郭 琳 張 旋 范少敏 王 薇 宋小妹▲ 陜西中醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院（咸陽712000）

芪珠升白口服液是陜西中醫(yī)學院附屬醫(yī)院多年臨床經(jīng)驗方，由珠子參、黃芪兩味中藥組成。芪珠升白口服液具有提高機體免疫力、升高白細胞數(shù)等作用，臨床用于化療產(chǎn)生的白細胞減少癥。本文對其主要藥效進行了研究，以期為臨床應(yīng)用和進一步開發(fā)提供科學依據(jù)。

1 材料與儀器 1.1 藥物 芪珠升白口服液，由陜西中醫(yī)學院中藥化學研究室提供；環(huán)磷酰胺（上海華聯(lián)制藥有限公司，批號：090907）；印度墨汁。

1.2 實驗動物 昆明種小鼠，雌雄各半，18～22g，第四軍醫(yī)大學實驗動物中心提供。

1.3 儀器設(shè)備 KDM型調(diào)溫電熱套，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器RE－52（上海亞榮生化儀器廠），紫外分光光度計UV1102（上海天美科學儀器有限公司），儀表恒溫水浴鍋，530離心機，電子天平GB－204（瑞士）等。

2 方法及結(jié)果 2.1 芪珠升白口服液對白細胞數(shù)和免疫器官的影響[1]取小鼠50只，隨機分成5個組，每組10只。即正常對照組、環(huán)磷酰胺組和口服液大劑量組（4.8g/kg）、口服液中劑量組（2.4g/kg）和口服液小劑量組（1.2g/kg），適應(yīng)環(huán)境3d。灌胃給予正常組和環(huán)磷酰胺組小鼠生理鹽水20mL/kg，實驗開始前3d除正常對照組外其他各組腹腔注射100mg/kg環(huán)磷酰胺，制造免疫低下模型。給藥組給予相應(yīng)劑量藥物，連續(xù)給藥7d。末次用藥24h后，采用眼眶摘眼球取血法，用血細胞計數(shù)板計數(shù)白細胞數(shù)。然后處死動物，剖取胸腺及脾臟，濾紙吸去表面殘血，立即于精密天平上稱其濕重，計算臟器重量指數(shù)。組間進行t檢驗分析，結(jié)果見表1。

表1 芪珠升白口服液對白細胞數(shù)的影響±s）

表1 芪珠升白口服液對白細胞數(shù)的影響±s）

注：與模型組比較，△P＜0.05；▲P＜0.01

胸腺指數(shù) 脾臟指數(shù)正常對照組 3.852±0.252▲ 5.824±1.390▲ 3.168±0.996組 別 劑量（g/kg） 白細胞數(shù)（109/L）△模型對照組 0.1 1.445±0.322 1.892±0.345 2.321±0.688口服液大劑量 4.8 2.947±0.859▲ 1.544±0.264△ 3.053±1.039△口服液中劑量 2.4 2.884±1.124▲ 1.780±0.432 3.721±1.398△口服液小劑量 1.2 2.075±0.793△1.950±0.561 3.011±1.122

2.1.1 對白細胞數(shù)的影響：由表1的實驗結(jié)果可以看出：與正常對照組比較，環(huán)磷酰胺組的白細胞數(shù)顯著降低（P＜0.01），有顯著性差異，說明用環(huán)磷酰胺造模成立；與環(huán)磷酰胺組比較，芪珠升白口服液小劑量組白細胞數(shù)顯著增加（P＜0.05），有顯著性差異，大、中劑量有較強的顯著性差異（P＜0.01），實驗結(jié)果說明芪珠升白口服液有較強的升高白細胞數(shù)的作用。

2.1.2 對免疫器官的影響：由表1的實驗結(jié)果可以看出：與正常對照組比較，環(huán)磷酰胺組的脾臟指數(shù)顯著降低（P＜0.05），有顯著性差異，說明用環(huán)磷酰胺造模使脾臟指數(shù)降低，芪珠升白口服液大、中劑量組脾臟指數(shù)顯著增加（P ＜0.05），與環(huán)磷酰胺組比較，有顯著性差異?？诜捍髣┝啃叵僦笖?shù)與模型組比較有顯著性差異（P＜0.05），實驗結(jié)果說明芪珠升白口服液可以改善免疫器官的免疫力。

