蔡旭清 黃婷 蘇炳森

腹瀉屬于臨床急診中的常見疾病。其發(fā)病率高、起病急，發(fā)展快，因此要求臨床需要盡快診斷，早期對(duì)癥治療。而腹瀉的診斷需要依靠便檢的病原菌檢測(cè)結(jié)果。臨床檢驗(yàn)中一般采取細(xì)菌培養(yǎng)法，以盡早鑒定出致病菌，為臨床合理指導(dǎo)用藥。本文通過研究分析腹瀉便病原菌檢驗(yàn)的結(jié)果，總結(jié)其臨床應(yīng)用意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2009年4月～2011年4月中山火炬開發(fā)區(qū)醫(yī)院收治的240例（男131例，女109例）腹瀉患者的糞便樣本。年齡3個(gè)月～37歲，平均（18.2±1.1）歲。其中稀便77例，膿血便23例，粘液便45例，水樣便95例，觀察比較不同菌屬的檢出率。

1.2 方法 對(duì)240例腹瀉便患者的肛拭子或新鮮糞便取標(biāo)本，放置在培養(yǎng)皿中進(jìn)行常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)，再采取全自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀（法國(guó)，型號(hào)：VITEK 2Compact）進(jìn)行病原菌測(cè)定，具體步驟如下。

1.2.1 增菌與分離培養(yǎng) 選取標(biāo)本并將其接種于在NaCl結(jié)晶紫增菌液、GN增菌液、堿性的蛋白膠水里，在37℃下培養(yǎng)18～24h，然后再轉(zhuǎn)種在氯化鈉蔗糖瓊脂、SS瓊脂、MAC瓊脂、慶大霉素的瓊脂中，在37℃下培養(yǎng)18～24h[1]。

1.2.2 挑選出可疑的菌落 通過MAC瓊脂中挑選出可疑的致瀉性大腸埃希菌的菌落，經(jīng)革蘭染色，顯示為革蘭陰性桿菌，然后將其接種在三糖鐵瓊脂中，置于37℃下培養(yǎng)18～24h；通過SS瓊脂中挑選出可疑的志賀菌的菌落，呈現(xiàn)出無色半透明或者透明狀，經(jīng)革蘭染色，顯示為革蘭陰性桿菌，然后將其接種在三糖鐵瓊脂中，置于37℃下培養(yǎng)18～24h；通過NaCl蔗糖瓊脂中挑選出可疑的副溶血性弧菌的菌落，呈現(xiàn)出光滑濕潤(rùn)、圓形隆起、淺藍(lán)色，然后將其接種在NaCl三糖鐵瓊脂中，置于37℃下培養(yǎng)18～24h；通過SS瓊脂中挑選出變形桿菌的菌落，呈現(xiàn)出無色半透明狀，分布在營(yíng)養(yǎng)瓊脂上，并蔓延擴(kuò)散性生長(zhǎng)[2]。

1.2.3 生化檢測(cè) 對(duì)可疑的致瀉性大腸埃希菌、志賀菌、副溶血性弧菌、變形桿菌的菌落在生化反應(yīng)試條上進(jìn)行生化反應(yīng)，并與標(biāo)準(zhǔn)菌株在培養(yǎng)皿上生長(zhǎng)出來的典型菌落的生化反應(yīng)結(jié)果進(jìn)行對(duì)照，然后將可疑的試條置于全自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀中進(jìn)行鑒定。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)經(jīng)卡方軟件V1.61版本檢驗(yàn)，期間采取χ2檢驗(yàn)，P＜0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

240例標(biāo)本中，以志賀菌屬的檢出率最高，其次為沙門菌屬，明顯高于其它菌屬（P＜0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（見表1）。

