周銀麗，胡先奇，薛春麗，白建波，王 黎

（1.紅河學(xué)院農(nóng)學(xué)系，云南蒙自661100；2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)植物病理重點實驗室，云南昆明650201）

水稻潛根線蟲（Hirschmanniella spp.）是水稻的主要寄生線蟲，也是引起中國水稻潛根線蟲病的重要線蟲。水稻潛根線蟲侵染水稻根部，輕則影響水稻的生長發(fā)育，重則直接導(dǎo)致減產(chǎn)。據(jù)報道，全世界58%的水稻田遭受潛根線蟲的危害，造成25%的產(chǎn)量損失。潛根線蟲于1902年在印度尼西亞首先發(fā)現(xiàn)，1981年中國首次報道了水稻潛根線蟲，目前主要采用化學(xué)防治及綜合防治的方法進(jìn)行防治。與傳統(tǒng)農(nóng)藥相比，新型高效、無殘留、無公害的植物源農(nóng)藥由于其有效成分為天然物質(zhì)，施用后易分解為無毒物質(zhì)，對環(huán)境無污染，對有益生物（即害蟲天敵）安全，可以大量種植等優(yōu)點成為研究開發(fā)的熱點。近幾年，有些學(xué)者研究植物提取物對水稻潛根線蟲的防治作用。為找到更多能抑殺水稻潛根線蟲的植物源農(nóng)藥，本實驗選用洋蔥、夾竹桃（花、葉）、細(xì)辛、煙葉、苦參、澤瀉6種天然植物，研究其提取液對水稻潛根線蟲的室內(nèi)抑殺作用，為使用天然植物源農(nóng)藥防治水稻潛根線蟲提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 材料

供試植物為洋蔥、夾竹桃（花、葉）、細(xì)辛、煙葉、苦參、澤瀉，均采自蒙自地區(qū)，提取溶劑為0.05%鹽酸、0.05%氫氧化鈉、20%乙醇、無菌水。用貝曼淺盤法分離水稻潛根線蟲。

1.2 方法

1.2.1 植物提取液制備

將收集到的植物經(jīng)烘干（50℃，24 h）、用微型破碎機(jī)粉碎并過篩后，分別稱取6 g植物粉溶于50℃提取溶劑中，常溫振蕩（300 r/min，25℃），浸泡提取24 h后，用濾紙過濾提取液，并用相應(yīng)的溶劑定容至100ml備用。

1.2.2 分離水稻潛根線蟲

用貝曼淺盤法分離水稻潛根線蟲。

1.2.3 殺水稻潛根線蟲活性評價

將獲得的各種植物提取液10 ml分別加入直徑為9 cm的培養(yǎng)皿中，挑取40~50條水稻潛根線蟲加入其中，置于室溫下，分別于24 h和48 h后用清水復(fù)蘇2 h檢查線蟲死亡數(shù)，每組處理4次重復(fù)，計算各處理的校正死亡率，并比較殺蟲效果。

水稻潛根線蟲在植物提取液中48 h平均死亡率為0～10.0%，測定結(jié)果用“-”表示；死亡率在10.1%～30.0%，測定結(jié)果用“+”表示；死亡率在30.1%～50.0%，測定結(jié)果用“++”表示；死亡率在50.1%～80.0%，測定結(jié)果用“+++”表示；死亡率在80.1%～100%，測定結(jié)果用“++++”表示。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

線蟲死亡率（%）=死亡線蟲數(shù)/供試線蟲數(shù)×100

線蟲校正死亡率（%）=（處理組線蟲死亡率-對照組線蟲死亡率）/（1-對照組線蟲死亡率）×100。

2 結(jié)果與分析

2.1 6種植物無菌水提取液殺水稻潛根線蟲活性評價

洋蔥、細(xì)辛、煙草、澤瀉、苦參、夾竹桃（花、葉）無菌水提取液殺水稻潛根線蟲活性各項指標(biāo)見表1。從表1可見，洋蔥無菌水提取液殺水稻潛根線蟲活性最強(qiáng)，處理24 h、48 h線蟲的校正死亡率分別為78.42%、88.23%；細(xì)辛、夾竹桃花、夾竹桃葉無菌水提取液殺水稻潛根線蟲活性較強(qiáng)，處理48 h線蟲的校正死亡率分別為75.79%、73.42%、71.24%；煙葉無菌水提取液殺水稻潛根線蟲活性中等，處理48 h線蟲的校正死亡率為47.15%；苦參、澤瀉無菌水提取液殺水稻潛根線蟲活性差，處理48 h線蟲的校正死亡率分別為26.64%、9.56%。

