唐萬(wàn)兵 李梅笑 李觀強(qiáng) 武 勝 萬(wàn)彥彬 韋 深 蔡潔丹

1.廣東省深圳市龍崗區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東深圳 518172；2.廣東省深圳市龍崗區(qū)人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，廣東深圳 518172；3.廣東省深圳市龍崗區(qū)人民醫(yī)院影像科，廣東深圳 518172

近年來(lái)，腦梗死的發(fā)病率出現(xiàn)增高趨勢(shì)，其病程涉及到炎癥反應(yīng)、凝血障礙等因素，是一個(gè)復(fù)雜的病理生理過(guò)程。纖維蛋白原是凝血因子Ⅰ，它的含量與凝血酶活性有關(guān)；IL-17是一種新近命名的Th17細(xì)胞來(lái)源的強(qiáng)有力的炎癥細(xì)胞因子，主要由CD4+T細(xì)胞分泌，與廣泛存在的IL-17受體結(jié)合產(chǎn)生促炎癥反應(yīng)，是近年來(lái)人們研究的熱點(diǎn)。本課題研究IL-17水平變化來(lái)評(píng)估它們與腦梗死病程的關(guān)系，為預(yù)防及治療腦梗死提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇本院2010年10月～2011年12月神經(jīng)內(nèi)科住院的50例急性腦梗死患者，男32例，女18例，年齡36～85歲，平均（67.2±16.9）歲，發(fā)病時(shí)間 30 min～8 h，平均 4 h，發(fā)病為首次或上次未留后遺癥，無(wú)短暫缺血發(fā)作，無(wú)心臟病和腎臟等病史，并經(jīng)頭顱CT或MRI檢查確診；健康對(duì)照組20例，為我院體檢中心體檢者，均排除腦血管病、心肌梗死、周圍血管病、甲狀腺疾病、結(jié)核、肝腎臟疾病等。分組：50例腦梗死患者發(fā)病24 h內(nèi)，根據(jù)頭部CT或MRI病灶大小，梗死體積按Pullicino公式（長(zhǎng)×寬×層數(shù)/2）計(jì)算，分為大梗死組（病灶體積＞10 cm3）8 例，中梗死組（病灶體積 4～10 cm3）15 例，小梗死組 （病灶體積＜4 cm3）27例。分型：50例腦梗死患者發(fā)病24 h內(nèi)，根據(jù)1995年全國(guó)第4屆腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議制定的腦卒中患者臨床神經(jīng)功能受損程度按照入院時(shí)NIHSS中風(fēng)評(píng)分，分為重型組（30～42 分）10 例，中型組（15～29 分）14 例，輕型組（0～14分）26 例。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集和處理 腦梗死組分別在發(fā)病后24 h內(nèi)靜脈采集檸檬酸鈉（1∶9）抗凝管3 mL，充分混勻以3 000 r/min離心15 min，F(xiàn)IB必須在2 h內(nèi)檢測(cè)完畢。IL-17如不能立即檢測(cè)，吸取足量血漿后放-70℃冰箱待檢，復(fù)融后30 min內(nèi)檢測(cè)。

1.2.2 試劑與儀器 上海錦珈生物科技有限公司的人IL-17 ELISA試劑盒，試劑號(hào)：DRE10416。-70℃SANYO冰箱，PW-812自動(dòng)洗板機(jī)，RT-6000型酶標(biāo)儀 （性能評(píng)價(jià)符合要求），Sysmex CA-6000全自動(dòng)血凝儀及Dade Behring試劑。

1.2.3 實(shí)驗(yàn)方法 IL-17采用雙抗體夾心ELISA法，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書操作，以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的IL-17濃度由酶標(biāo)儀根據(jù)其OD值自動(dòng)計(jì)算，再乘以稀釋倍數(shù)；FIB結(jié)果由全自動(dòng)血凝儀檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組間的比較用單因素方差分析，組間的比較采用LSD-t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組間FIB、IL-17的檢測(cè)結(jié)果及與梗死體積的相關(guān)性

大梗死組發(fā)病24 h內(nèi)FIB、IL-17水平明顯高于對(duì)照組（P＜0.01）；中、小梗死組發(fā)病24 h內(nèi)FIB、IL-17水平高于對(duì)照組（P＜0.05）；大梗死組FIB、IL-17水平高于小梗死組（P ＜ 0.05）；腦梗死體積與 FIB 水平呈正相關(guān)（r=0.316），與IL-17水平呈正相關(guān)（r=0.331）。見(jiàn)表1。

