林麗英 張 泳 楊素冰
1.廣州醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣東 廣州 510150;2.廣州市中醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣東 廣州 510130;3.廣州市腫瘤醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣東 廣州 510095
便隱血試驗(yàn)(OBT)是指消化道出血量少,肉眼不見血色,而且少量紅細(xì)胞又被消化分解,以至顯微鏡下也無(wú)從發(fā)現(xiàn)的出血[1-3]。正常人糞便隱血試驗(yàn)為陰性。其陽(yáng)性常見于消化性潰瘍的活動(dòng)期、胃癌、鉤蟲病以及消化道炎癥、出血性疾病等;消化性潰瘍呈間斷陽(yáng)性,消化道癌癥呈持續(xù)性陽(yáng)性,故本試驗(yàn)對(duì)消化道出血的診斷及消化道腫瘤的普查、初篩和監(jiān)測(cè)均有重要意義[4]。目前主要采用化學(xué)法、單克隆抗體法,但血紅蛋白由于受到腸內(nèi)細(xì)菌的作用及大腸黏膜產(chǎn)生的黏液成分影響而變性,常出現(xiàn)假陰性反應(yīng)。有報(bào)道指出應(yīng)用聯(lián)合免疫法同時(shí)測(cè)定血紅蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白,對(duì)消化道出血性疾病的陽(yáng)性檢出率有顯著提高。本文對(duì)聯(lián)合免疫法、血紅蛋白法(OB)、轉(zhuǎn)鐵蛋白法(TF)檢測(cè)便隱血的3種方法進(jìn)行比較。現(xiàn)報(bào)道如下:
1 944例糞便標(biāo)本,均來(lái)自廣州醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院就診的患者,其中,男917例,女 1 027例;年齡 0~82歲。消康保便隱血試紙和轉(zhuǎn)鐵蛋白膠體金診斷試紙購(gòu)自萬(wàn)華普曼生物工程有限公司。
1.2.1 血紅蛋白的檢測(cè) 用采便棒采集便樣后,將其放入裝有緩沖液的小試管中,充分混勻便樣;撕開鋁錫箔袋,取出試紙條;將試紙標(biāo)有MAX箭頭的一端插入待測(cè)樣本中,待測(cè)標(biāo)本界面不得超過(guò)MAX線;5 min內(nèi)判讀結(jié)果。在反應(yīng)線和控制線同時(shí)出現(xiàn)一條色帶,代表OB陽(yáng)性,提示標(biāo)本有隱形出血;在控制線出現(xiàn)一條色帶,反應(yīng)線無(wú)色帶出現(xiàn),則為陰性,即提示標(biāo)本無(wú)隱性出血;在控制線和反應(yīng)線均無(wú)色帶出現(xiàn),或在反應(yīng)線出現(xiàn)一條色帶,表明試驗(yàn)無(wú)效。血紅蛋白的檢測(cè)范圍為 0.2~2 000.0μg/mL。
1.2.2 轉(zhuǎn)鐵蛋白的檢測(cè) 方法同上,其中轉(zhuǎn)鐵蛋白的檢測(cè)范圍為 40 ng/mL~400μg/mL。
1.2.3 聯(lián)合檢測(cè)法 OB法和TF法有任何一項(xiàng)為陽(yáng)性,聯(lián)合檢測(cè)法即為陽(yáng)性。
采用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)軟件建立數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析處理,計(jì)數(shù)資料以百分率表示,采用χ2檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