2.2 6種植物0.05%鹽酸提取液殺水稻潛根線蟲活性評價

6種植物0.05%鹽酸提取液對水稻潛根線蟲的殺蟲效果見表1。從表1可見，細(xì)辛提取液殺水稻潛根線蟲活性最強(qiáng)，處理24 h、48 h線蟲的累計校正死亡率分別為91.64%、98.35%；洋蔥提取液殺水稻潛根線蟲活性次之，處理48 h后線蟲的校正死亡率為93.91%，表現(xiàn)出較強(qiáng)的毒殺作用；夾竹桃花提取液殺水稻潛根線蟲活性較強(qiáng)，處理48 h后線蟲的校正死亡率為79.89%；煙葉、夾竹桃葉提取液對水稻潛根線蟲有中等毒殺效果，處理48 h線蟲校正死亡率分別為43.78%、49.35%；苦參和澤瀉提取液的毒殺能力弱，處理48 h線蟲的校正死亡率分別為25.00%、16.56%。

表1 不同植物提取液殺水稻潛根線蟲活性評價

表2 不同植物提取液殺水稻潛根線蟲活性評價

2.3 6種植物0.05%氫氧化鈉提取液殺水稻潛根線蟲活性評價

從表2可見，洋蔥、細(xì)辛、夾竹桃花0.05%氫氧化鈉提取液殺水稻潛根線蟲能力較強(qiáng)，處理48 h線蟲的校正死亡率分別為86.15%、79.28%、76.56%；煙葉、夾竹桃葉、苦參提取液的殺水稻潛根線蟲活性次之，處理48 h線蟲的校正死亡率分別為46.47%、46.00%、33.91%；澤瀉提取液表現(xiàn)出弱的殺蟲能力，處理48 h線蟲的校正死亡率為13.92%。

2.4 6種植物20%乙醇提取液殺水稻潛根線蟲活性評價

從表2可見，夾竹桃花20%乙醇提取液殺水稻潛根線蟲活性能力最強(qiáng)，處理24 h、48 h線蟲的校正死亡率分別為83.24%、86.98%；洋蔥、夾竹桃葉、細(xì)辛提取液殺水稻潛根線蟲活性較強(qiáng)，處理48 h線蟲的校正死亡率分別為78.23%、77.45%、76.56%；煙葉和苦參提取液的毒殺能力中等，處理48 h線蟲的校正死亡率分別為42.89%、38.47%；澤瀉提取液殺水稻潛根線蟲活性較差，處理24 h、48 h線蟲的校正死亡率分別為3.34%、8.64%。

3 討論

用細(xì)辛等6種植物的無菌水提取液處理水稻潛根線蟲，洋蔥提取液殺蟲活性強(qiáng)，細(xì)辛、夾竹桃（花、葉）提取液的殺線蟲活性次之，苦參和煙葉提取液殺蟲活性較差；而在0.05%鹽酸提取液中，細(xì)辛和洋蔥、夾竹桃花提取液均表現(xiàn)出較強(qiáng)的毒殺能力，除夾竹桃葉外，其余5種植物0.05%鹽酸提取液均比無菌水提取液殺水稻潛根線蟲活性強(qiáng)。

而6種植物0.05%氫氧化鈉提取液都具有一定的殺蟲效果，其中以洋蔥、細(xì)辛、夾竹桃花提取液殺水稻潛根線蟲能力較強(qiáng)，澤瀉提取液表現(xiàn)出較弱的毒殺能力。6種植物20%乙醇提取液中，夾竹桃花提取液殺線蟲活性最強(qiáng)，洋蔥、夾竹桃葉、細(xì)辛提取液具有較強(qiáng)的毒殺能力；煙葉和苦參提取液表現(xiàn)出中等的毒殺能力；澤瀉提取液殺線蟲的活性較差，說明不同植物選用不同提取液其殺線蟲活性也不同。

同一植物不同部位的提取液殺水稻潛根線蟲活性也不同，夾竹桃花20%乙醇提取液殺線蟲活性最強(qiáng)，無菌水提取液殺線蟲活性相對較弱；夾竹桃葉20%乙醇提取液殺線蟲活性相對較強(qiáng)，氫氧化鈉提取液殺線蟲活性較弱。從總體來看，花提取液毒殺水稻潛根線蟲效果比葉的好，說明植物不同部位含有的殺蟲成分及殺蟲物質(zhì)可能不同。

實驗中發(fā)現(xiàn)，同一種植物，由于所選用的提取溶劑不同，其提取液殺線蟲活性也不同，其中變化較大的是夾竹桃葉，其0.05%氫氧化鈉提取液48 h的校正死亡率為46.00%，而乙醇提取液中48 h的校正死亡率為77.45%。由此說明，植物中不同有效成分溶于不同的提取溶劑中，在對植物進(jìn)行殺蟲活性篩選時應(yīng)有針對性地選用溶劑種類，這樣能減小植物中有效活性成分的漏選幾率。

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