王 芳 ，張變英 ，武 霞 ，上官明軍 ，張?jiān)獞c ，張紅崗 ，樊愛芳 ，趙獻(xiàn)國

（1.山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，山西太原 030032；2.左權(quán)縣畜牧局，山西左權(quán) 032600）

微生態(tài)制劑也叫活菌制劑、益生菌劑或益生素[1]，是指運(yùn)用微生態(tài)學(xué)原理研制的含有大量有益微生物的活菌制劑。這些有益菌群對動物腸道健康起著重要的作用。大量試驗(yàn)表明，乳酸桿菌、雙歧桿菌、枯草芽孢桿菌可以提高和維持腸道內(nèi)有益菌的數(shù)量，通過促進(jìn)腸道內(nèi)有益菌的生長，抑制有害菌的生長繁殖，來調(diào)整維持胃腸道內(nèi)的微生態(tài)平衡，達(dá)到預(yù)防疾病和促進(jìn)生長的目的。微生態(tài)制劑是一類新型替代抗生素的綠色環(huán)保添加劑，無毒副作用、無耐藥性、無藥物殘留[2]。1965年Lill等[3]最早將微生態(tài)制劑描述為微生物產(chǎn)生的促生長物質(zhì)；1989年Fuller[4]把微生態(tài)制劑定義為一種能夠促進(jìn)腸道內(nèi)微生物平衡，對宿主產(chǎn)生有益作用的活的微生物添加劑。

我國動物微生態(tài)制劑的研究起步于20世紀(jì)70年代[5]。何明清等[6]闡述了不產(chǎn)生腸毒素、但產(chǎn)生大腸毒素的埃希氏菌株是有益微生物。目前，微生態(tài)制劑已被應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、飼料、醫(yī)藥保健和食品等各個(gè)領(lǐng)域，其中，飼料工業(yè)中廣泛應(yīng)用的有益微生物有乳酸菌、芽孢桿菌[7]、雙歧桿菌和酵母菌等[8]。

本研究選擇枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、啤酒酵母、嗜熱鏈球菌等國家允許使用的微生物菌種研制成復(fù)合益生素，給蛋雞飼喂添加不同水平復(fù)合益生素的玉米-豆粕日糧，研究其對蛋雞生產(chǎn)性能、腸道菌群變化等的影響，旨在為生產(chǎn)飼料中合理添加復(fù)合益生素提供參考和依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)動物及試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)在左權(quán)縣某蛋雞場進(jìn)行，采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將900只海蘭褐蛋雞隨機(jī)分成3個(gè)處理組，即對照組、試驗(yàn)1組和試驗(yàn)2組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)100只雞。在日糧中分別添加0，3%，5%的復(fù)合益生素，使3組日糧營養(yǎng)水平一致。試驗(yàn)蛋雞用3層籠飼養(yǎng)，每籠4只。試驗(yàn)時(shí)間為2011年6月11日至7月23日，其中，預(yù)試期1周，正試期5周。

1.2 試驗(yàn)材料

復(fù)合益生素由山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所“安全飼料關(guān)鍵控制點(diǎn)技術(shù)研究”課題組研制，主要含有地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌和啤酒酵母菌等菌種。第1步，液體培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)，按照不同的培養(yǎng)條件培養(yǎng)24～48 h，當(dāng)活菌數(shù)達(dá)到109cfu/mL以上為標(biāo)準(zhǔn)，停止培養(yǎng)。第2步，以無菌麩皮為載體，將含有活菌的液體培養(yǎng)基與麩皮均勻攪拌，活菌數(shù)達(dá)到107～108cfu/g以上為標(biāo)準(zhǔn)，65℃烘干，快速裝袋，封口，低溫干燥保存，3個(gè)月有效，活菌數(shù)檢測為107～108cfu/g，符合標(biāo)準(zhǔn)。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)蛋雞采用3層階梯式籠養(yǎng)飼養(yǎng)方式，專人飼養(yǎng)，自由采食和飲水，環(huán)境控制及免疫按蛋雞常規(guī)飼養(yǎng)管理進(jìn)行。

1.4 日糧組成及營養(yǎng)水平

依據(jù)NRC蛋雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，配制玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧，使各組的日糧營養(yǎng)水平基本一致（表 1）。