其中,TF法的陽(yáng)性率明顯高于OB法,差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=20.38,P<0.01),聯(lián)合檢測(cè)法的陽(yáng)性率明顯高于OB 法,差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=36.01,P < 0.01)。 雖然聯(lián)合檢測(cè)法的陽(yáng)性率(11.11%)略高于TF法的陽(yáng)性率(9.62%),但兩者陽(yáng)性率比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.33,P=0.127>0.05)。見表 1。
表1 3種方法陽(yáng)性率的比較(例)
轉(zhuǎn)鐵蛋白的檢測(cè)對(duì)于消化道出血的診斷有很重要的參考價(jià)值[5]。現(xiàn)在常規(guī)檢查方法是化學(xué)法和免疫法。化學(xué)法方法種類繁多,但試驗(yàn)原理基本相同,都是基于血紅蛋白中的含鐵血黃素部分有催化過(guò)氧化物分解的作用,能催化試劑中的過(guò)氧化氫,分解釋放新生態(tài)氧,氧化上述色原物質(zhì)而呈色,顏色的深淺反映了血紅蛋白的多少[6]。免疫法檢測(cè)的指標(biāo)一般是人血紅蛋白或人紅細(xì)胞基質(zhì),所用抗體是抗人血紅蛋白抗體或抗人紅細(xì)胞基質(zhì)抗體,檢測(cè)人血紅蛋白可檢出消化道任何部位的出血,檢測(cè)人紅細(xì)胞基質(zhì)只能檢出下消化道出血。但是血紅蛋白由于受到腸內(nèi)細(xì)菌的作用及大腸黏膜產(chǎn)生的黏液成分的影響而變性,易出現(xiàn)假陰性反應(yīng)。轉(zhuǎn)鐵蛋白膠體金診斷試紙用來(lái)檢測(cè)糞便中的轉(zhuǎn)鐵蛋白,可以排除以上方法的缺點(diǎn),不僅有較好的特異性和靈敏度,還對(duì)消化道出血者陽(yáng)性率有顯著的提高[7]。
在糞便的形成過(guò)程中,少量的消化道出血不一定與之混合均勻,而且消化道出血具有間斷性,所以要連續(xù)3次檢測(cè)以獲得更為準(zhǔn)確的結(jié)果,只要一次結(jié)果為陽(yáng)性,就可認(rèn)為有隱形性出血存在。免疫法檢測(cè)便隱血的結(jié)果呈陽(yáng)性,可能由于以下干擾情況導(dǎo)致,如牙齦、口鼻腔出血,月經(jīng)出血、某些藥物(如阿司匹林)刺激胃腸道造成的出血,應(yīng)引起臨床醫(yī)生的注意[8]。
出現(xiàn)柏油樣便時(shí),血紅蛋白濃度超出2 000μg/mL檢測(cè)范圍可能會(huì)因?yàn)榍皽磻?yīng)出現(xiàn)假陰性結(jié)果,此時(shí)需要充分稀釋便樣后再進(jìn)行測(cè)試。隨著社會(huì)環(huán)境的改變、工作壓力增大、食品添加劑的應(yīng)用、藥品的使用和飲食習(xí)慣的改變,上、下消化道的感染、損傷、腫瘤和胃腸不適所致的出血病例有所增加。單純的血紅蛋白單克隆抗體法檢測(cè)糞便隱血試驗(yàn)有一定的局限性,對(duì)于十二指腸及胃以上部位的上消化道出血?jiǎng)t會(huì)出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因?yàn)檠t蛋白在消化道存留時(shí)間過(guò)長(zhǎng),可能被胃酸或腸道內(nèi)細(xì)菌分泌的酶所降解或破壞,使其免疫原性減弱或出現(xiàn)假陰性的結(jié)果[9-11],此時(shí)應(yīng)增加樣本濃度檢測(cè)或者連續(xù)檢測(cè)3次,并結(jié)合臨床進(jìn)行判斷?,F(xiàn)我科開展的金標(biāo)法測(cè)定糞便中轉(zhuǎn)鐵蛋白隱血試驗(yàn),兩法聯(lián)用,填補(bǔ)了血紅蛋白法測(cè)定的缺陷,減少了上消化道出血病例的漏診[12]。
就像其他檢驗(yàn)方法一樣,便隱血試驗(yàn)不能對(duì)胃腸道出血性疾病做出結(jié)論性診斷,只能作為篩選或輔助診斷用,但是不能代替臨床內(nèi)窺鏡、X線片和其他檢查。對(duì)于陽(yáng)性結(jié)果,應(yīng)結(jié)合臨床做進(jìn)一步的檢查。
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