表1 各組間FIB、IL-17的檢測(cè)結(jié)果及與梗死體積的相關(guān)性 （x±s）

2.2 各型間FIB、IL-17的檢測(cè)結(jié)果及與NIHSS評(píng)分的相關(guān)性

重型組發(fā)病24 h內(nèi)FIB、IL-17水平明顯高于對(duì)照組（P＜0.01）；中、小型組發(fā)病24 h內(nèi)FIB、IL-17水平高于對(duì)照組（P ＜ 0.05）；重型組 FIB、IL-17水平高于輕型組（P ＜ 0.05）；腦梗死神經(jīng)功能受損程度NIHSS評(píng)分與FIB水平呈正相關(guān)（r=0.338），與 IL-17 水平呈正相關(guān)（r=0.325）。見(jiàn)表 2。

表2 各型間FIB、IL-17的檢測(cè)結(jié)果及與NIHSS評(píng)分的相關(guān)性（x±s）

3 討論

腦梗死是目前嚴(yán)重威脅中老年人健康的主要疾病之一，目前，其發(fā)病機(jī)制尚不清楚。有關(guān)腦梗死進(jìn)展方面尚缺乏有效的預(yù)測(cè)手段。目前對(duì)腦梗死的診斷和臨床觀察多依賴頭部CT、磁共振、腦電圖及腦血流圖檢查，對(duì)腦梗死診斷及預(yù)后判斷方面有意義的臨床檢驗(yàn)指標(biāo)很少[1-2]。

纖維蛋白原在凝血酶的作用下，釋放出纖維蛋白肽A和纖維蛋白肽B后，生成纖維蛋白單體，沉積于血管壁，損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞而促進(jìn)動(dòng)脈硬化，刺激平滑肌細(xì)胞增生遷移，增加血液黏稠度和影響白細(xì)胞及游離脂肪酸，從而促使血栓形成。本研究結(jié)果顯示：大梗死組、重型組發(fā)病24 h內(nèi)FIB水平明顯高于對(duì)照組（P＜0.01），中梗死組、小梗死組、中型組、輕型組發(fā)病24 h內(nèi)FIB水平高于對(duì)照組（P＜0.05）。大梗死組與小梗死組比較，重型組與輕型組比較，F(xiàn)IB水平增高（P＜0.05）。FIB水平與梗死體積呈正相關(guān)（r=0.316），與腦梗死神經(jīng)功能受損程度NIHSS評(píng)分呈正相關(guān)（r=0.338）。大量研究表明，腦梗死患者發(fā)病前血液呈高凝狀態(tài)[3-5]。FIB的高濃度水平會(huì)直接導(dǎo)致血液的高黏、高凝狀態(tài)，增強(qiáng)紅細(xì)胞和血小板的聚集性，影響組織器官的血液灌注，甚至促使血栓形成。高FIB濃度是腦梗死發(fā)生及預(yù)后不良的原因之一。

IL-17的基因位于人染色體6p12，該蛋白含有155個(gè)氨基酸，分子質(zhì)量為35 ku，是一個(gè)由二硫鍵連接的同源二聚體組成的糖蛋白，IL-17主要由記憶性T淋巴細(xì)胞分泌，在天然免疫和宿主防御中發(fā)揮作用調(diào)控粒細(xì)胞生成，對(duì)細(xì)胞外病原體的入侵產(chǎn)生阻斷作用，同時(shí)和自身免疫性疾病關(guān)系密切[6-8]。本研究結(jié)果顯示：大梗死組、重型組發(fā)病24 h內(nèi)IL-17水平明顯高于對(duì)照組（P＜0.01），中梗死組、小梗死組、中型組、輕型組發(fā)病24 h內(nèi)IL-17水平高于對(duì)照組（P＜0.05）。大梗死組與小梗死組比較，重型組與輕型組比較，IL-17水平增高（P＜0.05）。 IL-17水平與梗死體積呈正相關(guān)（r=0.331），與腦梗死神經(jīng)功能受損程度NIHSS評(píng)分呈正相關(guān) （r=0.325）。國(guó)內(nèi)外的研究證實(shí)，大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞后1 h IL-17即輕度增高，缺血后6 d時(shí)達(dá)高峰，IL-17 mRNA表達(dá)上調(diào)可誘導(dǎo) IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α 和 ICAM-1 表達(dá)[9-10]。 隨著腦微血管栓塞，炎癥加重，IL-17應(yīng)激性增高，與多種細(xì)胞因子產(chǎn)生協(xié)同作用以放大炎癥反應(yīng)，使腦部缺血、缺氧、神經(jīng)元損傷加重。IL-17水平越高，腦梗死病情也越嚴(yán)重，預(yù)后也越差。

綜上所述，腦梗死患者血漿纖維蛋白原、IL-17水平與病程密切相關(guān)，早期治療并改善患者高凝狀態(tài)，有效阻斷IL-17會(huì)減少損傷性細(xì)胞因子的產(chǎn)生，減輕梗死后腦組織損傷有極其重要的意義。在發(fā)病的早期檢測(cè)血漿纖維蛋白原、IL-17水平有助于腦梗死的預(yù)防、診斷及預(yù)后的評(píng)估。

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