)甘油三酯代謝,通過(guò)抑制胰脂肪酶的活性而降低了對(duì)外源性TG的吸收、降低脂肪酸合成酶的活性而減少了脂肪酸的合成、增強(qiáng)肝脂酶活性加速了TG的代謝及促進(jìn)脂肪酸的排泄來(lái)調(diào)節(jié)TG代謝[7]。
研究結(jié)果表明,茶葉中EGC能極顯著降低高脂模型大鼠血清中TG含量,在一定程度上降低LDL-C含量,因此可知,EGC具有一定的降血脂作用,其詳細(xì)作用機(jī)制需進(jìn)一步研究。
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