3 討論

240例標(biāo)本中，志賀菌屬檢出率44.2%，沙門菌屬15.8%，以志賀菌屬的檢出率最高，其次為沙門菌屬，明顯高于其它菌屬，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）?？梢钥闯鲈诒姸嘀虏【幸灾举R菌為主要引起腹瀉病菌種屬，與全國(guó)的相關(guān)報(bào)道中指出的福氏志賀菌是近年來主要的流行菌株結(jié)論基本一致。目前，隨著人民生活水平日益提高，尤其在夏秋季節(jié)，人們大量進(jìn)食海產(chǎn)品或海鮮類制品，但容易存在滅菌不徹底、加熱時(shí)間不夠長(zhǎng)等現(xiàn)象。導(dǎo)致誤食了污染的海產(chǎn)品或制品后，引起副溶血性弧菌感染導(dǎo)致的腹瀉。此外，夏季由于天氣炎熱，食品放置時(shí)間長(zhǎng)，易變味腐壞，受到變形桿菌等病原菌污染。變形桿菌也是造成腹瀉便的主要病原菌之一。

表1 240例糞便標(biāo)本病原菌檢驗(yàn)結(jié)果比較[n(%)]

有報(bào)道中指出[3]，對(duì)檢出的志賀菌經(jīng)藥敏試驗(yàn)，其結(jié)果顯示大多數(shù)的菌株皆對(duì)頭孢唑啉、左氧氟沙星、頭孢噻肟等抗生素敏感，能夠作為臨床首選的治療藥物，但此類菌屬多對(duì)四環(huán)素、萘啶酸、氨芐西林、利福平類等藥物有明顯的耐藥性。同時(shí)，因?yàn)橹举R菌引起急性菌痢時(shí)，會(huì)導(dǎo)致患者的排便次數(shù)明顯增多，其排菌量相對(duì)較大，也增加了對(duì)周圍環(huán)境的污染，是重要的傳染源。因此，對(duì)于志賀菌為主要致病菌的患者，需要及時(shí)、合理地選用有效的抗生素進(jìn)行治療，阻礙其細(xì)菌傳播。需要注意的是，其藥物劑量和療程應(yīng)根據(jù)藥敏試驗(yàn)和病情綜合分析。如療程不夠長(zhǎng)，藥量不足，易導(dǎo)致治療不徹底，進(jìn)而轉(zhuǎn)變成為慢性痢疾，引起反復(fù)發(fā)作甚至遷延不愈[4]。

在基層醫(yī)院中，存在對(duì)于多種大腸埃希菌會(huì)發(fā)生有誤漏診現(xiàn)象，究其原因是由于：(1)此類病原菌與某些(種)也可以引起類似痢疾腹瀉癥狀，但非常規(guī)的病原菌檢測(cè)中的細(xì)菌，由于處于非可培養(yǎng)狀態(tài)或?qū)嶒?yàn)室的現(xiàn)有培養(yǎng)技術(shù)、培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件不適合此類微生物的生長(zhǎng)，就容易發(fā)生漏檢；(2)在進(jìn)行便培養(yǎng)時(shí)，需要以接種環(huán)對(duì)便標(biāo)本的膿血或黏液部分挑取出來，否則容易因菌量過少，無法培養(yǎng)出病原菌，導(dǎo)致檢測(cè)的陽性率降低；(3)針對(duì)可疑菌基于試探性的玻片凝集時(shí)，細(xì)菌與血清的比例使用不適當(dāng)，容易導(dǎo)致在分離產(chǎn)毒性大腸埃希菌08：K40 K47的株菌時(shí)，因細(xì)菌的抗原性不夠強(qiáng)，發(fā)生的凝集反應(yīng)較為微弱，容易在檢驗(yàn)中被忽略，造成假陰性。

綜上所述，腹瀉的發(fā)生與多因素有關(guān)，在腹瀉便的病原菌檢驗(yàn)中，除應(yīng)對(duì)致病菌進(jìn)行檢測(cè)外，還需對(duì)條件致病菌給予重視。這有助于指導(dǎo)腹瀉病的防治工作，具有重要的臨床意義。

[1]屈飛飛，王菊光，陳海平，等.128份腹瀉便病原菌檢驗(yàn)結(jié)果分析[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2008，18（6）：1109-1110.

[2]李立明.流行病學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：454-455.

[3]王珍.640例嬰幼兒急性腹瀉病原菌調(diào)查分析[J].青海醫(yī)藥雜志，2008，38（3）：72-73.

[4]楊永華，李秋海，常勇年.2003-2006年包頭市感染性腹瀉細(xì)菌病原學(xué)監(jiān)測(cè)結(jié)果[J].職業(yè)與健康，2008，24（12）：1177-1178.