1.5 指標(biāo)測定

1.5.1 生產(chǎn)性能指標(biāo) （1）產(chǎn)蛋率：以天為單位記錄每個(gè)重復(fù)的產(chǎn)蛋數(shù)、產(chǎn)蛋率，按每組試驗(yàn)雞只數(shù)進(jìn)行計(jì)算；（2）平均蛋質(zhì)量：每天定時(shí)稱蛋質(zhì)量并記錄，計(jì)算每組的平均蛋質(zhì)量和總蛋質(zhì)量；（3）料蛋比：記錄各組每天的耗料量，根據(jù)總蛋質(zhì)量和耗料量計(jì)算料蛋比；（4）破（軟）蛋率：記錄每個(gè)重復(fù)的破（軟）蛋數(shù)，計(jì)算出破（軟）蛋率。

表1 基礎(chǔ)日糧配方及營養(yǎng)水平

1.5.2 雞糞中乳酸菌及大腸桿菌數(shù)量 在試驗(yàn)結(jié)束的當(dāng)天取各重復(fù)小組的新鮮雞糞30 g裝入50 mL離心管中，分別進(jìn)行乳酸菌和大腸桿菌培養(yǎng)，細(xì)菌數(shù)量采用平板菌落計(jì)數(shù)法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，結(jié)果用每克腸道內(nèi)容物中細(xì)菌個(gè)數(shù)的對數(shù)（lgcfu/g）來表示。

1.6 數(shù)據(jù)處理

以重復(fù)為單位，試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS軟件中GLM中的t檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同益生素添加水平對蛋雞的生產(chǎn)性能的影響

由表2可知，添加3%，5%益生素的試驗(yàn)組均比對照組效果好，2個(gè)試驗(yàn)組的產(chǎn)蛋率和平均蛋質(zhì)量與對照組相比，差異均顯著。試驗(yàn)1組和試驗(yàn)2組與對照組相比，平均蛋質(zhì)量分別提高0.53，0.91 g，差異顯著（P＜0.05）；產(chǎn)蛋率分別提高1.72%和1.89%，差異顯著（P＜0.05）；破（軟）蛋率和料蛋比雖然差異不顯著（P＞0.05），但破（軟）蛋率分別降低13.79%和17.24%，料蛋比分別降低0.03和0.05。由此可見，益生素對蛋雞的產(chǎn)蛋性能有顯著提高。

表2 試驗(yàn)蛋雞各處理組生產(chǎn)性能分析

2.2 不同益生素添加水平對蛋雞腸道微生物菌群的影響

各處理組蛋雞腸道菌群分析列于表3。

由表3可知，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，各處理組蛋雞的腸道菌群無明顯差異（P＞0.05），但試驗(yàn)1組和試驗(yàn)2組均比對照組效果好，乳酸菌濃度分別提高了6.26%和6.52%，大腸桿菌濃度分別降低了4.79%和6.18%。

表3 試驗(yàn)蛋雞各處理組腸道菌群分離結(jié)果 lgcfu/g

3 討論

由本試驗(yàn)結(jié)果可知，在蛋雞基礎(chǔ)日糧中添加復(fù)合益生素，可以降低料蛋比和破（軟）蛋率，提高蛋雞的產(chǎn)蛋率和平均蛋質(zhì)量，增加腸道乳酸菌數(shù)量和減少大腸桿菌數(shù)量。復(fù)合益生素具有營養(yǎng)價(jià)值高，適口性好，提高動物消化率和飼料轉(zhuǎn)化率，促進(jìn)腸道有益菌群繁殖定居的優(yōu)點(diǎn)，長期使用可替代和減少抗生素的使用，改善畜產(chǎn)品品質(zhì)，提高動物生產(chǎn)性能。

