徐之勇,唐海蓉,余 燕

（河南科技學(xué)院,河南新鄉(xiāng)453003）

中藥復(fù)方制劑“消脹粉”對小白鼠胃酸含量、胃蛋白酶活力及膽汁分泌的影響

徐之勇,唐海蓉,余 燕

（河南科技學(xué)院,河南新鄉(xiāng)453003）

以中獸醫(yī)藥理論為依據(jù),取山楂、枳殼、神曲、茯苓、陳皮、白術(shù)、雞內(nèi)金、姜半夏等8味中藥組成中藥復(fù)方制劑“消脹粉”,以小白鼠為試驗對象,研究“消脹粉”對其胃酸含量、胃蛋白酶活力及膽汁分泌的影響.把48只小白鼠分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組,Ⅰ組為對照組,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組分別灌服大、中、小劑量“消脹粉”混懸液,每天給藥1次,連續(xù)給藥5 d,水合氯醛麻醉,在幽門與十二指腸結(jié)合部結(jié)扎,處死小白鼠,取胃,收集胃容物,測定小白鼠胃酸含量及胃蛋白酶活力；同樣把48只小白鼠分組,飼喂5 d,麻醉,手術(shù)穩(wěn)定后,分別在20、60 min取膽汁,檢測膽汁總量并檢測60 min時采取的膽汁中膽汁酸、膽紅素、膽固醇含量.結(jié)果表明：大、中劑量“消脹粉”組均可使小白鼠胃酸含量增加及胃蛋白酶活力增強；與對照組比較,第60 min,小劑量“消脹粉”組可明顯促進膽汁分泌（P＜0.05）；大、小劑量“消脹粉”組可使小白鼠膽汁中膽汁酸含量極顯著升高（P＜0.01）,中劑量消脹粉組可使小白鼠膽汁中膽汁酸含量明極顯升高（P＜0.05）；大、中、小劑量消脹粉組可使小白鼠膽汁中膽紅素含量極顯著升高（P＜0.01）；小劑量“消脹粉”組可使小白鼠膽汁中膽固醇含量極顯著降低（P＜0.01）“.消脹粉”能促進小白鼠胃酸分泌,增強胃蛋白酶活力,可以促進小白鼠膽汁的分泌,其中以用量為1.5 g/kg的大劑量“消脹粉”組效果最佳.

“消脹粉”；小白鼠；胃酸；胃蛋白酶活力；膽汁

消化不良（dyspepsia）是一種臨床癥候群,是由胃動力障礙所引起的疾病,影響機體對營養(yǎng)物質(zhì)的攝取.我們以中獸醫(yī)藥學(xué)理論為指導(dǎo),結(jié)合現(xiàn)代研究成果,精心選藥組方進行了純中藥復(fù)方制劑“消脹粉”的開發(fā)研究.為驗證此制劑對小白鼠胃酸含量、胃蛋白酶活力及膽汁分泌的作用效果,開展了本次試驗,為助消化藥物的開發(fā),提供實驗依據(jù)和臨床基礎(chǔ).

1 實驗材料

1.1 實驗動物

同一批健康小白鼠96只,體重18～22 g,SPF級,由新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院動物實驗中心提供.

1.2 藥品

中藥購于新鄉(xiāng)市張仲景大藥房,鑒定各藥真?zhèn)渭百|(zhì)量后,以中獸醫(yī)藥理論為依據(jù),設(shè)計組方原則及各藥配伍比例組成中藥復(fù)方“消脹粉”,取山楂、枳殼、神曲、茯苓、陳皮、白術(shù)、雞內(nèi)金、姜半夏等8味中藥,按照一定比例混合,冷水浸泡30 min,水煎3次,合并濾液,過濾,濃縮至相對密度1.25～1.30,制成清膏,將m（清膏）∶m（二氧化硅）=1∶3.5混合,干燥（經(jīng)測定水分含量低于10%）,密封貯存?zhèn)溆肹1].

1.3 實驗儀器

DY89-1型電動玻璃勻漿機,寧波新芝生物科技股份有限公司生產(chǎn)；可調(diào)式移液器,上海雷勃分析儀器有限公司生產(chǎn)；TGL-16G高速冷凍離心機,上海安亭科學(xué)儀器廠生產(chǎn)；UV1000型紫外/可見分光光度計,上海天美科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn).