2.2 芪珠升白口服液碳粒廓清實驗的影響[2]取50只小鼠，隨機分成5組，即正常對照組、環(huán)磷酰胺組和口服液大劑量組（4.8g/kg）、口服液中劑量組（2.4g/kg）和口服液小劑量組（1.2g/kg），每組10只，適應(yīng)環(huán)境3d。灌胃給予正常組和環(huán)磷酰胺組小鼠生理鹽水20mL/kg，實驗開始前3d除正常對照組外，其他各組腹腔注射環(huán)磷酰胺100mg/kg，以制造免疫低下模型。給藥組給予相應(yīng)劑量藥物，連續(xù)給藥7d。末次給藥后，各鼠尾靜脈注入印度墨汁（以10倍生理鹽水稀釋）10mL/kg，于注射后1min和6min小鼠眼眶采血25μL，加入到2mL 0.1%Na2CO3溶液中搖勻，于分光光度計上600nm吸收波長處比色，計算吞噬指數(shù)和吞噬系數(shù)校正吞噬指數(shù)。測光密度值（OD）；K＝logOD1－logOD2/t2－t1；a＝K1/3×體重/（肝重＋脾重）。組間進行t檢驗分析，結(jié)果見表2。

由表2的實驗結(jié)果可以看出：與正常對照組比較，環(huán)磷酰胺組的K、a顯著降低（P＜0.05）有顯著性差異，說明用環(huán)磷酰胺造模成立；與環(huán)磷酰胺組比較，芪珠升白口服液中劑量組K、a的值顯著增加（P＜0.05），實驗結(jié)果說明口服液中劑量組可以增加吞噬指數(shù)和吞噬系數(shù)校正吞噬指數(shù)。

2.3 2，4－二硝基氟苯（DNFB）誘導(dǎo)遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)（DTH）[3]：取50只小鼠，隨即分成5組，即正常對照組、環(huán)磷酰胺組和口服液大劑量組（4.8g/kg）、口服液中劑量組（2.4g/kg）和口服液小劑量組（1.2g/kg），每組10只。適應(yīng)環(huán)境3d。灌胃給藥，正常組和環(huán)磷酰胺組給予生理鹽水20mL/kg，實驗開始前3d除正常對照組外其他各組腹腔注射100mg/kg環(huán)磷酰胺，制造免疫低下模型。給藥組給予相應(yīng)劑量藥物，連續(xù)給藥7d。給藥后第3d每鼠腹部剪毛（3cm×3cm），均勻涂抹1%DNFB 50μL致敏，藥后第5天再用1%DNFB 10μL攻擊右耳，24h后處死動物，用打孔器取下直徑8mm的耳片，稱重，以左右耳的重量之差（腫脹度）來表示DTH的程度。腫脹度＝右耳片重量－左耳片重量。組間進行t檢驗分析，結(jié)果見表3。

表3 2，4－二硝基氟苯誘導(dǎo)遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)±s）

表3 2，4－二硝基氟苯誘導(dǎo)遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)±s）

注：與模型組比較：△P＜0.05；▲P＜0.01。

1.2 16.87±5.718組 別 劑量（g/kg）15.5±2.563模型對照組 0.1 22.37±7.269△口服液大劑量 4.8 14±3.380△口服液中劑量 2.4 15.62±4.373△口服液小劑量腫脹度正常對照組

由表3的實驗結(jié)果可以看出：與正常對照組比較，環(huán)磷酰胺組的小鼠腫脹度顯著升高（P＜0.05）有顯著性差異，說明用環(huán)磷酰胺造模成立；與環(huán)磷酰胺組比較，芪珠升白口服液中、大劑量組能顯著降低小鼠腫脹度，實驗結(jié)果說明口服液可改善DNFB誘導(dǎo)遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)。

3 討 論 綜上實驗結(jié)果表明，芪珠升白口服液能較強的升高白細胞數(shù)、改善免疫器官的免疫力、可以增加吞噬指數(shù)和吞噬系數(shù)校正吞噬指數(shù)、可改善DNFB誘導(dǎo)遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)，表明芪珠升白口服液具有升高白細胞、增強免疫力的作用。這為臨床中應(yīng)用芪珠升白口服液治療化療引起的白細胞減少提供了科學依據(jù)，對進一步深入探討芪珠升白口服液的作用機制奠定了良好的基礎(chǔ)。

表2 芪珠升白口服液碳粒廓清實驗的影響±s）

表2 芪珠升白口服液碳粒廓清實驗的影響±s）

注：與模型組比較，△P＜0.05；▲P＜0.01。

K a空白對照組 0.0494±0.010△ 5.744±1.143組 別 劑量（g/kg）△1.2 0.031±0.016 4.101±0.918正常對照組 0.1 0.028±0.018 4.102±0.996口服液大劑量 4.8 0.039±0.015 4.440±0.757口服液中劑量 2.4 0.059±0.017△ 5.581±0.985△口服液小劑量

[1]李儀奎.中藥藥理實驗方法學[M].上海：上海科學技術(shù)出版社，1991：157.

[2]陳 奇.中藥藥理實驗方法學[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1993：317.

[3]徐叔云，卞如濂，陳 修.藥理實驗方法學[M].第3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：1420.