地衣芽孢桿菌能促使蛋雞機(jī)體產(chǎn)生抗菌活性物質(zhì)，并具有獨(dú)特的生物奪氧作用機(jī)制，可抑制致病菌的生長繁殖和殺滅致病菌；具有較強(qiáng)的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶的活性，可促進(jìn)飼料中營養(yǎng)素降解，使動物對飼料的吸收利用更加充分。枯草芽孢桿菌能促進(jìn)有益厭氧微生物的繁殖，抑制有害細(xì)菌（大腸桿菌、沙門氏桿菌）的生長，預(yù)防腹瀉、下痢等腸胃道疾??；能降解植物性飼料中復(fù)雜的有機(jī)物，從而促進(jìn)消化吸收，提高飼料利用率，防止動物消化不良、出現(xiàn)“飼料便”等狀況；還能除臭驅(qū)蠅，減少污染，控制細(xì)菌性疾病，減少糞便中氮、磷、鈣的排泄量，減少糞便臭味及有害氣體排放，表現(xiàn)為動物糞便臭味逐步減輕，減少飼料蛋白質(zhì)分解為氨氣而浪費(fèi)掉，從而減少環(huán)境污染；還可改善蛋殼的質(zhì)量和顏色，蛋清厚稠，蛋黃鮮紅。啤酒酵母菌可改善胃腸道的菌群比例，促進(jìn)有益菌的生長繁殖，排斥病原菌在腸黏膜表面的吸附定植，防止毒素和廢物的吸收。酵母細(xì)胞壁富含蛋白質(zhì)和B族維生素，可直接作為營養(yǎng)，提供給動物多種營養(yǎng)成分，且富含甘露寡糖。

因此，增加胃腸對鐵、鋅、鎂、鈣元素的吸收利用，提高飼料利用率，可以增加動物的免疫力，提高動物血液免疫球蛋白的水平。

復(fù)合益生素是生物活性制劑，它能有效補(bǔ)充畜禽消化道內(nèi)的有益微生物。復(fù)合益生素隨飼料和飲水進(jìn)入蛋雞腸道后，大量生長繁殖，形成優(yōu)勢菌群，與有害菌爭奪氧、附著點(diǎn)和營養(yǎng)元素，競爭性地排斥或抑制有害菌的生長侵襲，從而保持消化道內(nèi)菌群平衡。益生菌在新陳代謝過程中產(chǎn)生大量的次生產(chǎn)物和活性物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、各類酶，并且合成B族維生素、氨基酸以及未知促生長因子等營養(yǎng)物質(zhì)，從而加強(qiáng)動物體的營養(yǎng)代謝，改善日糧適口性，提高飼料轉(zhuǎn)化率，促進(jìn)動物生長，增強(qiáng)動物機(jī)體的免疫力和抗病力，達(dá)到防治消化道疾病和促進(jìn)生長的雙重作用，減少對環(huán)境的污染，凈化畜舍空氣，降低動物發(fā)病率。這與李萬軍[9]、張宜輝等[10]的一些試驗(yàn)結(jié)論相似。Lange[11]認(rèn)為，有益菌還參與膽汁的代謝、膽固醇代謝及激素的轉(zhuǎn)化過程，代謝產(chǎn)生的短鏈脂肪酸和乳酸為消化道提供了酸性環(huán)境，有利于營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。

4 結(jié)論

在蛋雞日糧中添加復(fù)合益生素，可以顯著提高蛋雞的生產(chǎn)性能，改善腸道菌群，而且可以作為抗生素替代品，減少藥物殘留，提高畜禽產(chǎn)品品質(zhì)，避免長期使用抗生素的種種副作用。

動物微生態(tài)制劑是通過調(diào)劑動物自身的微生物平衡而起作用，可以給機(jī)體增加營養(yǎng)成分，提高機(jī)體對飼料消化和利用的能力，而且能夠增強(qiáng)機(jī)體的抗病力和抗各種應(yīng)激的能力，提高動物生產(chǎn)性能[12]，從而使經(jīng)濟(jì)效益提高，可為人類提供綠色畜產(chǎn)品。這符合人們回歸大自然、崇尚綠色食品的要求，因此，飼用微生物添加劑的研究與開發(fā)蘊(yùn)藏著巨大的經(jīng)濟(jì)效益和廣闊的市場前景，必將在動物生產(chǎn)中得到越來越廣泛的應(yīng)用[8]。

［1］李瑞珍，高沂，宋獻(xiàn)藝，等.后抗生素時(shí)代生物飼料添加劑研發(fā)狀況與對策[J].山西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（2）：170-173.

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