2 方法與結(jié)果

2.1 消脹粉對小白鼠胃酸含量、胃蛋白酶活力的影響

取小白鼠48只,雌雄各半,隨機分為4組,定為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組分別灌服大、中、小劑量“消脹粉”混懸液（1.5 g/kg、0.8 g/kg、0.4 g/kg,用0.5%羧甲基纖維素配成0.15 g/mL、0.08 g/mL、0.04 g/mL,1 mL/100 g）；Ⅰ組為對照組,灌服同體積的0.5%羧甲基纖維素；每天給藥1次,連續(xù)給藥5 d[2],于第5天給藥1 h后（禁食不禁水12 h）,小白鼠用水合氯醛麻醉,剪去腹部的毛,常規(guī)消毒,于劍突下沿腹白線開一長約2.0 cm的切口,在幽門與十二指腸結(jié)合部結(jié)扎,縫合創(chuàng)口后,送回籠中,術(shù)后禁食禁水；術(shù)后3 h,脫頸椎處死小白鼠,取胃,收集胃容物,于3 000 r/min離心15 min,吸取上清液為胃液[3].取離心后的清晰胃液1 mL置于試管中,加入0.5%酚酞指示劑2滴,用20 mmol/L的氫氧化鈉滴定,同時不斷搖動,至紅色消失,繼續(xù)滴定直至微紅色不退為止,記錄所消耗的氫氧化鈉總毫升數(shù),算出總酸度[3],總酸度=氫氧化鈉（毫升數(shù)）×20,結(jié)果見表1.取內(nèi)徑1 mm粗細長度10 cm勻稱的毛細玻璃管,將蛋清打勻,過濾后灌滿毛細玻璃管,放在85℃的熱水中,凝固后冰箱儲存?zhèn)溆?取胃液1 mL放入10 mL帶塞離心管中,放入上述蛋白管3根,塞好塞子,37℃水浴24 h,用測量蛋白管透明部分長度,求平均值[3-4],胃蛋白酶活力=平均值×16,結(jié)果見表1.

表1 “消脹粉”對小白鼠胃酸含量和胃蛋白酶活力的影響（）Tab.1 Influence of Xiao-zhang powder on the gastric acid content and pepsin activity（

表1 “消脹粉”對小白鼠胃酸含量和胃蛋白酶活力的影響（）Tab.1 Influence of Xiao-zhang powder on the gastric acid content and pepsin activity（

注：與對照組比較,*代表P＜0.05,**代表P＜0.01.

?

從表1可以看出,Ⅱ組小白鼠胃酸含量及胃蛋白酶活力高于對照組,差異極顯著（P＜0.01）；Ⅲ組小白鼠胃酸含量及胃蛋白酶活力高于對照組,差異顯著（P＜0.05）；Ⅳ組小白鼠胃酸含量及胃蛋白酶活力與對照組比較,差異不顯著（P＞0.05）.

2.2 消脹粉對小白鼠膽汁分泌的影響

取小白鼠48只,雌雄各半,隨機分為4組,定為Ⅰ、Ⅱ、III、Ⅳ組,Ⅱ、III、Ⅳ組分別灌服大、中、小劑量“消脹粉”混懸液（1.5 g/kg、0.8 g/kg、0.4 g/kg,用0.5%羧甲基纖維素配成0.15 g/mL、0.08 g/mL、0.04 g/mL, 1 mL/100g）；Ⅰ組為對照組,灌服同體積的0.5%羧甲基纖維素；每天給藥1次,連續(xù)給藥5 d[2],于第5天給藥1 h后（禁食不禁水12 h）,以20%烏拉坦0.5 mL/100g腹腔注射麻醉小白鼠,將小白鼠仰位固定于手術(shù)板,腹部剪毛后沿腹白線（腹正中）剖開腹腔2～3 cm,沿十二指腸降部腸系膜（距幽門約1 cm）看到白色透明具有韌性的膽總管,在接近十二指腸開口處,向肝臟方向剪“V”形口,將膽汁引流管插入膽總管,引出腹壁,結(jié)扎固定[3,5],穩(wěn)定,分別在20、60 min,用小試管收集所分泌的膽汁（mL）.60 min時取的膽汁,用無菌管收集,離心20 min,3 000 r/min,仔細收取上清,膽汁中總膽汁酸（TBA）含量采用酶聯(lián)免疫分析（ELISA）測定,根據(jù)試劑盒說明書提示步驟進行含量檢測；膽汁中總膽固醇含量采用氧化酶法測定,全自動生化儀檢測；膽汁中總膽紅素含量采用咖啡因法測定,紫外/可見分光光度計檢測.結(jié)果見表2、表3.

表2 “消脹粉”對小白鼠膽汁分泌的影響（）Tab.2 The influence of Xiao-zhang powder on the secretion of bile（）

表2 “消脹粉”對小白鼠膽汁分泌的影響（）Tab.2 The influence of Xiao-zhang powder on the secretion of bile（）

注：*表示與空白對照組比較P＜0.05.

?

從表2可看出,穩(wěn)定20 min后,各組膽汁流量基本一致,差異不顯著（P＞0.05）；第60 min后,實驗組與對照組比較,小劑量“消脹粉”組可明顯促進膽汁分泌（P＜0.05）,大、中劑量消脹粉組對膽汁分泌僅有促進趨勢.

表3 “消脹粉”對小白鼠膽汁中膽汁酸、膽紅素、膽固醇含量的影響（）Tab.3 The influence of Xiao-zhang powder on the content of bile acids、bilirubin and cholesterol of mice（）

表3 “消脹粉”對小白鼠膽汁中膽汁酸、膽紅素、膽固醇含量的影響（）Tab.3 The influence of Xiao-zhang powder on the content of bile acids、bilirubin and cholesterol of mice（）

注：**表示與空白對照組比較P＜0.01,*表示與空白對照組比較P＜0.05.

從表3可看出,與空白對照組比,大、小劑量“消脹粉”組可使小白鼠膽汁中膽汁酸含量極顯著升高（P＜0.01）,中劑量“消脹粉”組可使小白鼠膽汁中膽汁酸含量明顯升高（P＜0.05）；大、中、小劑量“消脹粉”組可使小白鼠膽汁中膽紅素含量極顯著升高（P＜0.01）；小劑量“消脹粉”組可使小白鼠膽汁中膽固醇含量極顯著降低（P＜0.01）.

3 討論

“消脹粉”是根據(jù)中獸醫(yī)藥理論所擬定,由山楂、枳殼、神曲、茯苓、陳皮、白術(shù)、雞內(nèi)金、姜半夏組成,諸藥合用治療功能性消化不良、腹脹等.其中,山楂含酒石酸、山楂酸、黃酮類、糖類及甙類等,能增加胃中消化酶的分泌；神曲具有消食和胃之功效,用于飲食積滯證；茯苓,性味甘、淡、平,歸心、脾、腎經(jīng),利水滲濕、健脾安神；雞內(nèi)金主要用于消食；白術(shù),性味苦、甘、溫,歸脾、胃經(jīng),健脾益氣,燥濕利火；陳皮,性味苦,辛、溫,歸肺、脾經(jīng),具有理氣健脾,燥濕化痰之功效；枳殼具有行氣導(dǎo)滯之功效；姜半夏有化痰止嘔、散結(jié)之功效.諸藥合用具有消食、利濕、化痰之功效[6].

胃液是消化道重要的消化液,由胃粘膜中的壁細胞、主細胞和粘液細胞分泌,其主要成分是胃酸、胃蛋白酶等.胃內(nèi)的鹽酸有許多作用,其中之一就是激活胃蛋白酶原,使之轉(zhuǎn)變?yōu)橛谢钚缘奈傅鞍酌?并為胃蛋白酶的作用提供必要的酸性環(huán)境；而胃蛋白酶則能水解食物中的蛋白質(zhì),起到促消化的作用[7].本試驗研究表明：大、中劑量“消脹粉”組均可使小白鼠胃酸含量增加及胃蛋白酶活力增強,說明“消脹粉”能促進胃酸分泌,增強胃蛋白酶活力,有助食物的消化,故可以改善厭食、腹脹、消化不良等癥狀.這與何梅等[4]、張涵等[8]的研究結(jié)果具有相似性,但效果更佳.

“消脹粉”富含多種生物活性物質(zhì),可以通過多種途徑來調(diào)節(jié)機體.本試驗研究表明：與對照組比較,小劑量“消脹粉”組可明顯促進膽汁分泌（P＜0.05）；大、小劑量“消脹粉”組可使小白鼠膽汁中膽汁酸含量極顯著升高（P＜0.01）,中劑量“消脹粉”組可使小白鼠膽汁中膽汁酸含量明顯升高（P＜0.05）；大、中、小劑量“消脹粉”組均可使小白鼠膽汁中膽紅素含量極顯著升高（P＜0.01）；小劑量“消脹粉”組可使小白鼠膽汁中膽固醇含量極顯著降低（P＜0.01）.說明灌注“消脹粉”可以提高小白鼠膽汁的分泌量以及改善膽汁的質(zhì)量,促進小白鼠的消化.這與高博等、李從存等的研究結(jié)果相近[9-10],但效果更明顯.

4 結(jié)論

“消脹粉”能促進小白鼠胃酸分泌,增強胃蛋白酶活力；同時“消脹粉”增加小白鼠膽汁的分泌,提高小白鼠膽汁中膽紅素含量,降低了小白鼠膽汁中膽汁酸以及膽固醇含量,小白鼠消化能力增強.綜合以上研究結(jié)果,其中以用量為1.5 g/kg的大劑量“消脹粉”組對增強小白鼠消化能力效果最好.

[1]單提新,王春元,顧文松,等.強普素對蛋雞產(chǎn)蛋性能的影響[J].中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志,2008（5）：38-39.

[2]徐叔云.藥理實驗方法學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社,l991.

[3]苗明三.實驗動物與動物實驗技術(shù)[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社,1997：230．

[4]何梅,楊月欣.酸乳對大鼠胃酸及胃蛋白酶分泌的影響[J].衛(wèi)生研究,1999（6）：348-349.

[5]文莉,陳靚,舒成仁.幾種中藥煎液對大鼠膽汁排出的影響[J].時珍國醫(yī)國藥,2005,16（2）：114.

[6]張慈安,武峰,毛竹君,等.姜半夏乙醇提取物對人胃腺癌細胞內(nèi)pH值的影響[J].中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報,2011,9（8）：894-900.

[7]沈霞芬.家畜組織學(xué)與胚胎學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社,2011：148.

[8]張涵,巫燕莉,杜群,等.消食飲對大鼠胃酸、胃蛋白酶的影響[J].江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2011（1）：68-69.

[9]高博,潘建新,顧振綸.苦黃口服制劑對大鼠膽汁分泌的影響[J].中草藥,2000,31（3）：200-202.

[10]李從存,王明貴.自擬”三金湯”促進膽汁分泌66例臨床觀察[J].中國社區(qū)醫(yī)師：醫(yī)學(xué)專業(yè),2009（19）：121.

（責(zé)任編輯：盧 奇）

Influence of traditional Chinese medicine-Xiao-zhang powder on gastric acid content and pepsin activity and the secretion of bile on mice

Xu Zhiyong,Tang Hairong,Yu Yan
（Henan Institute of Science and Technology,Xinxiang 453003,China）

Xiao-zhang powder is based on veterinary medicine theory,which is composed of hawthorn,bitter orange, medicated leaven,Poria cocos,tangerine peel,Atractylodes macrocephala,Gallus gallus domesticus and Ginger pinellia. As a test annimal,mice was divided intoⅠ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳgroup.and the groups ofⅡ,ⅢandⅣwere fed on big,medium, small doses of Xiao-zhang powder,which were administered once a day for consecutive 5 days.Anesthesia,and this test ligatted the junction of pyloric and duodenal,and took the stomach,which determinated the acid content and pepsin activity of the mouse by collecting the stomach contents；After surgical stabilization,the test adoptted the bile of the mice which were divided into the groups by the sane way in 20,60 minutes,and detected bile acids,bilirubin, cholesterol content of bile which was adoptedin 60 minute.Big,small-doses powder could increase gastric acid content and enhance pepsin activity；The group of small doses of Xiao-zhang powder can significantly promote bile secretion（P＜0.05）；the groups of large,low-doses powder can increase bile acid content significantly（P＜0.01）；the group of medium-doses powder can increase bile acid content significantly（P＜0.05）；the groups of large,medium and small-doses powder can increase mice bile bilirubinbile significantly（P＜0.01）；the group of small-doses powder can decrease bile cholesterol content significantly（P＜0.01）.Xiaozhang powder can promote the mice gastric acid secretion,and enhance the vitality of pepsin,Xiaozhang powder can promote the secretion of bile of mice.The besteffect is the group of 1.5 g/kg Xiao-zhang powder.

Xiao-zhang powder；mice；gastric acid；pepsin activity；bile

S859.79

A

1008-7516（2012）04-0030-04

10.3969/j.issn.1008-7516.2012.04.008

2012-06-11

徐之勇（1980-）,男,山東臨沂人,碩士,講師.主要從事動物營養(yǎng)代謝疾病病理學(xué)研究.